不同干燥方法百合中二氧化硫含量变化研究

徐 菲，李顺祥，周 晋，董治程，黄 丹

（1.湖南中医药大学中药现代化重点实验室，湖南 长沙 410208；2.湖南省中医药研究院中药新药研究与开发省重点实验室，湖南 长沙 410013）

百合是植物卷丹Lilium lancifolium Thunb、百合L.brownii F. E. Brown var. viridulum Baker和细叶百合Liliumm pumilum DC. 的干燥肉质鳞茎，始载于《神农本草经》，性味甘寒，具有润肺止咳、清心安神、增强机体免疫力等功效[1,2]。通过现代医药学研究，进一步证实百合具有镇咳、平喘、祛痰、助眠、抗疲劳、耐缺氧、抗癌等功效[3]。

硫熏是百合加工的传统工艺，然而随着人们对药品安全意识的增强及国内外二氧化硫残留量标准要求的提高，传统硫熏百合对人体的安全危害越来越受到人们的重视，因此对目前市场百合二氧化硫残留量的研究是十分必要的。本文采用盐酸副玫瑰苯胺法[4]对目前不同干燥工艺的百合硫残量分析，为百合的安全用药提供实验依据。

1 实验材料

1.1 一般资料

1.1.1 仪器与试剂 AE240 型电天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），FW-13粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），UV-1601紫外可见-分光光度计（日本，岛津公司）；所用试剂均为分析纯，娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）。

1.1.2 实验药材 实验百合药材为龙山地区市场购买不同百合干燥样品及自制不同干燥工艺百合样品，经湖南省中医药研究院中药研究所谢昭明教授鉴定为植物卷丹Lilium lancifolium Thunb的肉质鳞茎。

1.2 试剂的制备

四氯汞钠吸收液：称取13.6 g氯化高汞及6.0 g氯化钠，溶于水中并稀释至1 000 mL，放置过夜，过滤后备用。

氨基磺酸铵溶液（12 g/L）：称取氨基磺酸铵1.2021 g溶于水中并稀释至100 mL。

甲醛溶液（2 g/L）：吸取0.55 mL无聚合沉淀的甲醛（36%），加水稀释至100 mL，混匀。

淀粉指示剂（10 g/L）：称取1.01 g可溶性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓倾入100 mL沸水中，随加随搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。

碘溶液[c（I2）=0.100mol/L]：精密称取KI 3.5051 g，I2 1.3017 g，用水定容至100 mL，溶解完全，摇匀，即得。

硫代硫酸钠标准溶液[c（Na2S2O3·5H20）=0.100 mol/L]：精密称取2.4803 g硫代硫酸钠，水定容至100 mL，摇匀，即得。

1.3 对照品母液的制备及标定

对照品母液的制备及标定：称取0.5021 g亚硫酸氢钠，溶于200 mL四氯汞钠吸收液中，放置过夜，上清液用定量滤纸过滤备用。吸取10.0 mL亚硫酸氢钠-四氯汞钠溶液于250 mL碘量瓶中，加100 mL水，准确加入20.00 mL碘溶液（0.100mol/L）、5.0 mL冰乙酸，摇匀，放置于暗处，2 min后迅速以硫代硫酸钠标准溶液（0.100 mol/L）滴定至淡黄色，加0.5 mL淀粉指示剂，继续滴至无色。另取l00 mL水，准确加入碘溶液20.0 mL（0.1 mol/L）、5 mL冰乙酸，按同一方法做试剂空白试验，经标定后对照品母液浓度为：0.986 mg/mL。

1.4 对照品溶液的制备

精密吸取1.0 mL上述对照品母液，用四氯贡钠溶液定容至500 mL，即得浓度为1.972μL/mL对照品溶液。

1.5 供试品溶液的制备

取适当百合样品，粉碎并过40目筛，取本品约5.0 g，精密称定，以少量水润湿，置于100 mL容量瓶中，然后加入20 mL四氯汞钠吸收液，以水定容至刻度，摇匀，放置7 h，过滤后备用。

1.6 最大吸收波长选择

分别吸取2.0 mL样品溶液和2.0 mL对照品溶液于25 mL带塞比色管中，加入四氯汞钠吸收液至10 mL，然后再加入1.0 mL氨基磺酸铵溶液、1.0 mL甲醛溶液及1.0 mL盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置20 min。以空白调节零点，于波长400～800 nm处扫描，经测定后，选择其最大吸收波长576 nm处为测定波长，见图1。

图1 二氧化硫测定紫外-可见图谱

1.7 方法学考察

1.7.1 标准曲线的绘制及线性范围考察 吸取0.2、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、1.0 mL对照品溶液，分别置于25 mL带塞比色管中，加入四氯汞钠吸收液至10 mL，然后再加入1.0 mL氨基磺酸铵溶液、1.0 mL甲醛溶液及1.0 mL盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置20 min，以空白调节零点，于波长576 nm处测定A值，并以平均吸光值A为纵坐标，含量M为横坐标绘制标准曲线，y=0.0467X+0.0246，r=0.9994，在质量为0.04～19.7 μg的范围内线性较好。

1.7.2 方法学考察结果 参照《中国药典》2010年版一部方法学考察要求对二氧化硫含量测定的方法进行考察，符合定量要求，结果见表1。

表1 方法学考察结果

1.8 样品含量测定

取适当百合样品，粉碎并过40目筛，取本品约5.0 g，精密称定，以少量水润湿，置于100 mL容量瓶中，然后加入20 mL四氯汞钠吸收液，以水定容至刻度，摇匀，放置7 h，过滤后备用。

吸取供试品溶液2.0 mL，置于25 mL带塞比色管中，加入四氯汞钠吸收液至10 mL，然后再加入1.0 mL氨基磺酸铵溶液、1.0 mL甲醛溶液及1.0 mL盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置20 min，以空白调节零点，于波长576 nm处测定A值，以标准曲线法计算样品含量，结果见表2。

表2 百合中二氧化硫含量（n=3）

9 小结与讨论

本论文前期通过对有效成分的检测，发现传统晒干及晒干硫熏工艺对百合中总多糖的含量保留最大，含量集中在35%左右，而经各种干燥工艺干燥后，百合干片中总多糖含量下降，但经不同干燥工艺加工后百合干片总多糖含量相差不大，含量集中在25%左右，究其原因可能为多糖在一定温度下会解聚，引起多糖结构的改变，其中的五碳环或六碳环裂解导致多糖含量下降；而对于百合干片中总磷脂，总皂苷成分而言，所有干燥工艺与传统硫熏工艺的含量均较稳定，干燥工艺对其影响不大。

经查阅，我国食品卫生标准中规定，对于食品及药材中，二氧化硫含量的规定，国家标准为：在国内市场销售，其含量必须≤50μg/g，而出口日韩等国的标准是≤30 μg/g，从实验结果可以看出，经传统硫熏后的百合硫含量远远超标，但是龙山地区，采用礁煤及以煤为燃料供热风循环的百合干片，二氧化硫含量也远远超标含量是其他无煤工艺的45倍左右，其他无煤干燥工艺的二氧化硫含量相当并且均低于7%，由此可见，以煤为燃料，烘房热风烤制的百合干片亦存在二氧化硫超标的风险，其安全性有待考究。

[1]中华人民共和国药典2010年版(一部)[S].2010:123.

[2]童巧珍,周日宝,刘湘丹,等.药用百合鳞叶中总DNA提取方法的研究[J].中国药房,2008,(19)6:406-408.

[3]李天真.百合功能性因子的研究进展[J].食品科技,2007, (7):248-252.

[4]GB/T5009.34-2003.食品卫生检验方法理化部分(一)[S].2003:267-273.