血清NSE、NPY、S－100β和CGRP在手足口病并发脑干脑炎患儿中的变化及临床意义

颜红霞，肖启亮，冯 伟，周钰娟

（1.南华大学附属二医院儿科，湖南 衡阳421001，2.南华大学护理学院，湖南 衡阳421001）

手足口病（hand－foot mouth disease，HFMD）是由多种肠道病毒感染引起的儿科常见传染病。以5岁以下儿童多发，临床主要以口腔、手掌和足趾等部位出现斑丘疹、疱疹为特征［1］。患者病情一般较轻，预后良好。但个别患者可发展为重症病例，出现脑干脑炎、心肌炎、血管神经性肺水肿以及肺出血等并发症［2］，病情凶险，发展迅猛，严重威胁患儿的健康和生命。尤其是合并脑干脑炎时，死亡率相当高，极易留下后遗症。因此，及早识别、及早干预是提高手足口病重症患者抢救成功率、降低死亡率的关键。然而，目前在疾病早期能够有效预测手足口病重症病例尤其是并发脑干脑炎的指标十分有限，极需探寻更多的有益于早期判断病情严重程度的可靠指标。为此本研究探讨了HFMD患儿血清神经元特异性烯醇化酶（neutron specific enolase，NSE）、血清神经肽－Y（neuro eptide Y，NPY）、S－100β蛋白和血降钙素基因相关肽（calcitonin gene－related peptide，CGRP）的变化及其临床意义。

1 资料和方法

1.1 临床资料 本研究经南华大学附二医院伦理委员会批准后开展实施。均是来自于2009年2月－2010年5月在我院感染病区住院有完整病例资料的患儿共83例，平均住院时间7.5d（5－20d），所有患儿均按2008年版《手足口病防治指南》标准进行诊断［3］。其中包括手足口病并发脑干脑炎患儿（通过典型的神经系统症状，实验室检查和影像学特征等综合分析确诊）20例，男12例，女8例，平均年龄28.8月，称为并发脑干脑炎组（HFMD complicated with brain stem encephalitis group，B组）；手足口病一般及其他并发症病例63例，男41例，女22例，平均年龄26.7月，称为一般患儿组（common HFMD patients group，C组）。同时随机选取同期在我院儿科体检中心健康体检的健康儿童，且近期无有呼吸道、消化道等感染病史，也无HFMD等传染病接触史。共50例，男28例，女22例，平均年龄24.3月。称为正常对照组（Normal group，A组）。

1.2 检测方法

1.2.1 标本采集 所有患儿均在急性期（病程第1－3天）和恢复期（经抗病毒及对症治疗病情稳定后）采集血液标本；健康儿童及HFMD患儿静脉血各3ml，置离心机分离血清（3000r／min，10min），无菌分装后置于－80℃冰箱备用。

1.2.2 血清 NSE、NPY、S－100β和CGRP检测 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清NSE和S－100β，采用放射免疫分析法检测血清NPY和CGRP。以上试剂盒均购自于北京军事医学科学院放射医学研究所，操作步骤严格按照试剂盒使用说明书进行。

1.3 统计学方法 以统计学软件SPSS13.0对数据进行统计分析。数值以表示，组间比较采用t检验，相关性分析则采用Pearson系数进行分析。以P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 各组血清 NSE、NPY、S－100β和CGRP水平

如表1所示，所有手足口病患者血清中含有较高水平的NSE、NPY、S－100β和较低水平的CGRP。急性期时，与手足口病一般病例患者比较，手足口病并发脑干脑炎患者血清NSE、NPY、S－100β水平明显增高，血清CGRP水平明显降低（P＜0.001），而经治疗处于恢复期后，手足口病并发脑干脑炎患者较其急性期时，血清NSE、NPY、S－100β水平明显降低，血清CGRP水平明显升高（P＜0.01），但仍未恢复致健康儿童水平（P＜0.01）。无论处于急性期还是恢复期，手足口病一般病例患者血清NSE和S－100β均稍高于健康儿童，两者差异无统计学意义（P＞0.05）；急性期时，手足口病一般病例患者血清NPY水平明显高于健康儿童、血清CGRP水平则明显低于健康儿童（P＜0.01），但恢复期时，NPY和CGRP水平在手足口病一般病例患者和健康儿童之间差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 各组血清NSE、NPY、S－100β和CGRP水平（）

表1 各组血清NSE、NPY、S－100β和CGRP水平（）

A：正常对照组，B：并发脑干脑炎组，C：一般患儿组。Compared to A：aP＜0.01；Compared to B in Acute stage：b P＜0.01

n NSE（μg／L） S－100β（μg／L） NPY（ng／L） CGRP（ng／L）A 50 9.3±2.18 0.38±0.038 64.3±11.18 49.4±6.16 Acute stage B 20 21.4±5.45a 1.52±0.187a 149.3±23.16a 19.4±6.46a C 63 11.5±3.27b 0.45±0.057b 94.5±12.51ab 34.3±5.72ab Convalescence B 20 15.3±2.71ab 0.84±0.116ab 102.3±15.75ab 32.8±7.83ab C 63 10.2±2.48 0.42±0.027 71.3±14.18 45.2±4.79b

2.2 手 足 口 病 患 者 血 清 NSE、NPY、S－100β 和CGRP水平间的相关性分析

如图1所示，NSE 与 S－100β呈正相关（r＝0.527，P＝0.014）；NPY 与 CGRP呈负相关（r＝－0.435，P＝0.023）。

3 讨论

手足口病（HFMD）主要是以肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇A组16型（CoxA16）等为代表的肠道病毒感染引起的急性传染病，以5岁以下儿童多发。一般情况病情进展可分为3期［4］：一期主要表现为手足口病／疱疹性咽峡炎；二期主要表现为脑炎、脑脊髓炎；三期主要表现为心血管功能紊乱。研究认为［4］二期也就是手足口病并发脑干脑炎患者临床救治的关键所在，此时抢救成功率高，否则一旦进入三期病变，患者病情则难以逆转，死亡率较高。即及时识别神经系统受累、积极有效的针对神经系统病变进行干预是阻止手足口病向危重症发展的关键［5］。然而，目前临床上能有效预测手足口病神经系统损害的指标十分有限，极需探寻更多能及早提示重症病例的预警指标，为临床危重症患者救治提供便利。

神经元特异性烯醇化酶（NSE）特异性存在于神经元、神经纤维和神经内分泌细胞中，具有烯醇化酶的活性，与神经元的分化、成熟有关，NSE同时也是糖酵解途径的关键酶［6］。正常体液中NSE含量甚微，但当脑受到损伤时，神经细胞因受损而变性、坏死崩解，该酶可大量进入脑脊液和血液中。因此，认为脑脊液和血液中NSE含量的高低可反映中枢神经系统受损的程度，是反映神经元细胞受损程度较好的生化指标［6，7］。本研究结果显示，在急性期时，手足口病并发脑干脑炎患者血清NSE含量明显高于手足口病一般病例患者和健康儿童（P＜0.001），而手足口病一般病例患者血清NSE只稍高于健康儿童，两者差异无统计学意义（P＞0.05）；患者经过治疗处于恢复期时，虽然手足口病并发脑干脑炎患者血清NSE含量仍然高于一般病例患者和健康儿童（P＜0.01），但较急性期时，血清 NSE含量明显降低（P＜0.01）。由此说明血清NSE水平不仅可较早而及时准确地反映中枢神经系统受损的程度，而且还可作为预报病情变化的指标。

S－100β蛋白是一种酸性钙结合蛋白，分子量较小但具有广泛生物学活性，主要存在于中枢神经系统的少突神经胶质细胞和星形细胞中［8］。中枢神经系统细胞损伤后，S－100β蛋白首先从胞液进入脑脊液，再经被破坏的血－脑脊液屏障进入血液［9，10］。因此S－100β蛋白被认为是中枢神经系统损伤较特异和灵敏的标志物，其含量的高低可以反映患者神经元和胶质细胞损害的严重程度［11］。本研究结果显示，在急性期时，手足口病并发脑干脑炎患者血清S－100β含量明显高于手足口病一般病例患者和健康儿童（P＜0.001），而手足口病一般病例患者血清S－100β只稍高于健康儿童，两者比较差异无统计学意义（P＞0.05）；患者经过治疗处于恢复期时，虽然手足口病并发脑干脑炎患者血清S－100β含量明显降低（P＜0.01），但仍然高于一般病例患者和健康儿童（P＜0.01）。其结果说明S－100β蛋白含量可及时较准确地反映手足口病并发脑干脑炎损伤的程度，对手足口病并发脑干脑炎患儿转归的判断具有积极意义。

神经肽Y（NPY）起源于颈内神经节，在中枢神经系统中广泛存在，以基底节中含量最高，在循环血液中也有少量分布［12］。NPY是一种神经多肽，具有强烈收缩血管作用。大鼠颈内动脉灌注给药后，可促使大鼠血流量减少40%－98%［13，14］。研究显示NPY对围生期大脑的发育起着非常重要的作用，当NPY水平升高时可引起大脑继发性损害，如加重大脑缺血缺氧和脑水肿等，也可促进下丘脑垂体激素的分泌导致血浆皮质醇增加，从而产生神经毒性作用［15，16］。由此提示血浆NPY水平的升高与大脑缺血缺氧损伤关系密切。除此之外，NPY还能增强其它内源性缩血管物质以及抑制舒血管物质的效应［17］。血降钙素基因相关肽（CGRP）是一种生物活性多肽，广泛存在于人体中枢和外周神经系统以及消化、呼吸、心血管、内分泌等系统。CGRP与NPY的功能相反，具有强大的舒张血管作用，是NPY的重要拮抗剂，其舒张血管作用不需依赖血管内皮细胞的完整性，对缩血管物质具有明显的拮抗作用［16］。在本研究中，我们发现：在急性期时，两组手足口病患者血清NPY水平均明显高于健康儿童（P＜0.01），而两组手足口病患者血清CGRP水平均明显低于健康儿童（P＜0.01），但手足口病并发脑干脑炎时，其血清NPY水平明显高于手足口病一般病例患者，血清CGRP水平明显低于手足口病一般病例患者（P＜0.01）；患者处于恢复期时，手足口病并发脑干脑炎患者血清NPY水平明显降低，CGRP水平明显升高，但NPY和CGRP水平仍未恢复致健康儿童水平（P＜0.05），而NPY和CGRP水平在手足口病一般病例患者和健康儿童之间差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究结果说明NPY水平升高和CGRP水平降低可能直接参与了手足口病并发脑干脑炎的发病过程，动态测定NPY和CGRP的变化对监测手足口病患者病情严重程度具有重要的临床价值。

相关性分析显示，手足口病并发脑干脑炎患儿血清 NSE 和S－100β水平显著正相关（r＝0.527，P＝0.014），而血清NPY和CGRP水平显著负相关（r＝－0.435，P＝0.023）。综上所述，手足口病患儿血清 NSE、S－100β、NPY和CGRP水平变化与手足口病是否并发脑干脑炎密切相关，监测血清中上述指标变化对了解手足口病并发脑干脑炎患者的病情、疗效观察以及预后判断有着重要的临床应用价值，但还需进一步研究证实。

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