苏木乙酸乙酯部位的化学成分研究*

唐开亮 ，殷志琦 **，张 健 ，张庆文 ，蔡 璐 ，叶文才 ，4

1中国药科大学 天然药物化学教研室，南京 210009；2江苏省中医药研究院 转化医学实验室，南京 210028；

3澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室，澳门 999078；

4暨南大学 中药及天然药物研究所，广州 510632

苏木为豆科云实属植物苏木（Caesalpinia sappan L.）的干燥心材，被《中国药典》（一部）收载，为我国传统中药，具有去肿消炎、抗菌利胆、活血化瘀之功效。临床上主要用于治疗跌打损伤，经闭痛经，产后淤阻，胸腹刺痛，外伤肿痛[1]。此外，苏木作为天然色素，广泛用于食品、日化、皮革及植物染色等行业，在病理实验中还被用作细胞组织切片的染色剂[2]。国内外学者针对苏木的化学成分进行了系统的研究，发现其主要含有苏木素类、原苏木素类、高异黄酮类、査耳酮类及其他黄酮类成分[3-5]。为进一步探索其有效成分,本课题组对苏木化学成分进行了研究,从醇提物乙酸乙酯部位分离并鉴定15个化合物,其中化合物5～7、9～13为首次从苏木植物中分离得到。

1 实验部分

1.1 药材

苏木药材购自亳州药材市场，产于安徽各地，经中国药科大学生药教研室秦民坚教授鉴定为苏木Caesalpinia sappan L.的干燥心材，标本保存于中国药科大学天然药物化学教研室。

1.2 仪器与试剂

X-4熔点测定仪（温度计未校正）；Bruker AV-500和AV-300型核磁共振仪；Agilent 1100 Series LC/MSD Trap质谱仪。

柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；薄层色谱硅胶GF254（烟台化工研究所）；Sephadex LH-20（美国Pharmacia公司）；所用试剂均为市售分析纯。

1.3 提取与分离

干燥的苏木饮片10 kg，80%乙醇加热回流提取3 次，时间分别为 2 h、2 h、1.5 h，提取液合并、减压浓缩至无醇味。浓缩液加适量的水，用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯部分（约1.0 kg）和水部分（约1.0 kg）。乙酸乙酯萃取部位（820 g）经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱 （100∶0→100∶100），TLC 检识，合并得到5个流份（Fr.1～5）。从Fr.5中经硅胶柱色谱分得化合物 1（10 mg）、2（10 g）、3（10 mg）、4（1 g）。 Fr.2 经硅胶柱色谱以石油醚-乙酸乙酯（100∶1→100∶100）梯度洗脱，Sephadex LH-20 柱色谱经氯仿-甲醇（1∶1）纯化，结合重结晶分别得到化合物 5（100 mg）、6（10 mg）、7（200 mg）、8（10 mg）、9（10 mg）、10（10 mg）、11（10 mg）、12（10 mg）、13（10 mg）。 Fr.3 经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇（100∶1→100∶20）梯度洗脱，Sephadex LH-20 柱色谱以氯仿-甲醇（1∶1）为洗脱剂纯化，结合重结晶得化合物14（50 mg）、15（10 mg）。

2 结构鉴定

化合物5 白色针状结晶 （甲醇），mp 288～290℃，ESI-MS m/z：455[M-H]-。1H-NMR（C5D5N，500 MHz） δ：5.50（1H，t，J=3.0 Hz，H-12），3.46（1H，m，H-3ɑ），2.64 （1H，d，J=10.5 Hz，H-18），1.26（3H，s），1.24（3H，s）1.07（3H，s），1.04（3H，s），1.01（3H，d，J=6.3 Hz，H-30），0.96 （3H，d，J=6.3 Hz，H-29），0.91（3H，s）。13C-NMR （C5D5N，125 MHz）δ：179.9 （C-28），139.3 （C-13），125.7 （C-12），78.2 （C-3），55.9（C-5），53.6 （C-18），48.2 （C-17），48.1 （C-9），42.5（C-14），40.0 （C-8），39.5 （C-19），39.4 （C-4），39.4（C-20），39.1 （C-1），39.0 （C-10），37.5 （C-7），37.1（C-22），33.6（C-21），31.1（C-23），28.8（C-15），28.7（C-2），24.9（C-16），23.8（C-11），23.8（C-27），21.4（C-30），18.6（C-6），17.5（C-26），17.5（C-29），16.6（C-24），15.5（C-25）。 以上波谱数据与文献[6]对照一致，确定化合物5为熊果酸（ursolic acid）。

化合物6 白色粉末 （甲醇），mp 308～310℃，Libermann-Burchard反应显紫色，与齐墩果酸对照品在TLC中的Rf值及显色行为一致，且两者混合熔点不下降，因此确定化合物6为齐墩果酸（oleanolic acid）。

化合物7 黄色针状结晶（甲醇），mp 96～98℃，ESI-MS m/z：271[M-H]-。1H-NMR（CD3COCD3，300 MHz） δ：8.86（1H，s，8-OH），7.72（1H，s，H-9），7.61（1H，dd，J=8.8 Hz，H-5），7.42（2H，d，J=11.4，1.8 Hz，H-2′，6′），7.06（2H，d，J=11.4，1.8 Hz，H-3′，5′），6.65（1H，d，J=8.8 Hz，H-6），5.36（2H，d，J=1.8 Hz，H-2），3.82 （3H，s，4′-OCH3），3.88 （3H，s，7-OCH3）。13CNMR（CD3COCD3，75 MHz） δ：180.8（C-4），161.8（C-4′），157.3 （C-7），156.0（C-8a），136.5 （C-9），133.0（C-2′，6′），130.1（C-8），128.0（C-1′），124.2（C-5），117.2（C-3），115.2 （C-4a），115.1 （C-3′，5′），111.4（C-6），69.0（C-2），61.2（7-OCH3），55.8（4′-OCH3）。以上波谱数据与文献[7]对照一致，确定化合物7的结构为高异黄酮类化合物缠结素（intricatin）。

化合物9 无色针状结晶（丙酮），mp 143～148℃，ESI-MS m/z：183[M-H]-。1H-NMR（CD3COCD3，300 MHz） δ：8.05 （1H，s，-OH），6.13 （2H，s，H-2，6），3.74（6H，s，3，5-OCH3），3.62（3H，s，4-OCH3）。13CNMR （CD3COCD3，75 MHz） δ：154.9 （C-1，3，5），132.6 （C-4），94.0 （C-2，6），60.6 （3，5-OCH3），56.2（4-OCH3）。以上波谱数据并与文献[8]对照一致，确定化合物 9 的结构为 3，4，5-三甲氧基苯酚（3，4，5-trimethoxyphenol）。

化合物10 淡黄色针状结晶（丙酮），mp 111～112℃，ESI-MS m/z：181[M-H]-。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz） δ：9.78（1H，s，-CHO），9.58（1H，s，4-OH），7.21（2H，s，H-2,6），3.84（6H，s，-OCH3）。13CNMR （DMSO-d6，75 MHz） δ：191.1（-CHO），148.1（C-3,5），142.1（C-4），127.1（C-1），107.6（C-2,6），56.4（-OCH3）。综合以上波谱数据并与文献[9]对照，确定化合物10的结构为丁香醛（syringaldehyde）。

化合物11 黄色粉末 （甲醇），mp 80～82℃，ESI-MS m/z：177[M-H]-。1H-NMR （CDCl3，300 MHz） δ：9.64 （1H，d，J=7.5 Hz，-CHO），7.40（1H，d，J=15.9 Hz，H-8），7.13 （1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H-6），7.07 （1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.96 （1H，d，J=8.2 Hz，H-5），6.59 （1H，dd，J=15.9，7.7 Hz，H-7），3.97（3H，s，-OCH3）。13C-NMR （CDCl3，75 MHz） δ：193.5（-CHO），153.0（C-8），149.0（C-4），146.9（C-3），126.6（C-1），126.4（C-7），124.0（C-6），115.0（C-5），109.5（C-2），56.0（-OCH3）。 以上波谱数据与文献[10]对照一致，确定化合物11的结构为松柏醛（coniferylaldehyde）。

化合物12 白色粉末 （甲醇），mp 210～211℃，ESI-MS m/z：167[M-H]-。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz） δ：7.42 （2H，m，H-2，5），6.81 （1H，d，J=8.0 Hz），3.84 （3H，s，-OCH3）。13C-NMR （DMSO-d6，75 MHz） δ：167.6（-COOH），150.4（C-4），147.0（C-3），123.6 （C-6），114.8 （C-5），112.8 （C-2），55.5 （-OCH3）。以上波谱数据与文献[6]对照，确定化合物12的结构为香草酸（vanillic acid）。

化合物13 无色结晶 （甲醇），mp 205～209℃，ESI-MS m/z：197[M-H]-。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz） δ：7.20 （2H，s，H-2，6)，3.79 （6H，s，3，5-OCH3）。13C-NMR （DMSO-d6，75 MHz） δ：167.8（-COOH），147.3（C-3，5），139.5 （C-4），122.4 （C-1），107.1（C-2，6），55.9（3，5-OCH3）。 综合以上波谱数据并与文献[11]对照，确定化合物13的结构为4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸（4-hydroxy-3，5-dimethoxy bezoic acid）。

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