HC V及其与HB V重叠感染患者血清HC VR NA检测的临床意义

夏 伟 陈 芳

1.重庆市大渡口区人民医院检验科，重庆 400084；2.四川省自贡市第三人民医院检验科，四川自贡 643020

丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病，也可经性传播和母婴垂直传播，在医院感染中经输血传播是常见原因之一[1]，其病原体为丙型肝炎病毒（HCV），属于RNA病毒。丙型肝炎慢性化率高达80%[2]，HCV慢性持续感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可进一步发展为肝硬化甚至肝细胞癌。HCV相关疾病传统的实验室检测指标为抗HCV的检测。随着分子生物学技术在临床中的推广应用，HCV RNA检测已成为实验室的常用指标，在判断丙型肝炎病毒复制与否及病情严重程度方面具有重要价值。本研究探讨了HCV相关疾病和不同感染类型中HCV RNA检测的临床意义。

1 材料与方法

1.1 标本来源

血清标本共179份，来自于2008年6月～2011年11月本院门诊及住院患者，均确诊为HCV感染。所有标本均为空腹静脉采血。其中男96例，年龄24～79岁；女83例，年龄18～77岁，包括慢性丙型肝炎101例（其中20例合并HBV感染），肝硬化45例（其中7例合并HBV感染），肝癌33例（其中4例合并HBV感染），共有31例HBV和HCV重叠感染者。同时，以60例单纯HBV感染的血清作为对照，检测HBV DNA病毒载量。

1.2 仪器、试剂及方法

1.2.1 仪器 ELX-800型酶标仪（美国BIO-TEK）、实时荧光定量基因扩增仪FTC-2000型（上海枫岭生物技术有限公司）。

1.2.2 试剂 抗HCV检测试剂盒[英科新创（厦门）科技有限公司]、HCV RNA和HBV-DNA荧光定量检测试剂盒（深圳市匹基生物工程股份有限公司）。

1.2.3 方法 抗HCV检测采用ELISA法，严格按照试剂盒说明书操作，S/CO≥1.0判为阳性。HCV RNA和HBV DNA检测采用实时荧光定量PCR检测法，严格按照试剂盒说明书操作。病毒载量≥1.0×103copies/mL判为阳性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 11.0统计软件处理数据，计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同HCV感染疾病患者抗HCV和HCV RNA的阳性率

179例HCV感染者抗HCV的总阳性率为97.8%，显著高于HCV RNA的阳性率（69.8%）（P＜0.01）。肝硬化组和肝癌组HCV RNA的阳性率分别为82.2%和84.8%，高于慢性丙型肝炎组的阳性率（64.4%）（P＜0.05）。肝硬化组和肝癌组HCV RNA的阳性率差异无统计学意义（χ2=0.95，P＞0.05）。见表1。

表1 不同HCV感染疾病患者抗-HCV和HCV RNA的阳性率[n（%）]

2.2 不同HCV感染类型患者相关指标检测结果

以60例单纯HBV感染者作为对照组。HCV与HBV重叠感染组HCV RNA的阳性率为48.4%，显著低于单纯HCV感染组的 HCV RNA阳性率（71.6%）（P＜0.05）。HCV与HBV重叠感染组的HBV DNA阳性率为35.3%，也显著低于单纯HBV感染组的阳性率（76.7%）（P＜0.01）。见表2。

表2 不同HCV感染类型相关指标检测结果[n（%）]

2.3 HCV RNA与ALT的关系

125例HCV RNA阳性病例中，ALT升高者76例，异常率为60.8%；而54例HCV RNA阴性病例中，ALT升高者19例，异常率为35.2%。HCV RNA阳性组ALT异常率高于HCV RNA 阴性组（χ2=9.934，P ＜ 0.05）。

3 讨论

HCV RNA是HCV感染的确诊标志，也是反映丙型肝炎病毒复制情况的直接可靠指标，即使在“窗口期”也可以检测出HCV RNA[3]。此外，HCV RNA定量还可用于指导临床用药，为疗效观察及预后判断提供客观指标。

本研究结果表明，179例HCV感染者抗HCV和HCV RNA的总阳性率分别为97.8%和69.8%。值得注意的是，在4例抗HCV阴性的患者中，有2例HCV RNA阳性，结合临床病史和肝功能指标分析其原因很可能是由于患者处于感染“窗口期”，抗HCV尚未出现或其血清含量低于试剂盒检测下限。另有2例患者血清抗HCV和HCV RNA均为阴性，这提示临床上存在极少数隐匿性HCV感染者，与文献[4-6]报道一致。此外，血清肝硬化组和肝癌组HCV RNA的阳性率分别为82.2%和84.8%，显著高于慢性丙型肝炎组的阳性率（64.4%）（P＜0.05），提示HCV RNA阳性率随着病情的严重程度的增加而有增高趋势。

乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒二者合并感染较为常见，感染率达0.57%[7]，但临床治疗较单一病毒感染更困难，应该引起临床重视[8]。在本研究中179例HCV感染患者中有31例合并感染HBV，而两者合并感染患者肝脏病例损伤往往比较严重，预后较差，可导致重型肝炎。本实验结果表明，HCV和HBV合并感染者血清HCV RNA和HBV DNA的阳性率均显著低于单纯HCV或HBV感染患者，可能的解释为HBV和HCV在同一宿主体内存在相互干扰和抑制作用。本研究还发现，HCV RNA阳性率和ALT异常率呈正相关，主要是由于HCV可造成肝细胞损伤而引起血清中ALT升高。

因此，对HCV感染相关的不同疾病患者联合检测抗HCV、HCV RNA和ALT，对于HCV和HBV重叠感染者同时检测HBV DNA，结合其他肝功能指标和临床症状综合分析，有助于疾病的明确诊断、病情观察及预后判断。

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