伊犁贝母的生药学鉴定Δ

王倩倩，谭 勇，张 芳，马 英，张之慧

（1.石河子大学药学院，新疆石河子832002；2.新疆特种植物药资源省部共建教育部重点实验室，新疆石河子 832002；3.石河子大学医学院第一附属医院，新疆石河子832008）

伊犁贝母的生药学鉴定Δ

王倩倩1＊，谭 勇1，2#，张 芳1，马 英1，张之慧3

（1.石河子大学药学院，新疆石河子832002；2.新疆特种植物药资源省部共建教育部重点实验室，新疆石河子 832002；3.石河子大学医学院第一附属医院，新疆石河子832008）

目的：研究伊犁贝母的生药学鉴别特征。方法：利用性状、显微、薄层色谱与紫外光谱鉴别法为该药材进行初步鉴定研究，并确立其鉴别特征。结果：确定了伊犁贝母的性状、显微、薄层色谱与紫外光谱鉴别特征。结论：本研究可为伊犁贝母的鉴别、开发利用与质量控制提供依据。

伊犁贝母；性状鉴别；显微鉴别；薄层色谱鉴别；紫外光谱鉴别

伊犁贝母（Fritillaria pallidiflora Schrenk）为百合科贝母属多年生草本植物，药用部位为其干燥鳞茎。其主要成分为异甾体生物碱和苷，尤以西贝素和西贝素苷为主要有效成分，具有清热润肺、化痰止咳等功效[1]。伊犁贝母主要分布于新疆伊犁河流域，主产于伊宁、昭苏、尼勒克等地。由于伊犁贝母具有产量高、生物碱含量在同类贝母中相对较高、抗病力强和药材价格低廉等优点，因而备受人们关注[2]。近几年因市场经济因素，伊犁贝母的野生资源严重减少，品种掺杂情况增多，已影响其药用价值。因此，笔者对伊犁贝母进行生药鉴定学研究，旨在为鉴别伊犁贝母和制订相关的质量标准提供参考依据[3]。

1 仪器与试药

DHG干燥-9240电热恒温鼓风箱（上海齐欣科学仪器有限公司）；YD-1508B轮转式切片机（浙江金华益迪医疗设备厂）；OPTEC奥特光学BK5000生物显微镜、Motic SFC-28生物显微镜及成像显微系统（麦克奥迪实业集团有限公司）。

西贝母碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110767-200504）；试验所用试剂均为分析纯。伊犁贝母采自新疆伊犁州尼勒克县乌拉斯台乡直属村（海拔：1 438 m；北纬43°49′，东经83°07′），伊犁贝母花为开花时采集，晒干备用，经石河子大学药学院成玉怀高级实验师鉴定为真品。

2 方法与结果

2.1 性状特征

伊犁贝母的鳞茎呈卵圆形或圆锥形，较大，高0.8～1.8 cm，直径1～2.3 cm。表面淡黄色或类白色，稍粗糙，有时可见黄棕色斑点或斑块。外层2枚鳞叶，心脏形或新月形，肥厚，近等大或一片较大，紧密抱合[4]。顶端稍尖，少有开裂。基部微凹陷。质轻而疏松，断面颗粒性，白色，微带粉性。气微，味微苦[5]。

2.2 显微特征

2.2.1 根横切面 根横切面呈不规则圆形。从外向内有表皮层、韧皮部与木质部。表皮层由一层细胞构成，细胞较小且排列紧密。表皮层向内，有大量形状不甚规则的薄壁细胞。表皮细胞多破损，高倍镜下可见草酸钙结晶。无淀粉粒，无形成层。伊犁贝母根的横切面见图1。

2.2.2 鳞茎（一年生）横切面 鳞茎横切面呈椭圆形，镜下可见大量淀粉粒。最外层有一层表皮，内部细胞为淀粉粒，多为长圆形、椭圆形，高倍镜下脐点明显。偶可见草酸钙结晶。伊犁贝母鳞茎的横切面见图2。

图1 伊犁贝母根的横切面图（200×）1.表皮层；2.薄壁细胞；3.韧皮部；4.木质部Fig 1 Transverse section of root of F.pallidiflora（200×）1.cuticular；2.parenchyma；3.phloem；4.xylem

图2 伊犁贝母鳞茎的横切面图（200×）1.表皮；2.薄壁细胞；3.淀粉粒Fig 2 Transverse section of bulb of F.pallidiflora（200×）1.epidermis；2.parenchyma；3.starch grain

2.2.3 茎杆横切面 茎杆横切面呈椭圆形。从外向内有表皮层、韧皮部与木质部。表皮层由一层细胞构成，细胞较小且排列紧密。表皮层向内，有大量类圆形的薄壁细胞。无形成层。木质部在中间，韧皮部环绕在木质部周围，形成周韧维管束。伊犁贝母茎杆的横切面见图3。

图3 伊犁贝母茎杆的横切面图（200×）1.表皮层；2.薄壁细胞；3.韧皮纤维；4.韧皮部；5.木质部Fig 3 Transverse section of stem of F.pallidiflora（200×）1.cuticular；2.parenchyma；3.phloem ray；4.phloem；5.xylem

2.2.4 叶横切面 叶片的上下表皮由单层细胞构成，下表皮有气孔。叶肉组织主要为栅栏组织和海绵组织。海绵组织由一些不规则的薄壁细胞构成，排列疏松。叶肉内导管明显，气孔类圆形，不定式。伊犁贝母叶的横切面见图4。

2.2.5 粉末特征 （1）伊犁贝母鳞茎粉末：米黄色。①淀粉粒众多，多为单粒，半复粒偶可见。形状多为广卵形、三角状卵形、贝壳形或不规则形，较小端稍尖或作鸟喙状，直径约60µm。脐点不甚明显，呈点状、人字状或十字状，位于较小端，层纹大多明显而细密。复粒稀少，一般由2～4粒组成。半复粒偶可见，脐点2～4个。②导管有具缘纹孔和螺纹导管，直径约50µm。③表皮细胞垂周壁增厚或连珠状增厚，淡黄色，有的含细小类方形草酸钙结晶。（2）伊犁贝母叶粉末：黄绿色。①气孔类圆形，不定式，直径35～60µm，副卫细胞4～6个。②表皮细胞类长方形，垂周壁微波状弯曲，细胞内含细小草酸钙方晶、柱晶或簇状结晶。③导管有具缘纹孔和螺纹，直径约30µm。伊犁贝母的粉末特征见图5。图5 伊犁贝母的粉末特征（400×）

图4 伊犁贝母叶的横切面图（200×）1.上表皮；2.上表皮栅栏组织；3.薄壁细胞；4.木质部；5.下表皮栅栏组织；6.海绵组织；7.下表皮；8.气孔Fig 4 Transverse section of leaf of F.pallidiflora（200×）1.upper epidermis；2 upper epidermis palisade tissue；3.parenchyma cell；4.xylem；5.lower epidermis palisade tissue；6.spongy tissue；7.lower epidermis；8.stomata

1.螺纹导管；2.具缘纹孔导管；3.淀粉粒；4.薄壁细胞；5.气孔

Fig 5 Characteristicsof F.pallidiflora power（400×）

1.spiral vessel；2.bordered pit vessel；3.starch grain；4.parenchyma cell；5.stomata

2.3 薄层色谱（TLC）鉴别

取伊犁贝母的鳞茎、花（花的粉末特征与鳞茎的粉末特征大致相同，故前文省略）、叶粉末各5 g，加浓氨试液2 mL与三氯甲烷20 mL，振摇，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5 mL使溶解，作为供试品溶液。再取西贝母碱对照品，加三氯甲烷制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照TLC法[1]试验，吸取上述4种溶液各2～4µL，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（8∶8∶3∶2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，依次喷以稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠试液，日光下检视。结果表明，伊犁贝母鳞茎、花的供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，有显相同颜色且Rf值相同（Rf＝0.36）的棕色斑点，表明伊犁贝母的鳞茎、花中均含有西贝母碱；而伊犁贝母叶的供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上无斑点，故推断伊犁贝母的叶中不含有西贝母碱。伊犁贝母的TLC见图6。

图6 伊犁贝母的TLC1.鳞茎；2.西贝母碱对照品；3.花；4.叶Fig 6 TLC of F.pallidiflora1.bulb；2.imperialine control；3.flower；4.leaf

2.4 紫外光谱鉴别

取伊犁贝母的鳞茎、茎秆、叶、花的粉末各0.5 g，加95%乙醇20 mL，浸泡过夜，滤过，取鳞茎滤液2.5 mL，置25 mL量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀；分别取茎秆、叶、花滤液2.5 mL，置50 mL量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀。在200～400 nm波长范围内扫描[6]。结果发现，伊犁贝母鳞茎粉末提取液在204 nm波长处有最大吸收，茎杆粉末提取液在206.4 nm波长处有最大吸收，叶粉末提取液在207.8 nm波长处有最大吸收，花粉末提取液在212.4 nm波长处有最大吸收。伊犁贝母的紫外扫描图见图7。

3 讨论

通过伊犁贝母的TLC图发现，供试品色谱中，伊犁贝母的花与叶子有显相同颜色且Rf值相同（Rf＝0.93）的黄绿色斑点，推测伊犁贝母的花与叶子中含有相同成分。

通过伊犁贝母的紫外扫描图发现，伊犁贝母花、叶、茎秆与鳞茎的最大吸收波长比较接近，都在205 nm左右，但吸光度有较大的差异，这可为伊犁贝母的紫外光谱鉴别提供参考依据。

伊犁贝母在新疆地区使用广泛，具有多种药理活性，近年来野生变家种发展较快。本研究不仅可为药政药检部门和商品流通领域提供鉴定依据，也可为伊犁贝母规范化生产提供参考依据。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：132、附录34.

[2] 何心亮.伊贝母生物碱含量与种植年限的关系[J].中药材，1988，11（4）：14.

[3] 王书军，高文远，于 琳，等.百合科贝母属药用植物分类研究进展[J].中国中药杂志，2007，32（16）：1 609.

[4] 李家实.中药鉴定学[M].上海：上海科学技术出版社，1996：225-229.

[5] 唐生斌，唐小鹏.贝母类药材的性状鉴别[J].中药材，2002，25（5）：321.

[6] 李冰岚，陈宗良，朱 克，等.东贝母的生药鉴定[J].中药材，1999，22（1）：34.

Pharmacognosia Identification of Fritillaria pallidiflora

WANG Qian-qian，TAN Yong，ZHANG Fang，MA Ying
（College of Pharmacy，Shihezi University，Xinjiang Shihezi 832002，China）
TAN Yong
（Xinjiang Key Laboratory of Phytomedicine Resources，Ministry of Education，Xinjiang Shihezi 832002，China）
ZHANG Zhi-hui
（The First Affiliated Hospital of Medical College，Shihezi University，Xinjiang Shihezi 832008，China）

OBJECTIVE：To study pharmacognostic characteristics of Fritillaria pallidiflora.METHODS：The plant was identified by methods of characteristics，microscopic identification，TLC and UV to determine the identification characteristics.RESULTS：The characteristics，microscopic identification，TLC and UV feature of F.pallidiflora had been established.CONCLUSION：The study can provide reference for identification，development and quality control of F.pallidiflora.

Fritillaria pallidiflora；Property identification；Microscopic identification；TLC；UV

R282.5；R284

A

1001-0408（2012）43-4089-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.43.22

Δ新疆特种植物药资源省部共建重点实验室开放基金资助项目；石河子大学青年骨干教师“263”项目（YX07011）；石河子大学科技服务项目（kjkfyzh2009-kjfw03）

＊硕士研究生。研究方向：生药学及天然药物活性成分。电话：0993-2057751。E-mail：wangqianqian106@163.com

#通讯作者：副教授。研究方向：生药学及中药资源。电话：0993-2057751。E-mail：xjtany@yahoo.com.cn

2011-11-04

2012-01-24）

Δ河北省科学技术研究与发展计划项目（10212144）

＊副教授，博士。研究方向：中药成分的色谱研究与分析。电话：0311-66617320。E-mail：05fenghaiyan@mails.gucas.ac.cn