恶性胸腔积液中GLUT－1和HIF－1α的表达研究

张秀琴，陈向华，吕喜英

（承德医学院附属医院 检 验科，河北 承 德067000）

胸腔积液是临床常见的疾病，其中以结核病和恶性肿瘤引起最为多发，但二者缺乏特异性临床表现，影像学检查亦无特异性改变，常规胸水细胞学的阳性率仅为20%－40%左右，在许多情况下二者难以鉴别，且恶性胸腔积液一旦确诊均属于恶性肿瘤的晚期，预后较差，所以良、恶性胸腔积液鉴别诊断在临床工作中极为重要。本文对70例胸腔积液患者血清和胸腔积液中的葡萄糖转运蛋白－1（GLUT－1）和缺氧诱导因子1α（HIF－1α）水平进行检测，旨在探讨两者在恶性胸腔积液中的表达及临床意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 研究对象为2009年6月到2010年6月住院的70例胸腔积液患者。经常规胸腔穿刺采集胸腔积液标本，行胸腔积液常规、肿瘤标志物和脱落细胞学等项检查，部分患者接受纤维支气管镜检查及淋巴结活检，在采集胸腔积液的同时采集静脉血液。所用病例均经临床和（或）病理确诊，其中诊断结核性胸腔积液30例，其中男性16例，女性14例，年龄22－79岁，平均年龄48岁；恶性胸腔积液40例，其中男性22例，女性18例，年龄38－79岁，平均年龄53岁；健康对照组40例 ，为本院健康体检者，其中男性19例，女性21例，年龄34－76岁，平均年龄54岁。

1.2 方法

1.2.1 标本留取 经常规胸腔穿刺术留取胸腔积液标本，离心去细胞后分装－20℃冰箱冻存待检，在采集胸腔积液同时采集静脉血液标本，离心分离血清－20℃冰箱冻存待检。

1.2.2 血清／胸腔积液GLUT－1和 HIF－1α测定

采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清／胸腔积液GLUT－1和 HIF－1α的水平，试剂购自上海希美有限公司，严格按说明书进行操作。

1.3 统计学处理

资料描述采用中位数（下四分位数－上四分位数）［M（P25－P75）］，多组间比较采用 Kruskal Wallis H检验，两两比较采用Nemenyi法秩和检验；两组间比较采用Wilcoxon秩和检验。

2 结果

2.1 GLUT－1 三组患者血清及胸腔积液中GLUT－1水平测定结果见表1。

2.2 HIF1－α 三组患者血清及胸腔积液中HIF1－α水平测定结果见表2。注：1.三组Glut1浓度（血清）比较有区别（H＝63535，P＝0.000）；1）与2）比较无区别（χ2＝3.21，P＞0.05）；1）与3）比较（χ2＝41.08）、2）与3）比较（χ2＝51.13）均有区别（P＜0.01）。2.两组Glut1（胸腔积液）浓度比较1）与2）比较有区别（u＝5.330，P＝0.000）。

表1 三组患者血清及胸腔积液中GLUT－1水平比较

表2 三组患者血清及胸腔积液中HIF1－α浓度的比较

3 讨论

葡萄糖转运蛋白1（GLUT－1）是广泛存在于人体各组织细胞的葡萄糖转运体，在缺氧及缺血状态下可以出现表达增高。研究已证实GLUT－1在乳腺癌、肺癌、卵巢癌、子宫内膜癌等组织中高表达，且与肿瘤进展、分化及患者预后情况有一定的关系［1－4］。有研究显示，应用免疫化学S－P法检测胸腔积液中GLUT－1的表达情况有助于恶性积液的诊断［5－7］，但 国 内 外 有 关 定 量 检 测 胸 腔 积 液 中GLUT－1水平的研究报道甚少。本实验采用酶联免疫吸附法对30例健康对照和70例胸腔积液患者的血清和胸液中的GLUT－1水平进行检测，结果显示恶性积液组血清GLUT－1水平高于结核组和健康对照组中的水平，恶性积液组胸液GLUT－1水平高于结核性积液组（P＜0.001）；说明恶性胸腔积液中GLUT－1水平是高表达的。

Burstein等［8］认为，体腔渗出液中恶性肿瘤细胞无法依靠血管生成获取其生长所需的氧及营养物质，糖酵解是体腔渗出液中恶性肿瘤细胞在低氧状态下获能的重要途径，因此，在该环境中恶性肿瘤细胞对葡萄糖的摄取及代谢均处于增高状态，GLUT－1表达增强。GLUT－1过度表达可转运更多的葡萄糖以满足恶性细胞高代谢率和快速生长的需要，是细胞对其所处的特殊生理微环境的一种反应，在恶性肿瘤细胞的生存中起重要作用。由此可见GLUT1是一种鉴别良恶性胸腔积液的重要肿瘤标志物，对恶性胸腔积液的诊断和鉴别诊断具有重要的临床应用价值。

缺氧诱导因子－1α（hypoxia inducible factor 1 alph，HIF－1α）是广泛存在于哺乳动物和人体细胞的一种转录调节因子，能激活许多缺氧反应性基因表达。研究证实HIF－1α在人体许多肿瘤中大量表达，与肿瘤的生长繁殖、侵袭和转移、新生血管生成、凋亡、耐药等特征都密切相关［9－12］；张艳霞等研究显示HIF－1α在恶性胸腔积液中高表达［13］。本实验结果显示恶性积液组血清HIF－1α水平高于结核组和健康对照组中的水平，且恶性组胸液HIF－1α水平高于结核性积液组（P＜0.001）；说明恶性胸腔积液中HIF－1α水平是高表达的，与文献报道结果一致。

GLUT－1和HIF－1α在恶性胸腔积液中均是高表达，能否作为鉴别良恶性胸腔积液的有效标志物，还有待于临床的近一步研究。

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