3项指标联合检测在2型糖尿病早期肾损害的诊断价值

林明相，赵玲敏（.福建省厦门市第二医院检验科 360；.集美大学水产学院，福建 厦门 360）

3项指标联合检测在2型糖尿病早期肾损害的诊断价值

林明相1，赵玲敏2（1.福建省厦门市第二医院检验科 361021；2.集美大学水产学院，福建 厦门 361021）

目的探讨联合检测同型半胱氨酸（Hcy）、血清胱抑素C（Cys C）和尿微量清蛋白（UmAlb）与尿肌酐（UCr）比值在2型糖尿病（T2DM）肾损害早期诊断和治疗意义。方法 依据24h尿微量白蛋白的定量测结果将182例T2DM患者分为3组：A组为糖尿病无肾病组（UmAlb＜30mg/24h）60例，B组为早期糖尿病肾病组（EDN）（UmAlb≧30mg～300mg/24h）62例，C组为糖尿病明显肾病组（ADN）（UmAlb＞300mg/24h）60例。对这3组患者进行血清Cys C、Hcy、UmAlb/UCr、血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）含量检测，并与50例健康对照组进行比较。结果 B组CysC、Hcy、UmAlb/UCr水平分别为（1.95±0.52）mg/L、（17.18±2.57）μmol/L、（142.5±31.47）mg/g，C组分别为（2.43±0.65）mg/L、（19.28±3.66）μmol/L、（387.2±61.48）mg/g，均高于健康对照组和 A组，差异有统计学意义（P＜0.05）；C组血清Cys C、血清 Hcy、UmAlb/UCr水平高于B组，差异有统计学意义（P＜0.05）；以单一指标阳性作为诊断标准，血清Cys C、血清Hcy、UmAlb/UCr对2型糖尿病肾损害的阳性率分别为85.2%、80.3%、86.9%，3项联合检测阳性率达96.7%，明显高于单项检测（P＜0.05）。结论 联合检测血清 Hcy、血清Cys C、UmAlb/UCr对2型糖尿病肾病早期诊断及病情监测具有重要价值。

2型糖尿病； 早期肾损害； 胱抑素C； 同型半胱氨酸； 尿微量白蛋白； 尿肌酐

有研究表明，尿微量白蛋白（UmAlb）与尿肌酐（UCr）比值是诊断早期糖尿病肾病（DN）的敏感指标。同型半胱氨酸（Hcy）是一种含硫氨基酸，近年来研究表明Hcy可促进糖尿病中的糖基化终末产物加剧微血管内损伤，高Hcy血症可作为DN的危险因素之一。胱抑素C（Cys C）是反映肾小球滤过率（GFR）变化新的内源性标记物，它比常规血清肌酐和尿素氮有更高的灵敏度和特异性，是近年来早期肾病临床诊断最常用的指标之一。本研究主要比较2型糖尿病及T2DM伴有DN的患者血清Cys C、血清Hcy及UmAlb/UCr水平，研究其相关性，并探讨联合诊断T2DM糖尿病早期肾病临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2009年2月至2012年4月内分泌科住院治疗的2型糖尿病患者182例，依据24h尿微量清蛋白的定量将其分为3组：A组糖尿病无肾病组（UmAlb＜30 mg/24h）60例（男33例，女27例），平均年龄（51±11）岁；B组早期糖尿病肾病（EDN）组（UmAlb≥30mg～300mg/24h）62例（男35例，女27例），平均年龄（51±13）岁；C组糖尿病明显肾病（ADN）组（UmAlb＞300mg/24h）60例（男36例，女24例），平均年龄（52±12）岁。健康对照组50例为本院同期健康体检者，其中男24例，女26例，平均年龄（49±11）岁，并排除高脂血症、高血压、糖尿病、心脑血管疾病、肝肾疾病等。

1.2 样本收集与处理 （1）所有受试者均过夜禁食12h，次晨空腹采集静脉血4mL，4000r/min离心8min，分离血清检测Cys C、Hcy、BUN、SCr。（2）嘱受试者留取随机尿于干净容器中立即送检，检测UmAlb和UCr。

1.3 仪器及试剂 测定血清Cys C、血清Hcy、SCr、UCr、血清BUN用Beckman Coulterlx20全自动生化分析仪。Cys C测定试剂盒由北京利德曼生化股份有限公司生产，Hcy试剂盒由北京九强生物技术股份有限公司生产，Cr和BUN测定试剂盒由Beckman Couter实验系统（苏州）有限公司生产，UmAlb测定用QuikRead®U－ALB试剂盒由芬兰Orion诊断公司生产。

1.4 方法 Cys C采用胶乳增强免疫比浊法，Hcy采用循环酶法，Cr采用苦味酸速率法，UmAlb定量采用免疫比浊法，BUN采用酶学传导速率法。

1.5 判断标准 CysC＞1.25mg/L为阳性，Hcy＞17μmol/L为阳性，UmAlb/UCr＞30mg/g为阳性，BUN＞7.1mmol/L，SCr＞133μmol/L为阳性。

1.6 统计学处理 所测的数据输入SPSS17.0统计软件包进行分析，计量资料的统计描述用以±s表示，组间比较采用t检验；阳性率比较采用四格表χ2检验，相关性分析采用Spearman相关分析；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组血清CysC、血清Hcy、UmAlb/UCr的检测结果 见表1。

表1 糖尿病患者及健康对照组各项指标检测结果（±s）

表1 糖尿病患者及健康对照组各项指标检测结果（±s）

注：与健康对照组比较，aP＜0.05；与 A组比较，bP＜0.05；与B组比较，cP＜0.05。

组别 n CysC（mg/L） Hcy（μmol/L） UmAlb/UCr（mg/g） BUN（mmol/L） SCr（μmol/L）5.12±1.4775.60±18.26 B组621.95±0.52b17.18±2.57b142.50±31.47b5.81±1.8992.10±25.21 C 组602.43±0.65c19.28±3.66c387.20±61.48c9.21±3.16c142.10±34.80c健康对照组500.72±0.2610.33±1.1816.45±6.264.91±1.2 A 组601.01±0.38a12.31±1.39a20.44±8.06a371.20±16.17

2.2 DM 患者各组与健康对照组血CysC、Hcy、UmAlb/UCr的阳性率 见表2。

表2 糖尿病患者与健康对照组各指标的阳性率[n（%）]

2.3 血清CysC、血清Hcy、UmAlb/UCr单项及联合检测对诊断早期DN的效能 见表3。

表3 血清CysC、血清Hcy、UmAlb/UCr灵敏度及特异度比较（%）

2.4 相关性分析 选用Spearman等级相关分析，UmAlb/UCr与血清CysC、血清Hcy呈正相关，相关系数分别为r＝0.658，P＜0.05，r＝0.558，P＜0.05；血清 CysC与血清 Hcy呈正相关，r＝0.621，P＜0.05。

3 讨 论

SCr是体内肌酸分解代谢的产物，主要由肾滤过并排出体外，当GFR下降50%时，SCr才会有所升高，SCr参考范围大，个体差异明显，影响因素多[1]。BUN和SCr一样在肾损伤发生早期也可在正常范围，其影响因素更多。临床经验表明，当糖尿病患者发现SCr和BUN轻度增高时，其肾功能代偿已经达极限，大部分患者将在短时间内进入肾功能失代偿期，并逐渐发展为尿毒症，这病程一旦开始，病情将不可逆转，因此发现早期糖尿病肾病很必要。本研究也反映出在DN早期阶段，SCr和BUN变化不甚明显，尤其是BUN的改变与健康对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。因此SCr和BUN作为DN的早期指标其灵敏度、特异度均不高。

Hcy在体内不能合成，是导致心血管疾病的一个新的独立危险因子[2－5]。近来大量研究发现糖尿病患者中存在 Hcy代谢异常，高Hcy血症作为糖尿病肾病的危险因素之一引起人们重视。本研究发现DN患者血清Hcy水平较健康对照组明显增高（P＜0.01），这与 Ozemen等[6]研究结果一致，其认为高Hcy血症与糖尿病微血管并发症有关。Hcy在血中不稳定，极易氧化，产生过氧化氢、超氧化物阴离子等，导致酶、受体功能障碍；诱导产生应激蛋白，清除氧自由基的酶活性降低，内皮依赖性血管舒张因子（EDRF）产生减少，生物活性下降，破坏细胞膜的完整性，导致微血管内皮细胞损伤[7－10]。有研究显示，随着糖尿病肾病中病情的不断恶化，Hcy含量逐渐增高，本研究证实了糖尿病肾病组Hcy的水平明显高于健康对照组。血清Cys C是血清半胱氨酸抑制剂超家族的成员之一，为122个氨基酸组织的一种低相对分子质量的非碱性糖化蛋白质[11－12]。血清中Cys C的浓度主要由GFR决定，且不受性别、饮食、炎症、胆红素、肌肉量、溶血等因素的影响，且肾脏是清除循环中CysC的唯一器官。糖尿病患者由于长期高血糖，产生大量氧自由基，使肾小球基底膜细胞滤过功能不断地被破坏，使肾小球处于高过滤状态，造成尿蛋白漏出增多，对Cys C的滤过并不增加，由于肾小球基底膜增生，造成滤过面积减少，导致GFR下降，血Cys C上升。现在有报道认为Cys C是反映肾脏功能受损更早、更理想、更可靠、更敏感的指标[13]。当肾小球有轻微损伤时，Cys C浓度就会迅速升高，并随着病情的加重而逐渐增高，本实验结果进一步证实了这点。由表1可知，Cys C随着DM患者UmAlb的增加而明显升高（P＜0.05）。

UmAlb属于肾小球性蛋白肾小电荷选择性和筛网选择性屏障损伤的标志性蛋白，是肾小球滤过功能损伤的标志。单独检测UmAlb易受月经期、尿路感染、发热、运动量、血压等因素影响，正常情况或肾轻度损伤时患者UmAlb与UCr的排出量均受同样因素的影响而发生变化，故UmAlb/UCr比值保持相对不变，因此只有UmAlb/UCr比值水平才能较准确诊断T2DM早期肾损伤。有学者认为，在半年内连续检测尿Um－Alb/UCr比值有2次超过正常范围提示有肾损伤的存在[14]。

在本研究中B组的血清Cys C、血清Hcy和UmAlb/UCr的结果均明显高于健康对照组（P＜0.05）。C组的血清Cys C、血清Hcy和UmAlb/UCr的结果均明显高于B组（P＜0.05），3种联合检测的阳性率明显高于单项检测（P＜0.05）。本研究结果表明，在患者出现大量的蛋白尿之前，联合检测血清Cys C、血清Hcy和UmAlb/UCr能大大提高检测阳性率，从而能早期预测DM患者并发糖尿病肾病的可能性，当血清Cys C、Hcy升高时及时做好预防和治疗措施。

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Diagnostic value of combined measurement of serum Hcy，serum Cys C，urinary microalbumin and urinary creatinine ra－tio levels in type2diabetes mellitus with early kidney injury

LIN Ming－xiang1，ZHAO Ling－min2（1.Laboratory，

Xiamen Second Hospital，Xiamen，Fujian361021，China；2.College of Fisheries，Jimei University，Xiamen，Fujian361021，China）

Objective To explore the diagnostic value of combined measurement of serum homocysteine（Hcy），serum cystatin C（Cys C），urinary microalbumin（UmAlb）and urinary creatinine（UCr）ratio levels in type2diabetes mellitus with early kidney injury.Methods182cases of type2diabetes mellitus（T2DM）patients were enrolled and divided into three groups according to the excretion rate24hour urinary microalbumin.A group without diabetic nephropathy（UmAlb＜30mg/24h）（NDN，60cases），B group with early diabetes nephropathy（30mg/24h≤UmAlb≤300mg/24h（EDN，62cases），C group with apparent diabetic nephropathy（UmAlb＞300mg/24h（ADN，60cases），and50healthy people served as normal control group（D group）.Serum Cys C，Serum homocysteine，urinary microalbumin，urinary creatinine，serum creatinine and blood urea nitrogen of these four groups were detected simultaneously.Results Levels of serum Hcy，serum Cys C，UmAlb/UCr ratio in these two groups（B，C group）were higher than D group，Serum Hcy，serum Cys C，UmAlb/UCr ratio were significantly different between group B，C and group D（P＜0.05）.Levels of serum Hcy，serum Cys C，UmAlb/UCr ratio in these two groups（B，C）were higher than A group.Serum Hcy，serum Cys C，UmAlb/UCr ratio were significantly different between group B，C and group A（P＜0.05）.Levels of serum Hcy，serum Cys C，UmAlb/UCr ratio in the group C were higher than group B.Serum Hcy，serum Cys C，UmAlb/UCr ratio were significantly different between group C and group B（P＜0.05）.As a single positive marker for diagnosis，the sensitivity for serum CysC，serum Hcy，and UmAlb/UCr were85.2%，80.3%and86.9%respectively，the positive rate of combined detection was96.7%，which was significantly higher than that of the individual testing（P＜0.05）.Conclusion Combined measurement of serum Hcy，serum Cys C，and UmAlb/UCr ratio levels has important clinical value for diagnosis and condition monitoring in type2diabetes mellitus with early kidney injury.

type2diabetes mellitus； early kidney injury； cystatin C； homocysteine； urinary microalbumin； urinary creatinine

10.3969/j.issn.1672－9455.2012.18.030

A

1672－9455（2012）18－2315－03

2012－02－15）