667例非淋菌性尿道炎患者支原体感染率检测与耐药性分析

2012-12-07 09:02张一沙孙爱华
医学研究杂志 2012年2期
关键词:泌尿生殖道阿奇

张一沙 吴 颖 张 怡 孙爱华

支原体是引起非淋性尿道炎(non-gonococcal urethritis,NGU)的重要病原体,包括解脲支原体(ureaplasma urealyticum,Uu)和人型支原体(mycoplasma hominis,Mh),也可引起慢性前列腺炎、子宫内膜炎、输卵管炎以及盆腔炎等泌尿生殖道的其他疾病[1,2]。近年来,NGU发病率不断增高,报告的病例数已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位,另由于治疗的不规范,其耐药性也在不断增加[1~4]。为了解本地区支原体感染及其耐药情况,笔者对2009年1月~2010年6月于浙江省台州市中西医结合医院和温岭市中医院泌尿科和妇产科就诊的667例疑为泌尿生殖道感染患者进行支原体检测,并对支原体培养阳性标本进行药敏试验,为临床合理用药提供依据。

材料与方法

1.临床资料:2009年1月~2010年6月于浙江省台州市中西医结合医院和温岭市中医院泌尿科和妇产科就诊的667例疑为泌尿生殖道感染患者,其中女性378例,男性289例,年龄19~63岁,平均年龄41.5岁。临床表现为女性患者多以阴道分泌物异常或有瘙痒等不适,男性患者多以尿痛、尿道灼热、尿道痒感或有乳白色黏液样分泌物,少数患者可无症状。

2.标本采集:女性扩阴后,拭去宫颈分泌物,再用新的无菌棉拭子插人宫颈1~2cm旋转360°后停留30s,取柱状上皮细胞;男性患者用无菌细小棉拭子缓慢插入尿道2~4cm处,捻转1周并停留30s后取柱状上皮细胞标本。所有标本均立即送检。

3.方法与原理:(1)试剂:支原体鉴定及药敏试剂盒IST2由法国生物梅里埃公司生产。试剂盒由培养基和试剂条组成。药敏试剂盒内含分别包被有9种抗生素,除原始霉素只有1个浓度为2mg/L外,其余8种抗生素及其高低浓度分别为:强力霉素(4mg/L、8mg/L)、四环素(4mg/L、8mg/L)、交沙霉素(2mg/L、8mg/L)、氧氟沙星(1mg/L、4mg/L)、红霉素(1mg/L、4mg/L)、克拉霉素 (1mg/L、4mg/L)、阿奇霉素(0.12mg/L、4mg/L)、环丙沙星(1mg/L、2mg/L)。(2)原理:培养基中含有蛋白胨、酵母抽提物、血清、生长因子等营养物质,并加有尿素、精氨酸。在选择培养基中解脲脲原体和人型支原体分别利用尿素、精氨酸作为代谢底物维持生长并产碱,产生的碱性物质使培养基的pH值升高,培养基中酸碱指示剂酚红发生由黄(阴性颜色)到红(阳性颜色)的颜色变化。(3)操作:严格按试剂盒操作说明进行。将棉拭子加入已混合好的尿素-精氨酸肉汤培养基中混匀,然后将培养基肉汤按每孔55μl加入试剂条,最后滴入2滴矿物油覆盖,放入36℃恒温箱中培养,24~48h后观察培养和药敏结果。(4)结果判断:Uu和Mh分别培养24h和48h后判断培养结果,与生长对照孔比较,Uu和(或)Mh鉴定孔由黄色变为橙色或红色且未见浑浊为阳性,表示有Uu和(或)Mh生长,不变色表示阴性。如果培养基颜色变红且出现浑浊或沉淀,则需进一步确证[用梅里埃A7琼脂固体培养法,培养24~48h出现特征性的油煎蛋样菌落和(或)棕黑色海胆样菌落为Uu和(或)Mh阳性]。药敏结果判断,原始霉素只有一个浓度,不变色为敏感,变红色为耐药。其余8种抗生素每种抗生素高、低两个浓度各设一孔,均不变色表示敏感,都变红色表示耐药,低浓度孔变红色,高浓度孔不变色表示中介。

4.统计学方法:实验数据采用χ2检验,对检测结果进行比较,p<0.05认为有统计学意义。

结 果

1.支原体感染分布:667例NGU患者泌尿生殖道支原体培养阳性315例,检出率为47.2%,其中378例女性NGU患者检出支原体感染213例(56.3%),289例男性NGU患者检出支原体感染102例(35.3%),女性支原体感染检出率明显高于男性检出率(χ2=29.1,P <0.05)。支原体培养阳性患者中Uu单独感染251例(37.6%),Mh单独感染13例(1.9%),Uu+Mh 混合感染 51 例(7.6%),Uu 单独感染明显高于Mh单独感染和Uu+Mh混合感染(χ2=145.3,P <0.05),结果见表 1。

表1 667例NGU患者泌尿生殖道支原体检出结果[n(%)]

2.支原体药试验结果:315株支原体对9种抗生素均有不同程度的耐药,而且有多重耐药菌株的检出。支原体对环丙沙星耐药率最高(91.1%),其次为氧氟沙星、四环素以及红霉素(耐药率≥65.7%),支原体对强力霉素、原始霉素和交沙霉素敏感率较高(敏感率分别为 96.2%、97.5%和 98.4%)。克拉霉素和阿奇霉素对Uu较敏感(敏感率分别为71.7%和64.9%),对Mh和Uu+Mh混合感染则耐药性较高(≥69.2%),Mh是否参与感染与克拉霉素及阿奇霉素耐药程度相关(χ2=52.6,48.2,P <0.05),Mh 对阿奇霉素和克拉霉素等药物具有较强的抵抗力可能是与Mh不同于Uu的代谢特性有关,结果见表1。克拉霉素、阿奇霉素和红霉素对Uu的治疗效果也不错,但对Mh或Uu+Mh混合感染者的治疗效果较差。

讨 论

NGU是主要的性传播疾病之一,在国外的发病率急剧上升,已超过其他性传播疾病居首位[5]。近年我国NGU发病率不断增高,报告的病例数也已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位[4]。NGU的病因非常复杂,其中支原体感染是引起NGU的重要原因[2,6]。支原体可以寄居在阴道黏膜并与其他菌群共生,在机体免疫力低下或黏膜受损的情况下发展成为致病微生物。Uu和Mh能使阴道黏膜、宫颈充血发红,分泌物增多引起阴道炎、宫颈炎等泌尿生殖系统疾病;Uu和Mh感染可致孕妇患生殖道绒毛膜羊膜炎,并由母婴垂直传播导致流产、死胎及新生儿早期死亡,或出生低体重儿、新生儿肺炎、新生儿脑膜炎等。Uu可通过破坏精子结构、降低精子的活动度和减弱其穿卵能力及识别卵子的能力、影响精子代谢等途径影响精子活力从而造成男性不育[2,3]。因此及时对支原体感染作出诊断并选择合适的抗生素进行治疗非常重要[2,4,6]。

我们检测了667例疑是NGU患者泌尿生殖道支原体感染情况,结果检出率为47.2%(315/667),其中Uu单独感染251例(37.6%),Mh单独感染13例(1.9%),Uu+Mh 混合感染51 例(7.6%),表明支原体感染已经成为本地区NGU的主要病因。支原体检出率47.2%高于浙江省嘉兴、绍兴等地区报道的NGU患者泌尿生殖道支原体感染率为32.9% ~39.7%,低于舟山、宁波等地区近年国内报道NGU患者泌尿生殖道支原体感染率53.1% ~59.8%,与许江燕等报道的杭州市NGU患者泌尿生殖道支原体感染率45.2%基本一致,说明不同地区NGU患者泌尿生殖道支原体感染率有较大差异。在315例感染支原体的NGU中Uu单独感染最多251例占79.7%,Mh单独感染较少见,在667例NGU患者中仅检出13例,Uu+Mh混合感染也较少,共51例。在支原体感染引起的NGU中,Uu和Mh感染率统计结果有显著性差异(χ2=145.3,P <0.05)。667 例 NGU 患者中,378例为女性,检出支原体感染213例(56.3%);289例为男性,检出支原体感染102例(35.3%),支原体感染检出率女性明显高于男性检出率(χ2=29.1,p<0.05)。可能与女性生殖道的特殊生理结构,使支原体更容易寄居于女性生殖道;另女性感染者症状较男性感染者不明显,发现较晚,也易发生重复感染有关。

支原体大小介于细菌和病毒之间是一类缺乏细胞壁的微生物,由于支原体缺乏细胞壁导致对通过抑制细胞壁合成达到抗菌目的的青霉素类、头孢菌素类等β-内酰胺类抗生素不敏感[2]。但对作用于其核糖体、抑制或影响核糖体蛋白合成的抗生素敏感,故临床上治疗支原体感染常选用抑制蛋白合成的抗生素,包括四环素类、大环内酯类和喹诺酮类药物。红霉素一度成为支原体治疗的首先药物,但红霉素对消除支原体肺炎的症状和体征明显,但消除支原体效果不理想,不能消除肺炎支原体的寄居,且随着支原体感染的长期流行及抗生素的滥用,支原体对原本敏感的红霉药物逐渐产生耐药性[4,6]。四环素和磺胺类抗菌药物不良反应较多,不宜长时间用药。本项研究发现环丙沙星耐药率最高,为91.1%,其次为氧氟沙星、四环素以及红霉素,耐药率分别为 85.4%、79.0%和65.7%。敏感率较高的药物为强力霉素、交沙霉素和原始霉素,说明本地区对支原体感染用药首选强力霉素、交沙霉素和原始霉素。克拉霉素和阿奇霉素对两种支原体均有不同程度的耐药,克拉霉素和阿奇霉素治疗Uu单独感染NGU患者的敏感性显著高于Mh单独感染或Uu+Mh混合感染,表明Mh是否参与NGU感染与耐药程度显著相关(χ2=52.6,48.2,P <0.05)。抗生素的种类及感染支原体的种类与抗生素治疗NGU感染的疗效密切相关,因此对疑似NGU患者不能单凭经验用药,而应该根据药敏试验结果选用敏感抗生素,早期、足量用药,并使疗程尽可能缩短,以避免低浓度药物与支原体长期接触,人为造成抗菌药物压力,使原来占优势的敏感株被抑制或杀灭,诱导或选择出耐药菌株。

1 黄宇烽.非淋菌性尿道炎实验诊断研究进展[J].中华男科学,2004,10(1):3-8

2 Hartmann M.Genital mycoplasmas[J].JDtsch Dermatol Ges,2009,7(4):371-377

3 吴志华.皮肤性病学[M].4版,广州:广东科技出版社,2003:157

4 Guo X,Ye Z,Deng R.Male urogtnfital tract mycoplasma infection and drug - resistance evolution[J].Zhonghua Nan Ke Xue Bao,2004,10(2):122-124

5 Deguchi T,Maeda S.Mycoplasma genitalium:another important pathogen of nongonococcal urethritis[J].JUrol,2002,167:1210 - 1217

6 Kilic D,Basar MM,Kaygusuz S,et al.Prevalence and treatment of chlamydia trachomatis,ureaplasmaurealyticum,and mycoplasma hominis in patients with non - gonococcal urethritis[J].Jpn J Infect Dis,2004,57(1):17-20

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