正交试验优选衍宗育子胶囊提取工艺△

李星宇，刘元，宋志钊，文志云

（广西中医药研究院，广西 南宁 530022）

中药工业

正交试验优选衍宗育子胶囊提取工艺△

李星宇，刘元*，宋志钊，文志云

（广西中医药研究院，广西 南宁 530022）

目的：优选衍宗育子胶囊最佳提取工艺条件。方法：采用正交试验法安排试验进行优选，以淫羊藿苷总量为指标，确定最优提取工艺参数。结果：衍宗育子胶囊的最优提取工艺条件为：浸泡0.5 h，提取溶剂量为10、8、8倍量，提取2次，提取2 h。结论：优选得到的提取工艺质量稳定，重现性好，设备简单，适于工业化生产。

衍宗育子胶囊；提取工艺；正交设计；淫羊藿苷

衍宗育子胶囊主要由淫羊藿、肉苁蓉、巴戟天、蛇床子等中药组成，是广西民间验方经筛选后进行研制的中药制剂。衍宗育子胶囊具有补肾壮阳，益气生精之功效，临床用于治疗生成障碍性无精症，对肾阳虚衰引起的男性不育疗效显著。方中君药淫羊藿含淫羊藿苷成分，为本方中有效成分之一，用于肾阳虚之阳痿滑精，筋骨痿软等［1］。本文采用正交设计法，以浸膏中淫羊藿苷含量为指标成分，系统考察浸泡时间、提取溶剂量、提取次数及提取时间对淫羊藿苷的影响，优化衍宗育子胶囊的提取工艺。

1 仪器与试药

1.1 仪器

日本岛津LC-20A高效液相色谱仪，SPD-20AVP紫外检测器（岛津国际贸易上海有限公司）；威玛龙色谱工作站（南宁市威玛龙色谱科技有限公司）；HH-S恒温水浴箱（江苏省金坛市医疗仪器厂）。

1.2 试药

淫羊藿苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110737-200415）。中药材购于南宁市中药材公司，经本院中药所鉴定，均符合 《中国药典》2010年版一部标准，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 样品中淫羊藿苷的含量测定［2］

2.1.1 色谱条件 色谱柱为Apollo C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相为乙腈 －水（30∶70），流速：1.0 mL·min－1，检测波长：270 nm，进样量为10μL；柱温为室温；理论塔板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1 500。

2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取淫羊藿苷对照品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.1.3 供试品溶液的制备 取稠膏2.0 g，置具塞锥形量瓶中，精密加入稀乙醇20 mL，称定重量，超声处理1 h（90W，45 kHz），放冷，再称定重量，用稀乙醇补足缺失重量，摇匀，滤过，即得。

2.2 正交试验

根据药材吸水量预试验，为了保证煎煮时水量的均一，第一次煮提时应相应提高加水量为药材的2倍。选出影响水提的主要因素：药材浸泡时间、提取溶剂量、提取次数、提取时间。首先进行单因素考察，得出药材浸泡时间0，0.5，1.0 h 3个水平；提取溶剂量为8、6、6倍，10、8、8倍，12、10、10倍3个水平；一般提取次数为1次、2次、3次3个水平；提取时间为1，2，3 h 3个水平。因素水平见表1。采用L9（34）正交试验表安排进行正交试验。

2.3 试验方法及结果分析

根据工艺要求，按处方量（1／10）称取中药9份（每份含淫羊藿42 g、巴戟天42 g、蛇床子42 g、肉苁蓉33 g、菟丝子33 g、覆盆子33 g、黄芪42 g、西洋参8 g），按4个因素、每个因素3个水平，分别根据L9（34）正交表内的9个试验列号及条件进行9次提取试验，将每次试验的提取液滤过，合并提取液，提取液浓缩至稠膏，备用。测定每个实验提取所得淫羊藿苷含量。对试验结果进行统计学处理，见表2。方差分析见表3。

表1 水提工艺条件正交试验因素水平表

表2 正交试验L9（34）数据分析表及结果

表3 提取试验方差分析表

从方差结果分析可知因素C（提取次数）和B（提取溶剂量）对结果的影响具有统计学意义，而A（浸泡时间）和D（提取时间）对结果影响不具有统计学意义。再结合各因素K值进行分析，提取的最佳工艺是A3B3C3D2，故提取工艺条件最终确定为：（A）浸泡0.5 h，尽管浸泡1 h K值最高，但与浸泡0.5 h两者之间相差不大，为节省时间，大生产可不予以考虑，故定浸泡时间为0.5 h；（B）提取溶剂量：10、8、8倍量，尽管12、10、10倍K值最高，但与10、8、8倍两者之间相差不大，为节省溶剂，大生产可不予以考虑，故确定加水量为10、8、8倍量；（C）提取次数：2次，尽管提取3次K值最高，但与提取2次两者之间相差不大，为节省时间、溶剂，大生产可不予以考虑，故确定提取次数为2次；（D）提取时间：2h。

2.4 验证实验

为了确认优选的工艺条件的可靠性和稳定性，按优选工艺条件取相应药材进行3批验证实验，结果淫羊藿苷总量分别为 33.6，34.5，33.2 mg／100粒。

按处方量1／10倍称取相应药材，提取得淫羊藿苷总量为33.8 mg，比正交试验中提取得到的淫羊藿苷总量最高一组32.0 mg高出5.6%，表明此最佳工艺条件合理。

3 讨论

衍宗育子胶囊为中药复方制剂，考察生产工艺的优劣之一是通过考察制剂中的有效成分含量进行的。中医认为肾阳虚衰是大多数男性阳痿和不育最常见原因之一，其中下丘脑-垂体-性腺／肾上腺轴的功能紊乱是肾阳虚衰的病理基础之一。淫羊藿性辛、味甘，温，补肾阳，强筋骨，祛风湿。用于阳痿遗精，筋骨痿软，在方中起补肾壮阳作用。现代研究表明淫羊藿及其炮制品均有雌、雄性激素样作用，其有效成分淫羊藿苷可以在适合的剂量范围内直接促进垂体合成分泌GTH而直接作用于高级生殖调控中枢，达到补肾助阳的功效［3］。淫羊藿苷能浓度依赖性提高家兔阴式海绵体平滑肌cGMP浓度，对阴茎勃起的作用与其提高海绵体平滑肌cGMP浓度从而增强阴茎海绵体平滑肌松弛作用有关［4］，为治疗性机能障碍奠定了内在物质基础。因此将方中淫羊藿的有效成分淫羊藿苷作为本品制备工艺的考察指标，与本品的功能具有较好的相关性，可以较好地反映本品的质量。

［1］张森，谭建华，伊鹏霏，等.淫羊藿苷对生殖系统影响研究进展［J］.中兽医药杂志，2011，13（3）：76-77.

［2］宾天海，黄健军.HPLC法测定穿龙骨刺胶囊中淫羊藿苷的含量［J］.中国民族民间医药杂志，2011，20（18）：37-40.

［3］张森，于海峰，李晓艳，等.淫羊藿苷对大鼠腺垂体细胞合成分泌 GTH的影响［J］.中兽医药杂志，2007，26（1）：17-19.

［4］付杰，乔梁，金泰乙，等.淫羊藿苷对家兔阴茎海绵体cGMP浓度的效果［J］.中国药理学通报，2002（4）：430-433.

Optim ization of Extraction Technology for Yanzongyuzi Capsule by Orthogonal Experiment

LIXing-yu，LIU Yuan，SONG Zhi-zhao，Wen Zhi-yun
（Guangxi Institute for Chinese Medicine＆Pharmaceutical Science，Nanning530022，China）

Objective：To optimize the extraction technology of Yanzongyuzi capsules.M ethodsSellected the contents of Icariin as themost important factor，the extraction technology of Yanzongyuzi capsuleswas optimized by orthogonal experiment.Results：The optimal extraction technology of Yanzongyuzi capsules was adding 10，8，8 timeswater，soaking 30 minutes and extracting 2 h／time for 2 times.Conclusion：The optimal extraction technology applied to industrial production for stable quality，good reproducible and simple equipment.

Yanzongyuzi Capsules；Extraction；Orthogonal experiment；Icariin

广西壮族自治区卫生厅自筹经费科研课题（Z2011521）

*［通讯作者］刘元，Tel：（0771）5869102，E-mail：liuyuan0821＠vip.163.com

2012-02-06）