显微镜与血细胞计数仪在血小板计数中的检测作用与影响分析

何少雄 叶旭英

广东省博罗县人民医院检验科，广东博罗 516100

显微镜与血细胞计数仪在血小板计数中的检测作用与影响分析

何少雄 叶旭英

广东省博罗县人民医院检验科，广东博罗 516100

目的观察显微镜和血细胞计数仪在血小板计数检测中的结果差异。方法使用血细胞分析仪和显微镜，严格按规定操作检测标本得出结果，并对结果差异存在统计学意义的标本用血涂片法验证对照。结果当血小板正常时，两种方法的检测结果比较，差异无统计学意义；当血小板升高时，两种方法的检测结果比较，差异无统计学意义。对照血涂片法所测值与二者都无相关性，无法比较哪种方法更准确。当血小板降低时，两种方法的检测结果比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；尤其是当并发高脂血症时，血涂片验证法与显微镜手工法相关性更高（P＜0.05），血细胞分析仪法的测量误差比较明显。结论在血小板计数在正常值范围内时，两种检测方法都很准确，但前者更加简单、方便和迅速；当在病理情况下时，尤其是血小板严重减少和出现形态改变时，两者都会出现测量误差，但显微镜手工法相对准确些。在临床检查时，先使用细胞分析仪进行定性检查，若有异常应用显微镜手工法做重复检查，提高结果准确性。

血小板计数；细胞分析仪；显微镜

血小板参与初期的凝血过程，能促进止血和凝血，在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成和术中出血等生理和病理过程中有重要作用；并且，血小板计数还与多种血液科疾病密切相关，对各种血液疾病和其相关疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。输注血小板价格昂贵，且可能诱发感染和免疫反应，血液病和需要输注血小板的患者，更需要准确的血小板实验室检测来判断输注是否必要。因此，血小板的准确检测有相当重要的临床价值。笔者所在科室对自2011年2月～2012年2月期间，来院体检的健康人群和有关疾病就诊的患者共400例血液标本，对其中血小板计数异常的152例进行显微镜镜检和血细胞分析仪检测[1]，并报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2011年2月～2012年2月，来笔者所在医院体检的健康人群和有关疾病就诊治疗的患者400例，对其中血小板计数结果异常的152例患者；其中男78例，女74例；年龄14～79岁，平均（34.2±3.5）岁。所有被检测者血液均采用显微镜和全自动细胞分析仪两种方法检测。

1.2 仪器和试剂

使用普朗医疗器械公司生产的XFA6000Intelligent智能化全自动血液细胞分析仪和仪器原厂配套的试剂。显微镜（上海光学仪器厂，万能工具显微镜19JC）和草酸铵溶液（上海笛拍化学品技术有限公司，×100）[2]。

1.3 方法

血细胞分析仪法：采用XFA6000 Intelligent智能化全自动血液细胞分析仪，严格按照操作规范操作，1 h内完成待测标本中的血小板、红细胞、白细胞数测定。

显微镜手工法：取血细胞分析仪法的同一待测标本20μL，加入0.38 mL草酸胺稀释液，10 min后显微镜下计数并计算血小板数。

对两者之间的结果进行统计学分析，存在统计学差异的再用血涂片法进行验证对照。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 两种方法检测血小板计数结果比较

当血小板正常时，两种检测方法的结果差异无统计学意义；当血小板升高时，两者存在较大差距，对照血涂片法所测值与二者都无相关性，无法比较哪种方法更准确。当血小板降低时，血涂片验证法、细胞分析仪计数法与显微镜手工法检测结果的差异有统计学意义（P＜0.05）。显微镜计数法的结果与血涂片验证值更接近。见表1。

2.2 组间血小板异常检出率比较

组间两种方法血小板异常检出率比较，使用血细胞分析仪法检出率高于显微镜法，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 细胞分析仪法和显微镜法血小板计数结果比较（×109/L）

表2 组间计数结果检出率比较[n（%）]

3 讨论

血小板的检测是血液分析的重要组成部分，本资料研究中使用的细胞分析仪使用的是光学法和阻抗法联合对血小板的数目及体积进行计数，并根据信号的不同绘出血小板体积分布直方图。以低角度前向光散射和高角度散射两个测量系统同时测量1个血小板，根据低角度光转换能量的大小测量单个血小板体积与总数。虽然红细胞和血小板的体积差异明显，按由于两者所使用的仍然是同一种分析系统，通过设定阈值将两者的光电信号分开，这就不可避免的造成了体积较大的血小板的脉冲信号进入红细胞区，小体积的红细胞的脉冲信号进入血小板区；造成了不可避免的测量的随机误差。现在，各大仪器生产商也在积极提升技术，提高测量结果的准确性。如：扫流技术、鞘流技术、浮动界标技术、延时计数和拟合曲线等技术，然而仍然会有各种随机因素影响测量结果的准确性[3]。

血小板是骨髓中巨核细胞脱落下的直径1～8μm的圆盘形的细胞碎片，成群分布于红细胞之间，与红细胞体积差异很大，自动细胞分析仪法依据此来区分红细胞和血小板。血小板计数在正常值为（100～300）×109/L之内时，细胞分析仪法和显微镜法的测量结果无统计学差异；细胞分析仪相比于显微镜法不仅操作简便，快速，相对准确，而且不会由于操作者不同产生较大系统误差。此时，全自动细胞分析仪法优于显微镜手工法。

当血小板计数＜100×109/L低于正常值时，可出现出血时间延长，皮肤黏膜紫癜，手术后出血；当其数值低于20×109/L时，可引起自发性出血。引起血小板减少的常见原因有：家族遗传性疾病，血小板生成障碍如再生性障碍性贫血、急性白血病、急性放射疾病等，此时血小板计数明显降低，剩余的少量血小板也存在情况不等的形态异常，此外病理状态下生成的一些与血小板体积形态相当的颗粒，导致了细胞分析仪检测准确率的下降。此时显微镜手工法检测的准确率高于细胞分析仪[4]。

而血小板增多可分为原发性和特发性增多，前者主要见于骨髓增生性疾病和家族遗传性疾病。根据调查结果，此时显微镜法与细胞分析仪法二者虽存在统计学差异但无法确定哪一个更可靠，因为显微镜手工法也可能由于计数板面积太小，凝血系数增加使血小板分布不均都可能导致其结果的不准确。

综上所述，血细胞分析仪检测法和显微镜手工检测法都存在其局限性和优点。在血小板计数在正常值范围内时，两种检测方法都很准确，但前者更加简单、方便和迅速；当在病理情况下时，尤其是血小板严重减少和出现形态改变时，两者都会出现测量误差，但显微镜手工计数法相对准确些[5]。在临床检查时，先使用细胞分析仪进行定性检查，若有异常应用显微镜手工法做重复检查，提高结果准确性。

[1]李永军.显微镜与血细胞计数仪在血小板计数中的检测作用与影响[J].中外医疗，2011，30（33）：82.

[2]范欣，张忠亮.血细胞计数仪血小板计数假性降低的原因分析[J].职业与健康，2005，21（12）：1958-1959.

[3]荣爱国，冯素萍.自动血液细胞分析仪与显微镜的关系探讨[J].山西医科大学学报，2001，32（1）：86-87.

[4]傅立强，桑列勇，童海明，等.不同血液分析仪测定机采血小板计数结果的比较分析 [J].检验医学，2010，25（10）：794-796.

[5]巩惠芸，顾晓菁.相差显微镜血小板计数法对血液分析仪测定“血小板计数减少”结果的复核作用[J].检验医学，2004，19（6）：524，527.

R446.113

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2095-0616（2012）12-112-02

2012-04-06）