卵巢肿瘤细胞体外药物敏感试验临床应用价值

张金波，肖雁冰，王玉莹，王少军

(遵义医学院附属医院妇产科，贵州 遵义 563099)

卵巢癌是妇科常见肿瘤之一，临床症状隐匿，发现时多为晚期，预后不良，5年生存率不足50%［1］。术后化疗已为常规治疗，因患者个体差异，同种组织学类型及相同分化程度的卵巢癌患者，其化疗敏感谱亦不尽相同，甚至可能存在原发耐药［2］。常规选用卵巢癌一线化疗方案(顺铂+紫杉醇)，则可能选用耐药药物。ATP－TCA(adenosine triphosphate－tumor chemosensitivity assay)可筛选出相对最敏感化疗方案，该实验仅需4～5 d。在卵巢上皮癌患者中增加ATP－TCA检测，其平均成本并不增加［3］。本研究回顾性分析了遵义医学院附属医院妇科2011年6月1日至2012年9月1日住院的晚期卵巢上皮癌患者，对照分析两者近期化疗疗效。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院妇科住院的晚期卵巢上皮癌患者20例，行肿瘤细胞减灭术后，取卵巢癌新鲜活组织行ATP－TCA检测，根据药敏实验结果选取敏感化疗方案化疗为实验组共9例;选取同期卵巢癌患者行肿瘤细胞减灭术，术后采取卵巢上皮癌化疗的一线方案(顺铂+紫杉醇)化疗为对照组共11例;两组均在首次化疗一疗程前后检测癌抗原125(CA－125)，比较其疗效，两组术后病理结果均提示为:卵巢上皮癌。

1.2 试剂、仪器及方法 ATP－TCA检测试剂盒为北京金紫晶生物医药技术有限公司产品，BHP9 504－02型微弱光分析仪购自北京滨松光子技术股份有限公司。将切除的新鲜卵巢上皮癌组织立即(10～20min)送至肿瘤药敏检测实验室，严格依照试剂盒说明书所述方法进行ATP－TCA检测。本研究ATP－TCA检测由遵义医学院附属医院细胞工程重点实验室完成。

1.3 临床近期疗效评价 临床近期疗效主要参考Rustin GJ［4］的评价标准:治疗前1周内血清CA125异常升高的患者，术后CA125转阴为完全缓解(CR);降低＞50%为部分缓解(PR);降低＜50%或增高 ＜25%为稳定(SD);增高 ＞25%为进展(PD)。

1.4 统计学分析 临床近期疗效为等级资料，差异比较用SPSS13.0统计软件进行秩和检验，检验水准为 0.05。

ATP－TCA化疗药物方案:①顺铂;②卡铂;③紫杉醇+顺铂;④环磷酰胺+顺铂;⑤环磷酰胺+顺铂+阿霉素;⑥紫杉醇;⑦环磷酰胺;⑧阿霉素。

2 结果

实验组ATP－TCA检测结果(见表1)。

实验组临床近期疗效好于对照组(Z=－3.636，P ＜0.001)，(见表2)。

表1 9例卵巢癌ATP－TCA化疗药物敏感性强弱排列顺序

表2 两组临床近期疗效

3 讨论

该技术自诞生并应用于临床已有20多年的历史，最先用于卵巢肿瘤细胞药敏检测，目前多学科应用该技术，如乳腺癌、肝癌、胃肠道恶性肿瘤也在使用该技术，其疗效有待进一步评估认识，针对不同组织来源，不同细胞类型的肿瘤来说需根据具体的实验疗效进一步改进、提高。医生可以在了解癌症患者药物敏感和耐药谱的基础上有针对性的选择药物，为临床制定化疗方案提供直接、客观的依据，提高了化疗用药的针对性、有效性、科学性以及癌症病人的预后。自ATP－TCA技术诞生并应用于检测卵巢癌化疗敏感性以来，大量实验结果说明:在评估细胞活力方面，ATP－TCA检测法比软琼脂集落形成实验和四唑蓝比色法(MTT)具有更高的敏感度和特异度［5］。ATP－TCA针对卵巢上皮癌是目前较为理想的体外药敏检测方法，其通过测定体外肿瘤细胞内源性ATP所产生的荧光强度，根据化疗药物不同浓度对体外培养肿瘤细胞的不同抑制率，绘制出化疗药物剂量－抑制曲线，比较各化疗方案化疗药物对体外肿瘤细胞敏感度，选择相对最敏感的方案用于指导临床化疗，是目前指导卵巢上皮癌化疗的最佳方法。

卵巢肿瘤细胞药敏指导临床治疗其技术已基本成熟，恶性肿瘤的化疗是经典治疗方法之一，已成为肿瘤术后的常规治疗，由于肿瘤对化疗药物的敏感性存在个体差异，以及肿瘤细胞具有多重耐药性(原、继发性)，导致相同药对同一细胞、组织病理类型患者的治疗效果不同。本研究实验组中9例有4例对卡铂、5例对紫杉醇原发耐药，但对顺铂联合紫杉醇有5例敏感，2例中度敏感，仅有1例对顺铂+紫杉醇原发耐药，由此可见，对某一种药物耐药并不一定对该药联合其他药物存在耐药，联合化疗较单药化疗疗效优越，在一定程度上可能避免或延迟耐药产生，由此ATP－TCA检测更具有必要性。本研究中实验组与对照组通过检测术后CA125评价近期疗效，ATP－TCA指导临床化疗组结果明显优于对照组(Z=－3.636，P＜0.001)，ATP－TCA指导晚期卵巢上皮癌化疗与疗效具有良好的相关性，具有很好的临床应用价值。

不正确的治疗会伤及机体的免疫功能和降低体能导致治疗的失败:患者术后错失最佳化疗时期，不敏感化疗药物治疗过程中可能诱导肿瘤耐药和高度不敏感药物的产生，甚至可能使肿瘤细胞加速转移，增加二次手术几率，增加患者的痛苦及医疗负担，针对患者最合理的治疗方案未得到应用，浪费了宝贵的医疗资源，最终影响患者的晚期生活质量，降低患者生存率。因此，如何提高化疗用药的针对性和有效性从而实现针对性较强的个体化治疗是多年来国际上肿瘤研究领域的重要课题之一，ATP－TCA指导卵巢上皮癌临床化疗具有积极意义。根据其实验原理，推而广之，除卵巢上皮癌可使用该技术指导临床化疗，其他类型的卵巢癌，以及妇科恶性肿瘤，甚至其他组织器官的各类恶性肿瘤均可以使用该技术做为临床指导。

总之，ATP－TCA检测结果与卵巢癌的临床治疗疗效有很好的相关性，ATP－TCA是一种有效的筛选卵巢上皮癌个体化化疗药物的体外检测方法，对临床化疗具有正向指导作用，甚至可以向妇科其他组织学类型的晚期恶性卵巢肿瘤推广，使晚期卵巢癌得到更恰当的治疗，改善预后。

［1］Kris M G，Benowitz S I，Adams S，et al.Clinical cancer advances 2010:Annual report on progress against cancer from the american society of clinical oncology［J］.J Clin Onco，2010，28(36):5327.

［2］Liu J，Matulonis U A.New advances in ovarian cancer［J］.Oncology，2010，24(8):721.

［3］常青云，张伟，李艳芬，等.三磷酸腺苷－肿瘤体外药敏检测在晚期卵巢上皮癌化疗中的成本－效果评价［J］.癌症进展，2011，9(2):191.

［4］Rustin G J，Quinn M，Thigpen T，et al.Re:New guidelines to evaluate the response to treatment in solid tumors(ovarian cancer)［J］.J Natl Cancer Inst，2004，96(6):487.

［5］田海梅，石晓燕，傅军，等.ATP抗肿瘤药物敏感性检测技术与卵巢癌临床治疗的相关性研究［J］.中华肿瘤杂志，2005，27:296 －298.