张秀丽
(繁峙县第一人民医院,山西 繁峙 034300)
标本溶血是由各种因素如真空采血时负压过大、水浴箱中温度偏高、离心分离血清时转速过高等造成红细胞破裂,而使血红蛋白逸出红细胞的一种现象[1]。检测血样溶血现象是临床生化检测中最常见的干扰因素之一。标本溶血可分为体外溶血与体内溶血,其中,体外溶血多由物理因素(如抽血时负压过大、水浴温度过高、冰冻、振荡等机械性破坏),化学因素(血样接触表面活性剂)以及代谢因素(如遗传病引起红细胞脆性增加)导致;体内溶血则主要由物理因素(如人工心脏瓣膜或大血管手术后)、化学因素(如恶性疟疾)以及药物毒性反应等因素引起。随着真空管采血越来越多地应用于临床生化检验,标本溶血现象日趋频繁。由标本溶血导致白细胞、血小板、红细胞等血细胞破坏所释放的某些胞内成分已对临床生化指标造成严重干扰。本文通过研究标本溶血现象对临床生化指标测定结果的影响,探讨溶血标本的防治措施,以提高临床生化检验的准确性。现总结报告如下。
选取2010年2月—2011年2月我院30例健康体检者的血液标本,所有体检者均行早晨空腹血4mL,分别注入两支干燥试管各2mL,其中一试管置低温冰箱冻结20min后,取出融化,以4000r/min离心5min,分离溶血血清;另一试管在取血1h后以相同条件离心,分离不溶血血清,管内血清无肉眼可见的黄疸与脂浊。
选取经过血细胞学分析红细胞比容(HCT)40%±2%,分离血清备用;剩余压积红细胞置20℃环境1h后,取出化冻、震荡混匀并进行离心,取上层溶血液2,4,6,8,10,12,14,16,18,20μL,分别加入600μL血清中,制备成不同程度的溶血标本。
取上述溶血血清及非溶血血清,分别测定其DBIL、AST、TP、GLu、TBIL、ALT、ALP、UA、TBA、GGT、Crea、LDH、Cr、TCH、α-HBD、TG、CK等常规生化项目。
所有数据均应用SPSS11.3统计软件进行统计分析,用均数±标准差表示,结果采用t检验。
与正常标本的生化项目检验结果比较,受溶血影响的生化项目较实际数值偏高,且因溶血程度的不同及生化检测项目的不同所产生的检验干扰也有所不同。
其中,标本轻微溶血(H=1,Hb=0.94±0.27g/L)时产生干扰的干扰项目有LDH、AST、CK、AFU、K+、CK-MB、Na+、IP、C1-以及Ca2+;标本严重溶血时(H≥10,Hb=8.27±0.56g/L)对绝大多生化项目均会产生不同程度干扰,最高干扰程度达1521%(CK-MB)。
溶血是临床生化检验中最常见的干扰因素之一,标本溶血产生的白细胞、红细胞以及血小板等血细胞破裂所释放的某些胞内成分均会对临床生化指标的测定结果造成不同程度的干扰,从而影响检测结果的准确性。通常情况下,标本血细胞高浓度组分逸出使得血浆分析物浓度增加,如血细胞中某一分析物浓度高出血浆浓度过多,相对应的,血浆中该成分的浓度也会随之增高,进而导致项目检验结果高于实际数值。
红细胞内外液的浓度差是标本溶血产生干扰的主要原因。一般而言,红细胞内浓度较血浆中浓度明显高的物质如下:CK(68倍)、K+(25倍)、AST(11倍)、ALT(8倍)等[2];其次,红细胞外血红蛋白达到一定程度会对比色检测产生一定影响;此外,样本溶血引起细胞内外液之间的各种反应也是影响项目检测结果的重要原因。
大量临床实践表明,生化检验结果能否真实反应患者血清实际状况具有十分重要的临床意义。传统生化检测项目中通常采用干化学法在其干片涂层中附着特殊胶膜,以有选择性地过滤、吸附过程中的干扰物[3]。但本文实验结果表明,标本溶血几乎会对所有生化项目的检验结果产生干扰,尤其是对CK、K+、ALT、ALT、GLu等项目的干扰更为严重,导致其检验数值极大地偏高。以血清葡萄糖(GLu)的下降原因为例,有学者经过试验证明:可排除血红蛋白(HB)对葡萄糖氧化酶的直接抑制作用,引起血清葡萄糖(GLu)及以上生化项目检验值降低的原因可大致归为以下方面影响机制所致:①随着溶血进入血清,红细胞中浓度极低的物质与红细胞内液体引起了血清体积增加,对血清产生了一定的稀释作用[4],造成标本血清中原有成分浓度降低;②红细胞中的部分成分溶解到血清中干扰结果反应,如对葡萄糖氧化酶的活性抑制及检验中试剂的化学反应等。
标本溶血会导致临床常用生化项目指标偏差,因此,为减少检验失误及误差,提高检验结果的准确性,一旦发现有溶血标本,应立即采取相应解决措施,如对轻度溶血标本检验结果进行较正,甚至重新抽取血标本;也可从方法学方面减少甚至克服溶血干扰,比如血红蛋白(HB)对吸光度的干扰可通过设置样品空白或改用双波长比色来解决。
综上,随着近年全自动生化分析仪的快速普及,血清标本是否溶血的检验已成为临床生化项目过程中进行质量监控的重要环节。
[1]庄俊华.临床生化检验技术[M].北京:人民卫生出版社,2009.
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