延灯滴丸的不同配伍对灯盏乙素含量的影响

崔佰吉，张秀荣，徐晓伟 (.延边大学，吉林延吉 33000;.吉林医药学院药学院，吉林吉林 303)

延灯滴丸是由灯盏花、延胡索、黄芪提取物，加入适当比例的聚乙二醇-4000和聚乙二醇-6000制成的滴丸，具有活血化瘀、通经活络、散寒解表、祛风除湿等功效，主要用于治疗冠心病、心绞痛等缺血性心血管疾病。中药复方制剂成分复杂，在提取过程中处方中有效成分往往会发生变化。本实验选取主要效标物质之一灯盏乙素的提取量作为指标，考察其不同配伍条件下的变化规律。

1 仪器与试药

日本岛津LC-20AT高效液相色谱(HPLC)仪，二极管阵列检测器(DAD);CAP225D电子天平(Sartorius);HWZ-2B微波真空干燥器(广州兴兴微波能设备有限公司)。

乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯化水，其他试剂为分析纯。灯盏乙素对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号为:1108422200605。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Agilent TC-2 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(三乙胺调节pH 3.0)，梯度洗脱(0→15→25→45→55→75 min，10%→10%→22%→22%→50%→50%乙腈);流速:0.8 mL/min;检测波长:335 nm;柱温:40 ℃;进样量:20 μL［1］。

2.2 供试品溶液制备

按处方量精密量取各药材置于500 mL原底烧瓶中，加入10倍量的60%乙醇加热回流提取3 h，提取3次，提取液合并、浓缩、干燥，得提取物干膏粉末。精密称取各处方项下提取物粉末0.2 g，置50 mL具塞三角瓶中，精密加入25 mL甲醇，称定重量，超声(250 W，40 kHz)处理30 min，放至室温，称定重量，并用甲醇补足减失重量，微孔滤膜过滤，即得。

2.3 处方中各药材共煎相互影响实验

延灯滴丸原处方为:灯盏细辛-黄芪-延胡索(12∶10∶9)，分别采用不同的实验方案(见表1～3)，以每克灯盏花所提取出的灯盏乙素的量(mg/g)作为评价指标，观察不同提取方案下灯盏乙素的含量变化规律。

各实验方案出膏率及灯盏乙素含量分别见表1～3，方中药材用量放大和缩小不同倍数，其灯盏乙素的含量变化情况见图1，由各个实验方案数据分析可知，固定处方中3种药材的任何一种，配比倍数对灯盏乙素的提取量都有一定的影响，但没有呈现明显的有规律变化。

表1 灯盏花剂量固定时灯盏乙素的含量变化

表2 黄芪剂量固定时灯盏乙素的含量变化

表3 延胡索剂量固定时灯盏乙素的含量变化

2.4 混料均匀设计

为考察方中各组分变化对灯盏乙素含量变化的影响，采用混料均匀设计进行实验，混料均匀设计方案、药材组合及灯盏乙素含量见表4［2］。

数据经过DPS9.50数据处理系统进行逐步回归，得回归方程为:Y=7.171 211 58+2.670 314 346 9X1+2.889 486 924 9X3，其偏相关系数见表5。由回归方程可知，灯盏乙素提取量的变化与灯盏花和黄芪的量成正相关，且灯盏花影响较黄芪大，这与灯盏花本身用量增加的结果是相关的，但二者显著性均不明显;而灯盏乙素提取量的变化与延胡索没有表现出相关性。

表4 混料均匀设计的方案及药材配比组合(n=3)

表5 各项系数进行偏相关分析结果

3 讨论

黄芪药材固定时，主要表现延胡索药材对灯盏乙素提取量的影响，结果表明原处方配比情况下灯盏乙素提取量最大，而在0.75倍时提取量达到最小。延胡索药材固定时，主要表现黄芪药材对灯盏乙素的提取量的影响，结果表明黄芪药材的变化对灯盏乙素提取量的影响比较缓慢，在原处方时提取量最小。而固定灯盏花药材时，延胡索和黄芪药材对灯盏乙素提取量的综合影响较大，但没有发现可控的规律性。鉴于以上的研究结果，对于原处方的评价着重放在药理实验研究上，根据各个处方与药理效应的相关性来判定处方的配比情况。

研究中发现本方的出膏率较高，相对于一般的中药材提取出膏率有很大的提高，其原因之一是提取方法采用3 h提取3次的方法，使提取尽可能进行的完全;另一个原因考虑是黄芪本身含有大量多糖，提取溶剂为60%乙醇溶液，提取过程中有大量的多糖被提取。经过初步药理研究已经证明，本方中灯盏乙素的含量与药理效应有明显的正相关性，但是方中黄芪量的变化与灯盏乙素量变化的规律与药理作用上有没有存在差异，还是目前正在进行的研究。

［1］崔佰吉，王丽娜，李亚薇，等.HPLC法测定延灯滴丸中有效成分含量的方法学研究［J］.药物分析杂志，2009，29(10):1672-1676.

［2］冯开泰，马长兴.正交与均匀试验设计［M］.北京:科学出版社，2001:144-152.