于良生 刘洪玲 王路平 李红 梅涵
(青岛大学医学院附属医院药学部,山东 青岛266003)
参麦益气合剂是由人参、黄芪等药味加工制成的中药合剂,具有益气活血、温肾复脉之功效,能改善血液黏稠度、提高心率、加速房室传导、改善心肌缺血、缓解心绞痛等。本品由我院资深心内科专家和中药制剂室共同研制而成,用于治疗心血管疾病,取得了很好的效果。
人参10 g,麦冬15 g,五味子5 g,桂枝10 g,甘草5 g,当归10 g,黄芪10 g,淫羊藿15 g,苦参10 g,附子3 g,延胡索10 g,金银花15 g。
取上述药味各100 倍量,置于提取器内,加水100 000 mL浸渍1 h,加热煎煮1.5 h,滤出药液,药渣再加水50 000 mL,加热煎煮1 h,合并两次药液静置12 h,取上清液浓缩至25 000 mL,分装(每瓶25 mL),封口,116℃消毒40 min,贴标签即得。
取本品250 mL,置70℃水浴,浓缩至37 mL(含生药3.19 g/mL)。
昆明种小鼠40 只(体重18 ~20 g,雌雄各半),在实验室动物房饲养1 周后,分为实验组和空白对照组,采用最大给药量法进行急性毒性试验,给药前禁食(不禁水)12 h,实验组给予药品40 mL/kg 灌胃,空白对照组给予蒸馏水40 mL/kg 灌胃,间隔6 h 再次给药,再次给药前禁食2 h。给药后4 h 内密切观察,此后每日上、下午各给药1 次,连续观察7 d,详细纪录。于第8 d 脱颈处死实验小鼠,大体解剖,肉眼观察各脏器的改变。
40 只小鼠给药7 d 后,均健康生存,未见异常和中毒反应,肉眼观察各脏器无异常表现,测得最大耐受量为255.2 g/kg。
病人均为专科门诊病人。其中206 例患者采用随机方法分为治疗组和对照组(单纯西药治疗)。治疗组104 例(男性58 例,占55.8%;女性46 例,占44.2%),年龄32 ~68 岁,平均年龄63.7 岁,病程短者半年,长者10 余年。对照组102 例(男性70 例,占68.6%;女性32 例,占31.4%),年龄48 ~76 岁,平均年龄64.7 岁,病程短者半年,长者10 余年。所有病例都经过心电图、心脏彩超、心电监护等检查确诊,统计学处理提示,两组患者治疗前病情及心电图表现无显著差异性。
全部病例确诊为冠心病心绞痛,轻重分级标准参照1979 年中西医结合治疗冠心病心绞痛及心律失常座谈会制定的《冠心病心绞痛及心电图疗效评定标准》[2]。
参照国家中医药管理局1994 年6 月发布的《中华人民共和国中医药行业标准·中医病证诊断标准》,临床见症:胸痛、心胸窒闷或如物压、气短喘促、肢体沉重、脘痞痰多口黏、舌质暗苔浊腻、脉滑。辨证分属,痰浊痹阻、胸阳不振。
具有冠心病心绞痛主症,诊断明确。属轻中度,符合中医辨证。每周发作2 次以上的冠心病劳累性心绞痛患者、重度患者不在本组观察范围之内。
治疗组:口服参麦益气合剂,每次1/2 瓶,每日2 次;同时应用消心痛10 mg,每日3 次,肠溶阿司匹林75 mg,每日1 次。2 周为1 个疗程。
对照组:除不服参麦益气合剂,其他均相同。
详细记录治疗前后心绞痛发作次数、程度、持续时间,是否需含硝酸甘油及所含数量;心电图ST 段及T 波在治疗前后的变化;治疗前后血、尿常规及肝、肾功能。
显效:心绞痛等主要症状消失或基本消失,体征明显改善,心电图恢复至正常范围。
有效:心绞痛等主要症状减轻,体征部分改善,心电图好转。
无效:心绞痛等主要症状无改善,心电图基本与治疗前相同。
治疗组临床疗效和心电图疗效均优于对照组(χ2检验,χ2=10.36、5.13,P<0.01,P<0.05),结果见表2。
表2 临床疗效及心电图改变比较 (例)
高效液相色谱仪(美国Waters 公司);绿原酸(批号:110753-200501)、人参皂苷Rg1(批号:110703-200016)、黄芪甲苷(批号:110781-200109)、当归对照药材(批号:120927-200512)均购自原中国药品生物制品检定所;参麦益气合剂(批号:030913、040621)由我院制剂室提供。
4.2.1 性状 本品为浅棕色液体;气微,味微苦。
4.2.2 鉴别
4.2.2.1 人参的鉴别 取本品30 mL,用三氯甲烷振摇提取2 次,每次30 mL,弃去三氯甲烷液,水溶液用正丁醇振摇提取3 次,每次30 mL,合并正丁醇液,用氨试液洗涤2次,每次80 mL,取正丁醇液蒸干,残留物加甲醇1 mL 使溶解,作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1对照品,加甲醇制成1 mg/mL 的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010 年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各5 μL,点于同一硅胶G 薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。分别置于日光和紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
4.2.2.2 当归的鉴别 取本品30 mL,蒸干,残留物加无水乙醇1 mL 使溶解,作为供试品溶液。另取当归对照药材1 g,加石油醚(60 ~90℃)20 mL,超声处理15 min,滤过蒸干,残留物加无水乙醇1 mL 使溶解,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010 年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述2 种溶液各5 μL,点于同一硅胶G 薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
4.2.2.3 黄芪的鉴别 取本品30 mL,蒸干,残留物加2%氢氧化钾甲醇溶液50 mL 使溶解,置水浴上加热回流1 h,蒸干,残留物加水30 mL 使溶解,移至分液漏斗中,用三氯甲烷-正丁醇(2∶1)50 mL 振摇提取,分取三氯甲烷-正丁醇层,用1%磷酸二氢钾溶液50 mL 洗涤,弃去磷酸二氢钾溶液,提取液蒸干,残留物加甲醇1 mL 使溶解,作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成0.6 mg/mL的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验,分别吸取上述溶液10 μL 和5 μL,点于同一硅胶G 薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(10∶20∶11∶5)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
本品应符合《中国药典》2010 年版一部附录ⅠJ 合剂项下有关规定。
4.4.1 色谱条件 色谱柱为Thersil-Keystone C18(1 500 mm×4.6 mm);流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(10∶90);流量为1 mL/min;检测波长为327 nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于20 000。
4.4.2 对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成40 μL/mL 的溶液,即得。
4.4.3 供试品溶液的制备 精密称取本品1 mL,置50 mL棕色量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
4.4.4 绿原酸的含量测定 取10 个批号的参麦益气合剂,按上述方法制得供试品溶液,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL 注入液相色谱仪,测定结果见表1。因每批样品绿原酸含量均大于0.60 mg/mL,故拟定本品每毫升含绿原酸(C16H18O9)不得少于0.60 mg。
表1 参麦益气合剂含量测定结果
益气补血,温肾复脉。用于冠心病、心律失常等。
口服。饭前半小时,每次1/2 瓶,每日2 次。
每瓶装。
密封,置阴凉干燥处。
5.1 方中人参、麦冬、五味子是“生麦散”的组成,益气生津,敛阴止汗;桂枝、甘草温通心阳,治心阳虚之心悸;当归、黄芪补气生血;淫羊藿、延胡索增加冠脉流量;苦参、附子抗心律失常;金银花抑制多种病原微生物。诸药合用具有益气补血,温肾复脉之功。对冠心病、心律失常等有显著疗效。
5.2 选择几个具有代表性的成分通过薄层色谱法进行定性鉴别,方法简便易行,专属性强。用高效液相色谱法对方中金银花所含的绿原酸进行含量测定,方法简单准确,可用于本品的定量控制。
5.3 参麦益气合剂是我院资深医师几十年临床经验之总结,处方来源有很好的临床基础,开发成制剂并经过注册后,将成为我院心内科常用药品之一。
[1] 孙敬方.动物实验方法学[M]. 北京:人民卫生出版社,2001,359-364.
[2] 陈可冀,廖家桢,肖镇祥.心脑血管疾病研究[M].上海:上海科学技术出版社,1988,318-319.