黄 春俞家俊夏 波高志强舒 刚
(1.四川农业大学动医院,四川雅安 625014;2.眉山温氏育种公司,四川眉山 618282;3.北京生泰尔生物科技有限公司,北京 102206)
在长期的畜牧业生产中,因抗生素等药物的普遍使用而导致畜禽产生的耐药性和药物残留已严重危害人类健康。因此,研究绿色、无公害并能够提高畜禽生长性能及免疫机能的添加剂,生产绿色、安全的畜产品,已成为21世纪全球高效、低耗、少污染养殖业发展的必然趋势。免疫增强剂自发现以来,已经在人及各种动物的疾病防治中得以广泛尝试应用。研究证明,免疫增强剂与疫苗的联合应用,取得了较好的免疫增强效果,提高了疫苗对动物机体的保护效率。因而,对于免疫增强剂的研究已成为当代免疫学研究的热点之一。中草药免疫增强剂对机体的细胞免疫和体液免疫功能具有增强或调节作用,可提高机体的生长性能、抗病力和抵抗力(符华林,2002),免疫增强剂具有成本低、疗效可靠、使用方便、便于推广等优点。然而市售中药免疫增强剂制备复杂,质量鱼龙混杂。因此,本试验旨在研究芪黄素、保康肽、禽畅3种市售免疫增强剂对肉种雏鸡生长性能及免疫机能的影响,进而对此类产品进行科学评价,为临床上此类饲料添加剂的使用提供参考。
1.1 试验材料
市售3种免疫增强剂为芪黄素[主要成分为黄芪多糖,批准文号(2011)010125236]、保康肽[主要成分益生素,批准文号辽饲添字(2006)079028]、禽畅[主要成分板蓝根、淫羊藿等,批准文号(2011)160225076]。试验地点为四川眉山某肉种鸡场,品种为1日龄青脚麻肉种雏鸡。
1.2 试验设计
选用1 920只1日龄青A2号肉种雏鸡,随机分为4组,每组设3个重复,每重复160只鸡。试验分前期(1~21 d)、后期(22~42 d)两个饲养阶段。
1.3 试验日粮
试验期间采取饲料定量的形式饲喂,其中试验Ⅰ组饲喂含1%芪黄素的基础日粮,Ⅱ组饲喂含1%保康肽的基础日粮,Ⅲ组饲喂含0.1%禽畅的基础日粮,Ⅳ组饲喂基础日粮。基础日粮参照NRC(1994)《家禽的营养需要量》配制,其组成及营养水平见表1。
1.4 饲养管理
采用立体笼养育雏方式,试验期间定量采食、自由饮水;育雏室温度、湿度、光照、通风等条件均保持一致,并定期消毒。其他操作按照肉雏鸡0~6周龄饲养管理办法进行;肉鸡的免疫程序按常规进行。
表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)
1.5 指标测定及方法
1.5.1 生长性能测定
以重复为单位记录每天耗料量,分别在14、28、42日龄以重复为单位空腹称重。计算平均日采食量、平均体重、平均日增重和料重比。
1.5.2 血清抗体效价
采用血凝和血凝抑制试验,分别于14、28、42日龄,每组随机抽取8只鸡,经翅静脉采血,分离血清,测定其新城疫和禽流感抗体效价。
1.6 数据统计与处理
采用SPSS10.0统计软件对各数据进行方差分析和多重比较,试验数据以“平均值±标准差”表示。
2.1 3种免疫增强剂对肉种雏鸡生长性能的影响(见表2)
平均体重比较,14日龄、28日龄和42日龄时,与Ⅳ组(对照组)相比,各试验组平均体重差异均不显著(P>0.05)。平均日增重比较,28日龄时,Ⅰ组高于Ⅳ组(对照组)24.55%,差异显著(P<0.05);42日龄时,Ⅱ组分别高于Ⅰ组、Ⅲ组6.48%、5.71%,差异显著(P<0.05),Ⅰ组低于Ⅳ组(对照组)5.1%(P<0.05)。料重比比较,14日龄时,Ⅱ组低于Ⅳ组 8.92%,差异显著(P<0.05);28日龄时,Ⅰ组分别低于Ⅲ、Ⅳ组(对照组)20.92%、20.92%,差异显著(P<0.05);42日龄时,Ⅰ组高于Ⅱ组7.35%,差异极显著(P<0.01),高于Ⅳ组(对照组)6.05%,差异显著(P<0.05),Ⅲ组高于Ⅱ组6.12%。其余各项指标没有显著性差异(P>0.05)。整体看,1~42日龄,各项指标没有显著性差异(P>0.05),但Ⅰ组指标最优。
表3 3种免疫增强剂对肉种雏鸡生产性能的影响
2.2 血清抗体效价的动态变化(见表3)
ND比较,42日龄时Ⅰ组高于Ⅳ组(对照组)11.87%,差异显著(P<0.05),其它组无显著性差异(P>0.05)。H5比较,14日龄时,Ⅱ组高于Ⅳ组(对照组)64.98%,差异极显著(P<0.01),Ⅱ组高于Ⅰ、Ⅲ组30.18%、30.18%,差异显著(P<0.05)。其它组间无显著性差异(P>0.05);28日龄时,Ⅱ、Ⅲ组均高于Ⅳ组(对照组)64.67%,差异极显著(P<0.01);42 日龄时,Ⅲ组分别高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组38.97%、26%、28.57%,差异极显著(P<0.01)。H9比较,42日龄时,Ⅱ组分别高于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组13.63%、10.84%、12.30%,差异极显著(P<0.01)。
表3 各组抗体效价的动态变化(nlog2)
3.1 免疫增强剂是先于抗原或与抗原同时应用,能非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答,能增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型,而本身并无抗原性的物质。现已证明,具有免疫增强作用的物质不下几十种,常用的有左旋咪唑、西咪替丁、甲硝唑、蜂胶、福氏佐剂、油佐剂、维生素E、转移因子和干扰素、白细胞介素等(刘宝全,1995)。陈如明等(1996)研究报道,党参多糖、柴胡多糖、黄芪多糖、当归多糖等植物性多糖及黄芪、灵芝、甘草、白术、人参、党参、茯苓等中药同样对免疫系统有刺激作用,可以提高免疫系统组织细胞的活性,增加机体免疫细胞的生长及抗体的合成,从而提高机体的抗病力,维持机体内环境平衡,具有明显的免疫增强作用。
3.2 芪黄素、禽畅和保康肽的有效成分分别为黄芪多糖、黄芪甲苷、板蓝根、淫羊藿、茯苓多糖、益生菌代谢产物等。韩庆功等(2005)研究表明,黄芪多糖(APS)分别与鸡NDⅠ系苗、NDⅣ系苗、ND油乳剂苗以肌肉注射、皮下注射、点眼、滴鼻不同方式配合使用,均可使鸡血清ND抗体效价在相同日龄、不同日龄、不同APS用量3种情况下显著高于对照组,显示了明显的免疫增强作用。黄会岭等(1996)也证实,APS具有免疫调节作用,可显著促进正常机体的抗体生成细胞数,提高血清IgG水平。
保康肽是益生菌代谢产物,其功能是特异性诱导机体细胞免疫和体液免疫,促进机体内T细胞和B细胞的分裂增生,促进免疫抗体的产生,缩短免疫空白期。吴阿团等(2009)研究报道,使用“保康肽”对鸡体无不良反应,且能增强抗病和抗应激能力,提高饲料利用率,具有促进生长,加速免疫抗体的产生,延长免疫保护时间等作用。
禽畅通用名为“扶正解毒散”。B.Barrett等(2005)报道,黄芪有提升免疫力的作用、Dela Huebra等(2003)研究表明,淫羊藿有滋补肾阳气之功效,二者配合使用具有明显的提升免疫力的能力。板蓝根具有良好的清热解毒、降火功能。且近年来研究证实,板蓝根内含多种抗病毒物质,对多种病毒引起的急性热性病都有较强的抑制和杀灭作用。
3.3 本试验结果表明,3种免疫增强剂对肉雏鸡生长性能的影响没有显著差异(P>0.05),但以芪黄素组最优。对免疫机能影响方面,3种不同的药物对新城疫、禽流感抗体均有不同程度的影响,都能显著提高抗体滴度,临床上可以配合使用。大量试验结果已经证明,免疫增强剂与疫苗的联合应用是增强疫苗保护效率的一个有效途径。随着分子免疫学等免疫学基础理论的飞速发展,特别T细胞对抗原识别的分子基础和控T细胞活化和功能专职应答的研究进展使免疫增强剂的作用不再局限于增强免疫应答,而更着重于其诱导机体选择性地产生有效防御相应病原体感染的特异性的免疫应答,减少抗原物质的副作用。因此,寻找特性确定、高效、稳定、无毒的理想免疫增强剂是当前免疫学研究的重点之一。随着免疫增强剂的研究领域不断拓宽,新成员、新剂型不断开发,机理探讨不断深入,临床应用范围越来越广。而对各类市售免疫增强剂的科学评价,合理利用也显得越来越重要。