杨辉,杨亮,蒋玲(1.贵阳市第一人民医院,贵阳55000;.贵阳中医学院第二附属医院,贵阳550001)
柴胡、竹叶柴胡对小鼠的抗炎镇痛作用研究
杨辉1*,杨亮2,蒋玲2(1.贵阳市第一人民医院,贵阳550002;2.贵阳中医学院第二附属医院,贵阳550001)
目的:研究柴胡、竹叶柴胡的抗炎、镇痛作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察受试样品的抗炎作用;采用热板法观察受试样品的镇痛作用。结果:耳廓肿胀试验中,在12g·kg-1剂量下,柴胡、竹叶柴胡可使模型小鼠耳肿胀度显著降低(P<0.01或P<0.05);热板法镇痛试验中,在12g·kg-1剂量下,柴胡、竹叶柴胡可使小鼠的痛阈值显著延长(P<0.05)。结论:柴胡、竹叶柴胡均具抗炎与镇痛作用。
柴胡;竹叶柴胡;抗炎;镇痛
中药柴胡在我国作为药材已有两千多年的历史。2010年版《中国药典》(一部)[1]收载柴胡来源为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡 B.scorzonerifolium Willd.的干燥根。据本课题组调查,贵州、四川等地的医院、药房柴胡使用混乱,大多处方开具柴胡,用的却是竹叶柴胡。竹叶柴胡收载于2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》[2],来源为伞形科植物竹叶柴胡B.marginatum Wall.ex DC.与窄竹叶柴胡 B.marginatum Wall.ex DC.var.stenophyllum(Wolff.)Shan et Y.Li的干燥全草。竹叶柴胡抗炎、镇痛作用未见有文献报道。因此,本课题组对柴胡、竹叶柴胡抗炎、镇痛的药效作用进行初步研究,为临床合理、规范使用柴胡提供参考。
1.1 仪器
YLS-B6型智能热板仪(安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司);JA-2003型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。
1.2 试药
柴胡(产地:四川,批号:20110301)、竹叶柴胡(产地:贵州,批号:20110101)均购于贵州济仁堂中药饮片厂;二甲苯(分析纯,重庆茂业化学试剂有限公司,批号:20110822);阿司匹林肠溶片(石家庄康力药业有限公司,批号:110333);醋酸泼尼松片(浙江仙琚制药股份有限公司,批号:110531)。
1.3 动物
昆明种小鼠200只,♀♂兼半,体重18~22g,由贵阳医学院实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(黔)2002-0001)。
2.1 样品制备
分别取柴胡、竹叶柴胡适量,加10倍水浸泡0.5h、煎煮0.5h,水煎煮3次,合并3次煎液,常压浓缩至稠浸膏(密度1.15~1.20,60℃)。柴胡样品呈棕褐色浸膏,每1g浸膏样品相当于原生药材6.061g;竹叶柴胡样品呈棕黄色浸膏,每1g浸膏相当于原生药材6.618g。给药时以原生药材计。
2.2 抗炎实验
实验分为8组,即模型(等容蒸馏水)、醋酸泼尼松(5mg·kg-1)和柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组以及竹叶柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组。ig给药,每天1次,连续5d。末次给药后1h,取0.02mL二甲苯均匀涂于小鼠右侧耳廓前后两面,涂二甲苯后20min脱颈椎处死小鼠,剪下小鼠的两耳,用打孔器在两耳的同一部位打下直径为6mm的耳片,分别于电子天平上称重,并计算耳肿胀度:耳肿胀度=右耳片重-左耳片重。
2.3 镇痛实验
取体重18~22g的♀昆明种小鼠,在热板仪(温度:55℃)上逐一进行筛选,记录小鼠自放入热板仪中至出现添后足反应所需时间为该小鼠的痛阈值,以痛阈值为5~30s的小鼠为合格小鼠,将痛阈值<5s、>30s与容易出现跳跃反应的小鼠剔除。取合格的小鼠80只,随机分成8组,即对照(等容蒸馏水)、阿司匹林(0.15g·kg-1)和柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组以及竹叶柴胡高、中、低剂量(12、6、3g·kg-1)组。ig给药,每天1次,连续5d。末次给药后1h,将各组小鼠置于温度为55℃的热板仪上,观察小鼠出现的舔后足反应,测定其痛阈值。
2.4 统计学方法
3.1 抗炎实验结果
与模型组比较,柴胡高剂量与竹叶柴胡高剂量组小鼠耳肿胀度显著减轻(P<0.01或P<0.05)。柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠耳肿胀度的影响见表1。
表1 柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠耳肿胀度的影响(n=10)Tab 1 Effect of B.chinenese and B.marginatum on ear edema of mice(n=10)
3.2 镇痛实验结果
与对照组比较,柴胡高剂量与竹叶柴胡高剂量组小鼠痛阈值显著升高(P<0.05)。柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠痛阈值的影响见表2。
表2 柴胡、竹叶柴胡对模型小鼠痛阈值的影响(n=10)Tab 2Effect of B.chinense and B.marginatum on pain threshold of mice(n=10)
中医认为柴胡具有疏肝退热、舒肝解郁、升阳透疹的功效。药理研究表明,柴胡的解热、抗病原微生物、抗炎、促进免疫功能等作用是其和解表里功效的药效学基础;保肝、利胆、降血脂、镇静、镇痛等是其疏肝解郁功效的体现;而其对内脏平滑肌的作用可能与其升举阳气功效有关[5]。二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和热板法镇痛实验为抗炎、镇痛的药效学经典实验。本课题组采用这两种方法观察柴胡、竹叶柴胡的抗炎、镇痛作用。结果显示,柴胡高剂量组与竹叶柴胡高剂量组小鼠的耳廓肿胀度较模型组显著降低,柴胡高剂量组与竹叶柴胡高剂量组小鼠的痛阈值较对照组明显延长,表明高剂量的柴胡、竹叶柴胡均有抗炎与镇痛作用。同时实验数据表明,柴胡、竹叶柴胡在抗炎、镇痛作用效果方面无显著性差异,因此在用于抗炎、镇痛时,柴胡、竹叶柴胡在一定程度上可相互代替。但由于柴胡、竹叶柴胡的抗炎、镇痛机制尚不清楚,临床使用时,柴胡、竹叶柴胡是否可以混用,有待进一步研究。
(本研究由贵阳中医学院青年科研基金资助。)
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].2010年版.北京:中国医药科技出版社,2010:263.
[2] 贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准[S].2003年版.贵阳:贵州科技出版社,2003:165.
[3] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2002:911、886.
[4] 向海燕,侯连兵,黄嗣航,等.金刚藤分散片抗炎镇痛作用的药效学研究[J].中国药房,2007,18(36):2817.
[5] 赵中振,肖培根.当代药用植物典(第一册)[M].上海:上海世界图书出版公司,2007:156.
Study on the Anti-inflammatory and Analgesic Activities of Bupleurum chinense and B.marginatum
YANG Hui(Guiyang Municipal First People’s Hospital,Guiyang 550002,China)
YANG Liang,JIANG Ling(The Second Affiliated Hospital of Guiyang TCM College,Guiyang 550001,China)
OBJECTIVE:To study anti-inflammatory and analgesic effects of Bupleurum chinense and B.marginatum.METHODS:Anti-inflammatory and analgesic effects were observed by means of dimethylbenzene induced mice ear edema model and hot plate method.RESULTS:In ear edema test,B.chinense and B.marginatum(12g·kg-1)could significantly inhibit the ear edema(P<0.01or P<0.05),and could significantly extend the pain threshold(P<0.05).CONCLUSION:Both B.chinense and B.marginatum have anti-inflammatory and analgesic action.
Bupleurm chinense;Bupleurm marginatum;Anti-inflammatory;Analgesia
R285;R97
A
1001-0408(2012)47-4442-03
DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2012.47.10
2012-05-27)