娑罗子生长期成分分析研究

李世旭，王玉静，范艳丽，孟祥磊，孟繁鑫

(山东绿叶制药有限公司，山东烟台264003)

娑罗子(Semen Aesculi)为七叶树科植物七叶树(因每一叶柄长有七片叶子而得名)Aesculus chinesis Bge.的种子［1］。味甘、性温，具有理气宽中，和胃止痛作用。用于胸腹胀闷，胃脘疼痛。娑罗子的提取物七叶皂苷钠，其主要成分是七叶皂苷A、B、C和D，具有消炎、抗肿作用［2］。我国天然野生集中连片的七叶树生长区，主要分布在陕西秦岭的西南片区，汉中略阳是七叶树生长的最佳适生区，分布最为密集，其次还有湖北的神农架和浙江天目山有少量分布。七叶树属七叶树科、落叶乔木，花白色、芳香四溢，每年5月上中旬开花，6月份开始结出果实，9月份果实开始逐步成熟。

为进一步研究娑罗子生长过程中的成分变化，以指导娑罗子采摘最佳时间的选择(其一选择成熟期果实用于种子繁殖，因可以用于育苗的种子寿命短，要求成熟且保持有一定的含水量，果皮未开裂，对采摘时间要求较为严格;其二选择成熟后的果实用于生产，利于娑罗子提取物生产的过程控制，确保其药用价值达到最佳，毒副作用最小，并保证最终产品的批与批间的一致与稳定)进行了如下研究和实验工作。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1200型高效液相色谱仪(二元泵)、AS20500A超声波清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。

1.2 试药 娑罗子:人工种植(山东绿叶制药有限公司)，人工采摘;乙醇(批号:0905110，药用级，湛江博康海洋生物有限公司);甲醇、乙腈(色谱纯 Merck Specialities Private Limited);磷酸(批号030505，分析纯，烟台三和化学试剂有限公司)。

2 样品制备

2.1 对照 用正常生产的七叶皂苷钠提取液图谱作为对照，以确定七叶皂苷 A、B、C、D、E、F的出峰时间及位置。

2.2 供试品来源 人工种植的七叶树(山东绿叶制药有限公司)，从2011年8月份开始，每间隔约5 d采摘一次，获取娑罗子样品，以采摘日期作为批号，如20110820代表2011年8月20日采摘得到的娑罗子样品。

2.3 供试品溶液制备 将娑罗子除去外壳，用锤敲碎成玉米粒大小的颗粒，取娑罗子颗粒约20 g，加入5倍体积的50% 乙醇溶液，浸泡12 ～18 h，摇匀，滤过，取滤液过0.22 μm微孔滤膜即得。

3 分析方法

3.1 色谱条件 广州菲罗门色谱柱:Kinetex C18(4.6 mm×100 mm，2.6 μm);以 0.5%磷酸溶液 － 乙腈(34∶66)为流动相进行梯度洗脱;检测波长220 nm，柱温30℃;流速为1.0 mL·min－1。理论板数按七叶皂苷 A峰计算应不低于10 000。

3.2 数据处理 基于产品质量指标的主要成分的对比与趋势分析。

4 实验结果

4.1 对照图谱 见图1。

图1 正常生产七叶皂苷钠提取液

4.2 供试品部分图谱 见图2～4。

图2 20110810

图3 20110912

图4 20111016

4.3 从图2～4中可见七叶皂苷钠含有20多种组分，色谱图中的4个主要色谱峰按出峰顺序分别为七叶皂苷A、七叶皂苷B、七叶皂苷C和七叶皂苷D，且出峰的时间和位置与对照样品相比较是一致的。

4.4 不同时期样品的HPLC图谱数据汇总，见表1。

表1 含量百分比结果

4.5 不同时期的含量百分比、七叶皂苷A/七叶皂苷B比例数据汇总，见图5、图6。

5 讨论与结论

5.1 通过对娑罗子生长过程不同阶段成分含量的检测分析，发现随着成熟期的接近，七叶皂苷A含量逐渐增加，B含量逐渐下降，七叶皂苷A/七叶皂苷B比例值呈现出一直不断增大的趋势，七叶皂苷C和D的变化不明显。

图5 娑罗子成分变化趋势图

图6 七叶皂苷钠A/七叶皂苷钠B比例

5.2 娑罗子中含量最高的成分是七叶皂苷A、七叶皂苷B，其质量标准中规定七叶皂苷A含量应大于七叶皂苷B含量，所以采摘时娑罗子中含量应为七叶皂苷A含量高于七叶皂苷B含量，故用于生产的娑罗子的采摘应在其成熟期后期(即10月份)。

5.3 用于育苗的娑罗子，考虑到保持种子水分和营养及提高育苗成活率的需要，应在9月底之前采摘较好，而不能与入药的娑罗子同时采摘。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:275.

［2］薛云丽，侯金玲，王芃，等.不同组成比例的七叶皂苷钠抗炎作用及急性毒性研究［J］.齐鲁药事，2009，28(5):305－307.