GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达

郝鹏程 魏煜程 王 冲 任晓峰 李自亨

1.青岛大学医学院，山东青岛 266000；2.青岛大学医学院附属医院，山东青岛 266000；3.山东省荣军总医院，山东济南 250000

GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达

郝鹏程1魏煜程2王 冲3任晓峰3李自亨3

1.青岛大学医学院，山东青岛 266000；2.青岛大学医学院附属医院，山东青岛 266000；3.山东省荣军总医院，山东济南 250000

目的 检测GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达情况。方法 应用RT-PCR法检测30例食管鳞状细胞癌组织及其癌旁组织中GRP78 mRNA的表达情况。结果 食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中GRP78 mRNA的表达阳性率分别为56.67%(17/30)和26.67%(8/30),GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中表达水平明显高于癌旁组织。两组差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 与癌旁组织相比,食管鳞状细胞癌GRP78 mRNA呈现高表达,表明GRP78可能参与了食管鳞状细胞癌的发生过程，可以作为食管鳞状细胞癌的一种有价值的肿瘤分子标志物。

食管鳞状细胞癌；GRP78；RT-PCR

食管癌(esophageal carcinoma,EC)是常见的恶性肿瘤之一,我国是食管癌的高发区域，其中病理类型以鳞状细胞癌为主。本研究对30例食管鳞状细胞癌组织及其配对癌旁组织用RT-PCR法检测GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达情况，探讨它与人类食管鳞状细胞癌发生、发展的关系。本研究对30例食管鳞状细胞癌组织及其配对癌旁组织用RT-PCR法检测GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达情况，探讨它与人类食管鳞状细胞癌发生、发展的联系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

30例食管鳞状细胞癌组织及其配对癌旁组织均为山东省立医院2011年3月～2011年4月手术切除的新鲜标本,其中男性22例,女性8例,均为鳞状细胞癌;手术结束后,即刻采集标本,置于液氮内冷冻，-80℃低温保存,整个操作过程避免外源性RNase降解靶组织中的RNA。要求患者手术前未行放、化疗和其他抗肿瘤治疗,并且全部标本的病理切片均经病理学专家验证。

1.2 主要试剂

鼠-抗人 GRP78单克隆抗体，Trizol试剂，DEPC，氯仿，异丙醇，RT-PCR检测试剂盒，琼浆糖凝胶，引物合成。

1.3 主要仪器

凝胶成像系统，紫外分光光度计，台式离心机，PCR扩增仪，超低温冰箱。

1.4 RT-PCR实验操作流程

总RNA提取，检测RNA纯度，验证RNA的完整性，GRP78引物设计，RT-PCR，计算GRP78 mRNA阳性表达率。

1.5 统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行处理,GRP78 mRNA的表达水平以阳性表达率表示,采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌组织及其配对癌旁组织中的表达(表 1)。

RT-PCR结果显示，在30例患者中检测到GRP78 mRNA且GRP78 mRNA的表达阳性率为 56.67%(17/30)，癌旁组织中GRP78 mRNA的表达阳性率为26.67%(8/30),GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中表达水平明显高于癌旁组织。两组差异有统计学意义(P＜0.05)。

表1 GRP78 mRNA在食管鳞癌组织及其配对癌旁组织中表达

3 讨论

从Shiu等人[1]在实验中诱导产生GRP78以来,GRP78就具有阻止蛋白质错误的聚集[2]，在某些影响蛋白折叠及装配运输的药物作用下或在某些应激条件下,GRP78的转录活性可以提高10～25倍[3-4]。GRP78的高表达可能是人类食管鳞状细胞癌细胞在应激条件下生存的一种防御机制。当细胞遭受到各种有害因素（如缺氧、低糖及酸中毒等）侵害时[5],血管供应不足及营养条件较差，可诱导GRP78高表达[6]。本研究随机选取30例人食管鳞状细胞癌组织及其配对癌旁组织标本,用RT-PCR法检测GRP78 mRNA的表达情况，结果表明在食管鳞状细胞癌组织及其配对的癌旁组织中均可检测到GRP78 mRNA的表达,但食管鳞状细胞癌组织中GRP78 mRNA的表达水平明显高于其配对的癌旁组织,两组之间的差异有显著意义。上述结果提示GRP78可能与人类食管鳞状细胞癌的发生、发展有关,其高表达可能是食管鳞状细胞癌进展的一个重要特征。因为在食管鳞状细胞癌的进展过程中,GRP78可以通过保护肿瘤细胞逃逸宿主的免疫监视,从而促进肿瘤增长及对周围组织侵蚀,对肿瘤细胞的增殖和生存有利。

总之，食管鳞状细胞癌组织中GRP78 mRNA的表达明显高于其配对的癌旁组织,提示GRP78可能参与人类食管鳞状细胞癌的发生、发展的过程。GRP78可以作为一种新的有价值的分子标记物用于食管鳞状细胞癌的早期预防和早期诊断。

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[6]Amy S.Lee.The glucose regulated proteins：stress induction and clinical applications[J].TRENDS in Biochemical Sciences,2001,26：504-510.

The expression of GRP78 mRNA in esophageal squamous cell carcinoma

HAO Pengcheng1WEI Yucheng2WANG Chong3REN Xiaofeng3LI ziheng3
1.Medical College of Qingdao University,Qingdao 266000,China;2 Affiliated Hospital,Medical College of Qingdao University,Qingdao 266000,China;3 Department of Thoracic Surgery,Shandong Rongjun Hospital,Jinan 250013,China

Objective To investigate the expression of GRP78 mRNA in esophageal squamous cell carcinoma.Methods The expression of GRP78 mRNA in cancerous tissues and paracancerous tissues from 30 patients with esophageal squamous cell carcinoma were analyzed using RT-PCR analysis.Results GRP78 mRNA was positive in 56.67% (17/30)cancerous tissues and 26.67% (8/30)paracancerous tissues of esophageal squamous cell carcinoma.The expression of GRP78 mRNA was significantly higher(P＜0.05)in cancerous tissues compared with paracancerous tissues.Conclusion GRP78 may be involved in the pathogenesis of esophageal squamous cell carcinoma and may be a potential tumor maker of the disease.

Esophageal squamous cell carcinoma；GRP78；RT-PCR

R735

A

1672-5654（2012）07（c）-0014-02

2012-06-10）