正交试验优选肤宁洗剂提取工艺Δ

黄慧，顾卫，黄丽雅，翁雪萍（.惠州市中医医院，广东惠州5600；.惠州市药品检验所，广东惠州56003）

正交试验优选肤宁洗剂提取工艺Δ

黄慧1＊，顾卫1#，黄丽雅1，翁雪萍2（1.惠州市中医医院，广东惠州516001；2.惠州市药品检验所，广东惠州516003）

目的：优选肤宁洗剂的提取工艺。方法：采用水提醇沉法提取，以苦参碱含量为评价指标，以加水量、提取时间、提取次数、醇沉溶液的pH值为考察因素，采用正交试验优选工艺。结果：最佳提取工艺为药材加8倍量水，提取3次，每次提取3 h，醇沉溶液pH值为9.5。结论：所选工艺简便、稳定，可用于肤宁洗剂的提取。

肤宁洗剂；正交试验；苦参碱；提取工艺

肤宁洗剂是惠州市中医医院应用多年的协定方，由苦参、川椒、百部、白鲜皮等药味组成，具有清热解毒、止痒消肿、祛湿杀虫的功效，用于治疗急性皮炎、湿疹等皮肤病。方中苦参主要有效成分为生物碱，具有清热燥湿、杀虫等功效，其在中枢神经系统、心血管系统等方面都有重要的药理活性[1]。故笔者选取苦参中苦参碱含量为指标优选肤宁洗剂的提取工艺。

1 仪器与试药

LH-08 B台式连续投料中药粉碎机（新昌县城关红利数据制造厂）；AUY-220精密电子天平（广州仪通兴仪表有限公司）；UV1102紫外-可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；KQ-500 DB数控超声波清洗仪（上海市超声仪器有限公司，功率：500 W，频率：50 kHz）。

处方中所有药材均购于惠州九惠药业有限责任公司，经惠州市中医医院主任中药师顾卫鉴定为真品。苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110805-2005508）；水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 苦参碱含量测定

2.1.1 对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品12.5 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取1 mL转移至25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1 mL含0.05 mg的苦参碱对照品溶液。

2.1.2 供试品溶液的制备精密量取肤宁洗剂10mL，置于Δ惠州市科技计划（医疗卫生）项目（2011 Y066）

＊主管中药师。研究方向：中药学。电话：0752-2189809。E-mail：24176741@qq.com

#通讯作者：主任中药师。研究方向：中药学。E-mail：hz_zyyyp@ 126.com 100 mL具塞三角瓶中，加水80 mL，超声30 min，滤过，滤液置100 mL量瓶中，氨水调pH值为9.0，加水至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液3 mL，置10 mL量瓶中，加水定容，摇匀，即得。2.1.3线性关系考察分别量取苦参碱对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，置分液漏斗中，加入pH7.8的缓冲液（NH3·H2O与NH4Cl的混合溶剂）10 mL，加入环己烷10 mL和0.05%溴麝香草酚蓝溶液1.0 mL，振摇5 min，静置分层，取环己烷层，在413 nm波长处测定吸光度（A）。以苦参碱检测浓度（c）为横坐标，A为纵坐标，绘制标准曲线，得苦参碱的回归方程为A＝177.5 c+0.1663（r＝0.9994）。结果表明，苦参碱检测浓度在1.0～5.2 mg·L－1范围内与吸光度呈良好线性关系。

2.1.4 精密度试验精密移取对照品溶液1 mL，按“2.1.3”项下方法测定吸光度，连续测定6次。结果，RSD＝1.4%（n＝6），表明仪器精密度良好。

2.1.5 加样回收率试验精密量取已知含量（苦参碱含量：5.213 mg·mL－1）的样品1 mL，共9份，分别加入苦参碱对照品5.210 mg，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1.3”项下方法测定吸光度，并计算加样回收率。结果，平均回收率为99.5%，RSD＝2.3%（n＝9）。

2.2 正交试验优选提取工艺

2.2.1 试验设计根据笔者经验和预试验，选取对提取工艺影响较大的加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）、醇沉溶液的pH值（D）为考察因素，每个因素设3个水平，按L9（34）正交表进行试验。因素水平见表1。

2.2.2 试验结果按处方比例称取各种药材9份，每份50 g，按表1中因素水平进行试验[2]。按“2.1”项下方法测定苦参碱含量，以此为评价指标优选工艺。正交试验结果见表2；方差分析结果见表3。

表1 因素水平Tab 1Factors and levels

表2 正交试验结果Tab 2 Results of orthogonal test

由表2、表3可知，各因素影响提取工艺的主次顺序为提取次数＞提取时间＞醇沉溶液的pH值＞加水量，且提取时间、提取次数对工艺有显著性影响（P＜0.05）。最佳工艺为药材加8倍量水，提取时间3 h，提取3次，醇沉溶液pH值为9.5。

表3 方差分析结果Tab 3Results of analysis of variance

2.3 工艺验证试验

按处方比例称取各药材适量，共50 g，按上述最佳工艺提取3次，并测定提取液中苦参碱含量。结果，3次提取的苦参碱含量分别为5.427、5.418、5.421 mg·g－1，与正交试验中苦参碱含量最高值相当，说明该工艺稳定、可行。

3 讨论

考虑到基层医院的条件，本试验选用煎煮法提取生物碱；常用的溶剂有水、酸水、碱水、有机溶剂等，而根据参考文献[3]，笔者选用水为溶剂提取苦参中苦参碱，此法操作简便，成本较低，也比较适合洗剂的特点。

[1]吴智慧，黄绳武，胡锡波.苦参生物碱的药理研究进展[J].中南药学，2006，4（5）：380.

[2]李巧如，王娥珍，张鹏，等.正交试验优选泌尿宁颗粒提取工艺[J].中国药房，2008，19（6）：426.

[3]王英姿，韩春超，孙秀梅.苦参5种提取方法的比较研究

[J].山东中医药大学学报，2011，35（6）：543

Optimization of the Extraction Technology of Funing Lotion

HUANG Hui，GU Wei，HUANG Li-ya（Huizhou Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Huizhou 516001，China）
WENG Xue-ping（Huizhou Institute for Drug Control，Guangdong Huizhou 516003，China）

OBJECTIVE：To optimize the extraction technology of Funing lotion.METHODS：Water extraction and alcohol precipitation was adopted.The extraction technology was optimized by orthogonal design with water added，extraction time，extraction times and pH value of precipitating solution as factors using the content of matrine as index.RESULTS：The best extraction technology was 8times water，extracting for 3times，lasting for 3h each time，pH value of precipitating solution of 9.5.CONCLUSION：The optimized process is simple and stable for the extraction of Funing lotion.

Funing lotion；Orthogonal test；Matrine；Extraction technology

R284.2；R283.6

A

1001-0408（2012）27-2522-02

2012-03-05

2012-04-17）

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2012.27.09