左军 孔繁军 丁旭
全血或血浆测定dimer的研究
左军 孔繁军 丁旭
目的全血或血浆测定dimen的研究。方法目前测定D-二聚体多数采用109 mmol/L或105 mmol/L枸橼酸钠作为抗凝剂,全血与抗凝剂的比例为9∶1分离血浆来测定,离心、测试时间长,我们采用瑞莱生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫检测系统及其试剂,用抗凝全血(105 mmol/L枸橼酸钠作为抗凝剂)和(EDTA2 k抗凝剂)全血及血浆分别测定D-二聚体。结果三者结果有显著的差异,用105 mmol/L枸橼酸钠作为抗凝剂全血测定结果最低。EDTA2 k抗凝剂的全血测定高于前者,而用105 mmol/L枸橼酸钠作为抗凝剂的血浆结果最高。结论用抗凝全血检测D-二聚体可以作为一种快速筛查手段。
全血D-二聚体ReLIA;免疫检测
1.1 材料瑞莱生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫检测系统试剂批号20111001023。凝血常规检测抗凝管(105 mmol/L枸橼酸钠)、EDTA2K抗凝剂采血管
1.2 方法分别选取30分两种抗凝全血和105 mmol/L枸橼酸钠抗凝血浆来测定第二聚体含量观察测试结果
1.3 统计学方法使用SPSSl3.0软件系统,两样本均数比较,用配对资料t检验。
抗凝全血和抗凝血浆检测D-二聚体两种方法T=2.8452 (P<0.01)有显著差异用105 mmol/L枸橼酸钠作为抗凝剂全血和EDTA2 k抗凝剂的全血两者比较T=0.7656(P>0.05)无显著差异。用枸橼酸钠作为抗凝剂分离血浆样本和EDTA2 k抗凝剂的全血两者比较T=2.2088(P<0.05)显著差异。见表1。
表1
ReLIA多功能免疫检测系统采用的是专利双向免疫测流技术[1]。人体纤维蛋白溶解系统,是人体最重要的抗凝系统,对保持血管壁的正常通透性,维持血液流动状态和组织修复起到极为重要的作用,纤溶系统有4个主要成分,纤溶酶原纤溶酶原激活剂(如tpa)纤溶酶和纤溶酶抑制物,当血液凝固时,纤维蛋白形成结块,tpa激活后,使纤溶酶原转化为纤溶酶,其可以溶解凝血中的纤维蛋白凝块其降解产物即各种可溶性蛋白片段组成为X-寡聚体、第二聚体、中间片段和片段E.D-二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块,因此D-二聚体与静脉血栓的诊断、肺栓塞、DIC心肌梗死及脑血栓、白血病、妊娠、组织损伤恶性实体肿瘤、外科手术以及纤溶亢进等多种疾病有着密切的关系。卡米拉,木克代斯[2],因此D-二聚体的检测对临床有着重要的辅助诊断价值。为了能够快速检测D-二聚体含量[3]。夏讯生。我们尝试用全血法来测定该项目,以便为临床快速提供参考依据。
从表中数据可以看出105 mmol/L枸橼酸钠作为抗凝剂的全血结果最低、EDTA2 k抗凝剂的全血结果高些,而用105 mmol/L枸橼酸钠抗凝血浆结果最高(其参考值范围为0-2400 ng/ml)经过统计学比较三者有统计学意义.
实验数据表明D-二聚体可以用全血法来检测,也可以用血浆来检测,但是全血法的稳定性和血浆法比较稳定性略差,特别是对于D-二聚体含量较低的样本检测结果不是很理想当低于50 ng/ml时候不能呈现良好的线性关系,这可能与全血中的有形成分的干扰有一定的关系,其正常参考范围还有待进一步的测试统计,但也是某一地域性的范围,如果作为过筛检测初步判断D-二聚体的含量便于临床快速诊断还是有很大的帮助的。
由于D-二聚体测定方法很多。崔树明[4],没有一个统一的或者说一种金方法来衡量,因此其正常参考范围也由很大区别,ReLIA法的参考范围为0-2400 ng/ml很大,而ACL9000则为0-255ng/ml两种方法无法进行比较,这也给临床诊断带来一定的差异,对于ReLIA多功能免疫检测系统测定D-二聚体是一项比较快速(<20 min)简单的检测手段,它的优势在于可以用全血来检测,免去了由于长时间离心而延迟的检测机会。尽管全血法检测D-二聚体还有待进一步的探讨,但是作为一种快速检测手段还是值得参考。
[1]瑞莱生物工程(深圳)有限公司试剂仪器使用指南.
[2]卡米拉.木克代斯D-二聚体检测的意义.血栓与止血,2009,4 (4):100-101.
[3]夏讯生,唐宁,张碧玉,等.D-二聚体两种定量检测方法的检测与评价.血栓与止血,2007,2:82-85.
[4]崔树明.《医学理论与实践》D-二聚体测定及临床应用研究进展,2011,24(8):896-898.
130011长春,一汽总医院(吉大四院)检验科