降钙素原协同C-反应蛋白和白介素-6检测对新生儿细菌感染的诊断价值

陈巧红 葛 勤 陈珊珊

广东省深圳市盐田区盐港医院检验科，广东深圳 518083

在早产儿和新生儿期，细菌感染是引起婴儿死亡的主要原因。目前各大医院采用的相关实验室指标，如血细胞计数、C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）、血清淀粉样蛋白 A、降钙素原（procalcitonin，PCT）以及 TNF-α、IL-6 等是辅助诊断新生儿细菌感染（neonatal bacterial infection，NBI）的重要指标[1]。为了增加对NBI的敏感性和阴性预测值，多种指标联合检测经常被采用。CRP是最早用来辅助诊断NBI的标记物之一，和其他指标（如白细胞计数、未成熟与总中性粒细胞）相比，CRP具有更大的参考价值。除此之外，IL-6和IL-8也常被采用[2-3]。PCT是近年研究非常热门的生物学标记物，仅需获取0.3 mL血液即可检测，因此非常适用于新生儿。有研究显示，新生儿出生18～30 h和非感染的早产儿体内PCT均增高，在分娩后48 h内，PCT均处于动态变化当中，且与感染与否无关[4-5]，此后，婴儿体内PCT水平趋于恒定[6-7]。PCT在诊断NBI中的价值依然存在争议，因此，本研究旨在探讨常规检测CRP和IL-6后联合PCT能否进一步提高对NBI的诊断水平。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2008年2月～2009年12月我院儿科收治的出生后4 d疑为细菌感染的新生儿108例为研究对象。患儿均有不同程度的临床症状或体征，如体温异常（肛温＜36.5℃或＞38℃）、喂养不耐受（呕吐或胃残留量 ＞20%喂养总体积）、心血管功能异常（如心率＜80次/min、持续心动过速、毛细血管充盈＞2 s、动脉压过低）、呼吸功能障碍（新发或加重的窒息或气促和/或需氧量增加）等。本研究开展之前与患儿家属签署知情同意书，所有操作均符合我市相关部门伦理委员会标准。

1.2 研究方法

1.2.1 检测内容 所有疑为NBI的患儿，均密切观察其临床症状和体征，并及时获取血液标本用于PCT、CRP和IL-6检测以及细菌培养。NBI的确诊根据血液、脑脊液、尿液、咽拭子细菌培养或影像学检查加以证实。血液、脑脊液、尿液细菌培养阳性判定为细菌感染。

1.2.2 PCT、CRP和 IL-6检测 PCT检测操作按照德国BRAHMS公司提供的酶联免疫法定量试剂盒操作进行，检测下限为 0.09 μg/L，＜ 0.46 μg/L 的变异系数＜ 5.5%，＜ 0.25 μg/L的变异系数＜7.5%。CRP定量检测采用颗粒增强免疫透射比浊法在全自动生化分析仪上测定，试剂购自宁波美康生物科技有限公司，检测下限为1.1 mg/L。IL-6采用ELISA检测，试剂盒购自加拿大YES生物技术有限公司，按照试剂盒操作流程由专人完成检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件分析数据，CRP、PCT和IL-6等指标采用中位数（M）表示，组间比较采用秩和检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。同时，计算CRP、IL-6、PCT以及联合检测时的特异性、敏感性、阳性预测值（positive predictive value，PPV），阴性预测值（negative predictive value，NPV），并根据接受者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）计算 PCT 的临界值。

2 结果

2.1 患儿各实验室指标检测情况

108例可疑患儿当中，最终确诊NBI 38例，非感染患儿70例。各实验室检测指标如表1所示，NBI患儿与未感染患儿相比，CRP、IL-6和PCT水平显著增高，差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。

表1 NBI患儿与非感染患儿实验室指标检测情况（M）

2.2 各指标敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值情况

单独PCT检测的敏感性和特异性分别为80.1%和74.8%，PPV为64.2%，NPV为88.5%，其敏感性高于单独CRP和IL-6检测，但特异性较低。CRP联合IL-6检测敏感性为91.7%，特异性为79.9%，PPV为70.8%，NPV为 93.9%，而PCT、CRP和IL-6三者对NBI的敏感性为98.5%，特异性为66.7%，PPV和NPV分别为58.5%和98.8%。见表2。

表2 各标记物单独或联合应用检测NBI的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值情况（%）

2.3 PCT的接受者工作特征曲线分析

根据ROC显示，当PCT达到最高敏感性和特异性时，其临界值为0.84 μg/L；根据此临界值，得出敏感性为98.2%，特异性为66.4%，PPV为61.0%，NPV为98.6%。

3 讨论

在诊断NBI时，呼吸暂停和心动过缓是两个重要的临床诊断指标，但在部分非感染患儿当中，也具有类似的敏感性。因此，这种非特异性临床症状的出现，很难判断新生儿是否感染。PCT在诊断NBI时的应用价值一直存在争议，这主要是由于在新生儿出生后3 d内其生理性变异很大[4-5]。因此，为了避免干扰，本研究选择了出生4 d后新生儿为研究对象。本研究旨在探讨对NBI而言，除了IL-6和CRP之外，额外的PCT检测能否进一步提高NBI感染诊断的准确性。研究结果发现，IL-6、CRP和PCT联合检测后，对NBI检测的敏感性和NPV几乎接近100%。

迄今为止，尚未发现理想的感染性标记物具有足够的敏感性和特异性来指导儿科医生使用抗生素。但从本文研究结果来看，联合检测PCT、IL-6和CRP可能具有重要的指导意义。PCT、IL-6和CRP的动力学不同，与CRP相比，PCT出现更早、更快，但比IL-6出现晚，峰值更宽，消退更慢。事实上，联合检测PCT后，对NBI的诊断敏感性从91.7%增加到98.5%，NPV从93.9%增加到98.8%。对于新生儿而言，尤其是早产儿，往往是细菌感染的高发人群，因此联合PCT后，敏感性的增高对及时治疗感染患儿具有重要意义。PCT联合CRP和IL-6检测后，NPV也进一步增高，因此有利于及时停止经验性治疗所使用的抗生素，这对于新生儿而言具有非常重要的意义，因为有研究显示随着抗生素使用时间的延长，坏死性小肠结肠炎的风险也大大增加。另一方面，与IL-6和CRP相比，联合PCT检测特异性和PPV有所降低，因此，对于为了降低耐药菌的出现而停止使用抗生素的行为，本研究并无指导意义。但对于新生儿高危人群和那些为了追求高敏感性而非特异性，且紧急情况的疾病而言，可能仍有一定的价值。

诊断NBI的另一个重要方面是定义指标的临界值。临界值的定义直接影响到指标的敏感性、特异性、NPV以及PPV。有报道显示，正常情况下PCT临界值在0.5～1.0 μg/L之间，但也有研究显示将其定义为2.0 μg/L或7.0 μg/L[8-9]。在本研究的最初，笔者将PCT临界值定义为0.7 μg/L，但在计算PCT最高敏感性和特异性时，其阈值为0.85 μg/L。因此，在临床工作时，必须根据实际需要调整PCT临界值以防止NBI的漏诊。

综上所述，在检测CRP和IL-6的基础上，另外对PCT的浓度加以检测，是早期诊断NBI的有益补充。由于三者联合检测的敏感性接近100%，因此，在高危新生儿人群中，对避免假阴性的诊断具有重要意义。此外，高NPV也能为临床医生停止使用抗生素提供参考。

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