小麦日粮添加不同非淀粉多糖酶制剂对4～9 W青年蛋鸡生产性能、免疫功能及粗蛋白消化率的影响

李 勇 孟艳莉 白修云 张甦寅 郑红松 刘旭明

(1.国家蛋品工程技术研究中心，北京 102115；2.北京德青源农业科技股份有限公司，北京102115)

玉米和小麦是动物饲料原料中两种主要的能量饲料。欧洲是小麦主产区，在欧洲动物日粮较多用小麦型日粮。在我国玉米和小麦同属主产作物，但是由于玉米价格长期低于小麦，因而在我国玉米成为动物日粮中的主要能量饲料原料。但是，自2010年3月份以来，玉米和小麦价格出现倒挂，小麦价格开始低于玉米，同时由于小麦中粗蛋白含量较高，在动物日粮中应用能够较大程度地降低动物养殖成本，因而近来，小麦型日粮开始广泛应用。小麦与玉米虽然都属能量饲料，但是小麦中富含抗营养因子——可溶性非淀粉多糖，研究显示，其在动物肠道遇水后导致食糜变黏，进而能够阻碍营养物质的消化吸收，降低营养物质的消化率（Petersen 等，1999；Karimi等，2007），影响肠道黏膜结构及微生物种类与数量，甚至能够影响动物免疫功能(王金全等,2005；丁雪梅等,2009),为此使用小麦作为动物日粮能量饲料时，通常需要添加非淀粉多糖酶制剂以降低非淀粉多糖的抗营养作用。然而,目前市场上非淀粉多糖酶制剂种类较多,质量参差不齐,因此,为了了解目前市场上主要酶制剂产品的效果,同时也为了筛选一种效果较好的酶制剂产品，本试验选择行业内具有较大影响力的7家公司的小麦专用酶制剂产品,研究了小麦日粮添加不同酶制剂产品对4～9周龄蛋鸡生产性能、免疫功能及营养物质消化率的影响,旨在为蛋鸡生产中小麦日粮的应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 酶制剂产品

A、B、C、D、E、F、G 7 种酶制剂产品分别来自于 7家不同酶制剂公司，其中A、B、C、D为国产酶制剂产品，E、F、G为进口酶制剂产品，酶制剂添加量按照各公司推荐量添加，分别为 200、200、200、200、200、100、250 g/t。

1.2 试验动物与分组

选择体重相近的21日龄海兰褐青年蛋鸡1 120只，随机分为8个处理，每个处理7个重复，每个重复20只鸡。其中对照组蛋鸡饲喂玉米-豆粕型基础日粮，7个试验组蛋鸡分别饲喂小麦型基础日粮+不同酶制剂产品的试验日粮，酶制剂添加量参考各酶制剂供应商推荐添加量。试验周期为6周。

1.3 日粮配制

按照海兰育种公司推荐的饲养标准分别配制4～6周和7～9周海兰青年蛋鸡玉米-豆粕型日粮和小麦型基础日粮。小麦型基础日粮中,小麦添加比例为70%,具体日粮组成及营养水平见表1。

表1 日粮组成及营养水平

1.4 饲养管理

蛋鸡饲养试验在北京市延庆县张山营镇北京德青源生态园试验鸡场进行，蛋鸡采用三层全重叠笼养方式全封闭饲养，舍内配置风机、湿帘及自动清粪设备，饲养期间蛋鸡自由采食和饮水，其它饲养管理及免疫程序按照海兰育种公司推荐的常规饲养管理程序及免疫程序进行。

1.5 样品采集与指标测定

1.5.1 生产性能指标测定

分别于蛋鸡 21、28、35、42、49、56、63 日龄早 8:00，以重复为单位对鸡只进行空腹称重，同时记录鸡只采食量，计算鸡只平均体重、日增重、日采食量及料重比。

1.5.2 免疫功能指标测定

分别于蛋鸡35、49、63日龄早8:00，每个重复选取试鸡2只，翅下静脉采血2 ml促凝制备血清，-20℃保存，待测新城疫、禽流感H5-4及H9抗体滴度，抗体滴度采用血红细胞凝集抑制试验测定；另外，于63日龄早8:00，每个重复选取试鸡2只，采血2 ml抗凝制备全血，4 h内分离T淋巴细胞培养，测定T淋巴细胞转化率，具体测定方法参考刘永祥等（2012）方法。具体如下：将100 μl淋巴细胞悬液加入96孔细胞培养板，再加入含丝裂原伴刀豆球蛋白（ConA，终浓度45 μg/ml）,对照组则加等体积的不含丝裂原的培养液,培养体系每孔共200 μl，3个重复。于 5%CO2、37 ℃条件下培养68 h。在培养结束后，每孔加入20 μl CCK溶液，继续培养2 h。之后用酶标仪于420 nm波长下测定OD值。

1.5.3 粗蛋白消化率测定

消化试验于蛋鸡57日龄开始进行，预试3 d，正试4 d。粗蛋白消化率采用TiO2作为外源指示剂的方法测定。试验日粮中TiO2的添加量为0.4%。正试期前禁饲12 h，以尽可能排空鸡只肠道食糜。粪样收集于蛋鸡60、61、62、63日龄早8:00以重复为单位进行，粪样采用活动粪盘垫塑料布的方法收集，具体如下：取出粪盘后先喷洒10%稀HCl，之后以重复为单位混匀粪样，并按一定比例取样，期间拣出羽毛废料等杂物,4 d收集的粪样混合均匀后，于65℃烘干制备风干样，待测TiO2及粗蛋白含量等指标。TiO2测定参考邓雪娟等（2008）方法，粗蛋白含量采用凯氏定氮仪测定。粗蛋白消化率计算公式如下：

粗蛋白消化率(%)=[1-（日粮TiO2含量×粪粗蛋白含量）/(粪 TiO2含量×日粮粗蛋白含量)]×100。

1.6 数据统计

利用统计软件SPSS16.0中One-Way ANOVA模块对试验数据进行单因素方差分析,数据以“Mean±SE”表示，显著水平设为P＜0.05。

2 结果

2.1 不同酶制剂产品对青年蛋鸡生产性能的影响（见表2）

表2 不同酶制剂产品对蛋雏鸡生产性能的影响

由表2可知，对照组及各酶制剂添加组青年蛋鸡4～6周龄及7～9周龄平均体重、日增重、日耗料量及料重比均无显著差异(P＞0.05)。

2.2 不同酶制剂产品对青年蛋鸡免疫功能的影响（见表 3、表 4）

由表3可知，对照组及不同酶制剂添加组青年蛋鸡5、7及9周龄末的ND、禽流感H5-4及H9抗体水平均无显著差异（P＞0.05）。由表4可知，对照组及不同酶制剂添加组青年蛋鸡9周龄末外周血液T淋巴细胞转化率无显著差异（P＞0.05）。

2.3 不同酶制剂产品对青年蛋鸡小麦型日粮粗蛋白消化率的影响（见表5）

由表5可知，对照组及酶制剂添加组之间青年蛋鸡日粮粗蛋白消化率存在显著差异，其中，A酶制剂组青年蛋鸡日粮粗蛋白消化率显著低于对照组粗蛋白消化率（P＜0.05），而其它各组与对照组相比青年蛋鸡日粮粗蛋白消化率无显著差异（P＞0.05）；不同酶制剂组之间，D、E、F酶制剂组日粮粗蛋白消化率无显著差异（P＞0.05），D和E酶制剂组日粮粗蛋白消化率显著高于A、B、C、G酶制剂组（P＜0.05），B、C、F、G 酶制剂组间粗蛋白消化率无显著差异（P＞0.05），而F、G组粗蛋白消化率显著高于A组（P＜0.05），A、B、C 酶制剂组间粗蛋白消化率无显著差异（P＞0.05）。

表3 不同酶制剂产品对青年蛋鸡抗体水平的影响

表4 不同酶制剂产品对9周龄末蛋鸡外周

血液T淋巴细胞转化率(SI)的影响(%)

表5 不同酶制剂产品对蛋鸡日粮粗蛋白消化率的影响(%)

3 讨论

尽管小麦在动物日粮中的应用目前已有较多的研究，然而由于小麦在动物日粮中的应用效果受多种因素的影响，如动物种类、品种、年龄、健康状况、饲养环境及酶制剂质量等，为了确定市场上主要小麦酶制剂产品的应用效果,本试验以4～9周海兰褐青年蛋鸡为研究对象，研究了小麦添加70%，同时添加不同酶制剂产品对青年蛋鸡生长性能、免疫功能及日粮粗蛋白消化率的影响，旨在为小麦在青年蛋鸡日粮中应用奠定理论基础。

3.1 不同酶制剂产品对青年蛋鸡生产性能的影响

玉米、小麦在动物饲料中同属能量饲料，较多的研究表明，在使用酶制剂的前提下利用小麦替代玉米作为动物日粮的能量来源，不仅能够使动物生长性能达到与饲喂玉米同样的效果，甚至能超过使用玉米作为能量来源的日粮的饲喂效果。何艳平等(2006)、孙永刚等（2010）在肉仔鸡上的研究均表明，小麦日粮添加木聚糖酶后，其在生产性能方面的效果超过了玉米-豆粕型日粮的饲喂效果。王继强等（2004）在蛋鸡上的研究也表明，日粮中小麦添加量达到70%，在使用酶制剂的条件下，饲喂小麦日粮蛋鸡的生产性能等于甚至高于玉米对照组蛋鸡的生产性能。本试验在4～9周龄海兰褐青年蛋鸡上的研究结果显示，日粮中小麦添加量达到70%，几乎完全替代玉米，同时使用7种公司小麦专用酶制剂产品，按照推荐量添加，饲喂小麦日粮蛋鸡的体重、日增重、日耗料量及料重比指标均与饲喂玉米-豆粕型日粮蛋鸡的各项指标无显著差异，一方面表明在使用酶制剂的前提下，小麦日粮可以达到与玉米-豆粕型日粮同样的饲喂效果，而且小麦几乎可以完全替代玉米；另一方面也表明，国产小麦酶制剂在蛋鸡小麦日粮上应用的促生长效果与进口酶制剂的应用效果没有差异。

3.2 不同酶制剂产品对青年蛋鸡免疫功能的影响

玉米中富含亚油酸,许多研究显示,亚油酸能够增强动物机体免疫功能(刘永祥等,2012；赵占宇等,2009；赖长华等，2004)，而小麦中亚油酸含量极少，因此小麦替代玉米，有可能对动物免疫功能产生不利影响，基于此，本试验研究了小麦替代玉米对青年蛋鸡免疫功能的影响。动物机体特异性免疫在动物免疫功能上具有极其重要的意义，能够直接反映动物机体的免疫功能。而动物特异性免疫主要包括两个方面，一方面是动物特异性体液免疫，可以通过检测血清抗体免疫水平来反映，另一方面是动物特异性细胞免疫，可以通过检测动物外周血液T淋巴细胞转化率来反映。本试验分别研究了小麦日粮对海兰褐青年蛋鸡的抗体水平和T淋巴细胞转化率产生的影响,结果显示,小麦日粮添加酶制剂与玉米-豆粕型日粮相比，对海兰褐青年蛋鸡 5、7、9周龄末 ND、H5-4、H9抗体水平及 9周龄末外周血T淋巴细胞转化率均无显著影响。这一结果与前人研究结果不尽一致。王金全等（2005）、丁雪梅等（2009）在肉仔鸡上的研究结果显示，小麦日粮添加酶制剂能使肉鸡免疫功能优于玉米对照组肉鸡免疫功能，分析可能是由于酶制剂提高了动物营养物质消化率进而改善了动物免疫功能，而本试验结果并未显示小麦日粮添加酶制剂与玉米对照组相比能够提高蛋鸡免疫功能，但是结果表明，与对照组相比，使用酶制剂条件下，小麦日粮对蛋鸡免疫功能无不利影响。之所以造成与王金全等（2005）、丁雪梅等（2009）研究结果不完全一致，分析原因可能是由于本试验中蛋鸡在新建鸡舍中饲养，同时完善的风机、湿帘及自动清粪等环控设备保证了蛋鸡生长在良好的饲养环境中，因此未能完全体现出酶制剂的使用效果所致。

3.3 不同酶制剂产品对青年蛋鸡日粮粗蛋白消化率的影响

目前，市场上所使用的小麦日粮专用酶制剂多为复合型酶制剂，除了含有能消除非淀粉多糖的主要酶制剂木聚糖酶成分外，多数还包括了蛋白酶、淀粉酶甚至甘露聚糖酶等酶制剂，因此，小麦日粮中添加酶制剂提高日粮营养成分消化率的功能大大增强，本研究结果显示，除A酶制剂外，其余6种酶制剂使小麦日粮粗蛋白消化率达到甚至超过了对照组日粮粗蛋白消化率，上述结果表明，除A酶制剂外，其它6种酶制剂均能消除小麦中非淀粉多糖造成的肠道食糜变黏，进而阻止营养物质在肠道内消化的不利影响。这一结果也与多数研究报道的结果一致，如王金全等(2005)、王永伟等(2010)分别报道小麦日粮添加木聚糖酶能够提高日粮粗蛋白和能量的表观消化率。本试验中A酶制剂组蛋鸡日粮粗蛋白消化率未达到与对照组同样的水平可能与其包含的成分有关。另外，尽管研究结果显示与对照组相比，D和E两种酶制剂提高了小麦日粮粗蛋白消化率，但并未最终提高蛋鸡生产性能，分析可能与两方面原因有关，一方面与消化吸收后营养物质的代谢效率有关；另一方面也与本试验良好的饲养环境及鸡群健康状况有关。

4 小结

本试验研究了小麦替代玉米，同时使用7家公司不同的小麦专用酶制剂产品对4～9周龄海兰褐青年蛋鸡生产性能、免疫功能及日粮粗蛋白消化率的影响，结果表明，日粮中70%添加小麦同时使用酶制剂能够达到与玉米-豆粕型日粮几乎同样的饲喂效果；另外，7种酶制剂产品中，就对青年蛋鸡生产性能及免疫功能影响效果而言，A、B、C、D 4种国产酶制剂与E、F、G 3种进口酶制剂效果无显著差异，就日粮粗蛋白消化率而言，B、C国产酶制剂和F、G进口酶制剂无显著差异，D国产酶制剂和E进口酶制剂无显著差异，表明国产小麦专用酶制剂基本能达到与进口酶制剂相同的使用效果。

[1]Karimi A,Bedford M,Kamyab A,et al.Comparative effects of xylanase supplementation on broiler,broiler breeder and layer chick performance and feed utilization on wheat based diet[J].The Journal of Poultry Science,2007,44:322-329.

[2]Petersen S T,Wiseman J,Bedford M R.Effect of age and diet on viscosity of intestinal contents in broiler chicks[J].British Poultry Science,1999,40:364-370.

[3]王金全,蔡辉益,陈宝江,等.小麦日粮中添加木聚糖酶对肉仔鸡生产性能、免疫、消化器官发育和血液代谢激素水平的影响[J].河北农业大学学报,2005,28(1):73-76.

[4]丁雪梅,张克英.小麦-豆粕型日粮添加木聚糖酶对艾维茵肉鸡免疫指标、肠道形态和微生物菌群的影响[J].动物营养学报,2009,21(6):931-937.

[5]刘永祥,刘艳丽,徐秋良,等.饲粮添加共轭亚油酸对肉仔鸡肠道黏膜免疫反应的影响[J].动物营养学报,2012,24(1):124-130.

[6]邓雪娟,刘国华,蔡辉益,等.分光光度计法测定家禽饲料和食糜中二氧化钛[J].饲料工业,2008,29(2):57-58.

[7]何艳平,孟晓玲,刘来亭.小麦型日粮中添加酶制剂替代玉米型日粮对肉鸡生长性能的影响[J].中国饲料添加剂,2006(6):28-32.

[8]孙永刚,亢娟娟,杜思刚,等.不同营养水平小麦日粮添加木聚糖酶对肉鸡生长性能和血液生化指标的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2010（2）:78-79.

[9]王继强,张波,刘福柱.小麦基础日粮中添加酶制剂对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响[J].中国饲料,2004(21):5-10.

[10]赵占宇,吴天星,唐宏刚,等.共轭亚油酸对大黄鱼生长和免疫指标的影响[J].动物营养学报,2009(2):205-211.

[11]赖长华,尹靖东,李德发,等.共轭亚油酸对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响[J].中国畜牧杂志,2004(12):9-12.

[12]王永伟,刘国华,汝应俊,等.添加木聚糖酶的小麦型日粮对肉仔鸡表观代谢能的影响[J].饲料工业,2010,31（22）:8-11.