陈皮提取物对小鼠胃排空、肠推进及家兔离体回肠平滑肌的影响

张 旭，纪忠岐，赵长敏，马 波，杜钢军

（1.河南大学 中药研究所，河南 开封475004；2.河南大学药学院 药理教研室，河南 开封475004；3.河南大学 药物研究所，河南 开封475004）

陈皮为芸香科植物橘（Citrus reticulate Blanco）及其栽培变种的干燥成熟果皮，是常用的理气药。临床常用于脾胃气滞所致脘腹胀痛，不思饮食，呕吐哕逆，咳嗽痰多等［1］。有资料［2］报道：不同质量浓度的陈皮对小鼠离体胃和小肠肌条均有抑制作用。本实验通过在体小鼠胃排空、肠推进及离体兔回肠肌张力和回肠收缩频率的变化，观察陈皮对小鼠在体胃肠运动和家兔离体回肠运动的影响，并初步探讨其机制。

1 实验材料

1.1 药物

陈皮提取物制备方法：市购陈皮500g，用清水浸泡后，在文火下煮沸，收集滤液，然后进行水浴蒸发，放入水浴锅中浓缩，得到陈皮粗提物，称重，计算提取率（提取率＝制得提取物质量／原料质量×100%），提取率1.88%。粗提物浓缩后含原生药2g／mL。

1.2 试剂

阿托品（生产批号：0905131，羚锐制药有限公司）；氯化乙酰胆碱（生产批号：20030620，上海三爱思试剂有限公司）；印度墨水（上海精细文化有限公司）。

1.3 动物

健康昆明小鼠，雌雄各半，体质量18～22g，由河南省动物养殖中心提供；家兔，体质量2.0～2.5kg，由河南省动物养殖中心提供。

1.4 仪器

电热三用水箱（型号：BS2，北京医疗设备厂）；电子天平（型号：JY10001，上海精密科学仪器有限公司）；0516型－台式低速离心机（上海医疗器械有限公司手术器械厂）；HW-400S恒温平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司）；BL-420E生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；UV-1600型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。

2 实验方法

2.1 对在体小鼠胃排空、肠推进的影响

将48只小鼠随机分为陈皮提取物高剂量（10mL／kg）、中剂量（5mL／kg）、低剂量（2.5mL／kg）及空白对照（蒸馏水）4个组，每组12只，以胃肠内标记物墨汁在小鼠胃内色素相对残留率及肠推进比为指标，观察提取物对在体小鼠胃排空及肠推进的影响。昆明小鼠实验前禁食24h，禁食期间自由饮水。实验组动物分别灌服10、5、2.5mL／kg剂量的陈皮提取物，对照组灌服10mL／kg蒸馏水。各组动物注入药液后30min再灌入墨汁0.2mL。20min后脱颈处死小鼠，开腹取出全胃肠，自幽门括约肌处取胃，沿大弯侧剪开，将胃内色素残留物充分洗于4mL蒸馏水中，3 500r／min离心15min，取上清滤液，用 UV-1600型分光光度计于620nm处测吸光度为胃内色素残留量，与对照组均值的百分比，即为各样本的胃内色素相对残留率。量取幽门括约肌至色素最前端至盲肠的距离，以二者之比为小肠推进比［3］。

2.2 对家兔离体回肠平滑肌收缩活动的影响

家兔试验前禁食24h，禁食期间自由饮水，用钝器猛击后脑部致死，立即解剖，剪取空肠及回肠上半段（距离回盲部10cm处），置于冷台氏液中，除去肠系膜，用台氏液将肠内容物冲洗干净，将肠管剪成2～2.5cm的肠段备用。连接张力换能器、生物信号采集系统、计算机和恒温水浴槽。保持浴槽内温度（37±0.5）℃，调节供氧阀60～80个气泡／min，并进行调试，使其正常采集信号。用平皿盛台氏液少许，取一段肠管置于其中，于对角线分别穿线，标本一端与张力换能器相连，另一端固定浴槽内，调节松紧度，置入盛有16mL的台氏液恒温浴槽中，给予标本1.0g的基础负荷，稳定5～10min后，记录一段正常曲线，然后依次加入药物，换药后用台氏液冲洗标本3次［4］。

2.3 统计学分析

采用SPSS 13.0统计软件中的LSD-t进行检验，数据以¯x±s分析，a＝0.05为检验水平。

3 结果

3.1 对在体小鼠胃排空、肠推进的影响

陈皮提取物在2.5、5、10mL／kg剂量时均可明显减少小鼠胃内色素相对残留率，与对照组相比，差异极显著（P＜0.01）。在10mL／kg剂量时的胃内色素残留率最小，与5mL／kg剂量组相比，差异具有显著性（P＜0.01），与2.5mL／kg剂量组相比较，差异显著（P＜0.05）。在小肠推进比上，3个剂量组提取物可明显促进小肠推进，10mL／kg剂量组和5mL／kg剂量组与空白对照组相比，差异极显著（P＜0.01）；2.5mL／kg剂量组与对照组比较差异显著 （P ＜0.05）；10mL／kg剂量组与2.5mL／kg剂量组比较，10mL／kg剂量组推进程度明显好于2.5mL／kg剂量组 （P ＜0.01）；10mL／kg剂量组与5mL／kg剂量组的推进程度比较也具有差异性（P＜0.05），见表1。

3.2 对离体家兔回肠平滑肌收缩活动的影响

陈皮提取物在0.025g／L时，对家兔离体回肠平滑肌的张力和收缩频率无明显影响（与给药前相比，P＜0.05）；陈皮提取物在0.05g／L时家兔离体回肠平滑肌的张力明显变小，频率变慢，与给药前相比，差异显著（P＜0.05）；陈皮提取物在0.1g／L时，家兔离体回肠平滑肌的张力显著性变小，收缩频率变慢，差异显著（P＜0.01）。结果表明，随着陈皮提取物剂量的增加，对家兔离体回肠平滑肌的张力和收缩频率都有降低作用，并呈现一定的剂量依赖性；陈皮能拮抗乙酰胆碱（ACh）的致痉作用，表现为平滑肌紧张性下降，收缩频率变慢；陈皮能使先用阿托品而紧张性已降低的兔回肠肌进一步松弛，频率变慢（P＜0.05），张力（振幅）变小（P＜0.01），见表2。

表1 陈皮提取物对小鼠胃内色素相对残留率及肠推进的影响（﹪，¯x±s）

表2 陈皮提取物对离体家兔回肠平滑肌收缩活动的影响（¯x±s）

4 讨论

本实验一方面肯定了陈皮对小鼠胃排空及肠推进均有促进作用，说明陈皮能兴奋胃肠运动，而另一方面，陈皮提取物也的确对离体兔回肠肌张力和回肠收缩频率具有降低作用，说明陈皮能抑制小肠运动，二者的实验结果是不一致的。现已证明，在完整的机体内，胃肠运动的调节由交感神经系统、副交感神经系统、肠神经系统以及多种体液因素共同控制。目前研究认为，胃肠道上主要存在胆碱能M受体、肾上腺α和β受体、5-HT受体、组织胺受体及多种胃肠激素［5］。通过实验我们发现，陈皮能部分拮抗ACh对离体肠管的抑制作用。在体情况下，陈皮各剂量组有促进肠动力的作用，并且有量效关系；离体情况下，陈皮能降低肠管紧张性和收缩频率，其抑制作用可能与胆碱受体有关，且有一定量效关系，需要进一步探讨。

［1］官福兰，王如俊，王建华.陈皮及橙皮苷对离体肠管运动的影响［J］.时珍国医国药，2002，13（2）：65－67.

［2］杨颖丽，郑天珍，瞿颂义，等.青皮和陈皮对大鼠小肠纵行肌条运动影响［J］.兰州大学学报：自然科学版，2001，37（5）：94－97.

［3］张旭，马波，杜纲军，等.白萝卜提取物对小鼠胃排空、肠推进及家兔离体回肠平滑肌的影响［J］.河南大学学报：医学版，2011，30（1）：36－38.

［4］张忠泉，陈百泉主编.药理学实验指导［M］.郑州：郑州大学出版社，2007：59.

［5］沈映君主编.中药药理学［M］.北京：人民卫生出版社，2004：538－541.