原发性肝癌患者血清HBV标志物和HBV DNA测定的临床意义

邓庆梅 高 勇 何皖伟 许 庆 刘 毅

原发性肝癌（PHC）是我国常见恶性肿瘤之一，生存期短，病死率高。研究表明[1]，乙型肝炎病毒（HBV）感染是原发性肝癌的主要病因。肝癌的发生、发展与HBV感染高度相关，HBV DNA整合的发现更进一步从分子水平上强化了PHC与HBV感染的关系[2]。 前瞻性研究认为，HBeAg阳性是肝癌发生的危险因素[3]。在肝癌患者，往往血清抗HBe阳性[4]。为了进一步了解PHC与HBV感染的关系，我们对151例PHC患者血清HBV标记物和HBV DNA载量进行了检测分析，现将结果报道如下。

资料与方法

一、一般资料 收集阜阳市第二人民医院2010年 1月至 2011年 1月首次住院治疗的 PHC患者 151例，男131例，女20例，年龄 37～70岁，平均年龄53.7±8.8岁。诊断均符合2001年中国抗癌协会肝癌专业委员会修订的PHC诊断标准[5]。选择同期住院的慢性乙型肝炎患者132例（男106例，女26例，年龄20～84岁，平均年龄41.2±12.1岁）和乙型肝炎肝硬化患者140例（男102例，女38例，年龄28～73岁，平均年龄50.8±9.3岁）为对照组。后者诊断符合 2000年西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》的标准[6]。所有病例均未曾进行任何抗病毒治疗。

二、检测方法 采用化学发光法检测HBV血清标志物（雅培公司）；采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量（杭州艾康生物技术有限公司）。

三、统计方法 血清HBV DNA以lg拷贝/毫升为单位，用表示。多样本均数的比较采用方差分析，各样本间的两两比较采用SNK法，计数资料多个独立样本率的比较用x2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义（多个样本率间的多重比较，其修正检验水准为P＜0.0125）。

结果

一、151例PHC患者HBV血清学模式与HBV DNA水平的关系 见表1。

表1 不同HBV血清学模式患者HBV DNA水平（）比较

表1 不同HBV血清学模式患者HBV DNA水平（）比较

与 3组比，①P＜0.05

HBV血清学模式 例数1 HBsAg/HBeAg/抗-HBc阳性 38 2 HBsAg/抗-HBe和抗-HBc阳性 90 3 HBsAg/抗-HBc阳性 6 4 HBsAg/HBeAg/抗-HBe/抗-HBc阳性 1 5 抗-HBs/抗-HBc阳性 3 6 抗-HBs/抗-HBe/抗-HBc阳性 5 7 抗-HBe/抗-HBc阳性 2 8 抗-HBc阳性 2 9 全部阴性 4合计 151阳性（%） HBV DNA（lg拷贝/毫升）38（100.0）① 6.4±0.9①69（76.7） 5.1±0.9 4（66.7） 5.9±0.5 1（100.0） 5.3 1（33.3） 3.9 0（0.0） -0（0.0） -0（0.0） -0（0.0） -

二、不同肝病患者血清HBV标志物分布及其HBV DNA水平比较 见表2。

表2 不同肝病患者血清HBV标志物分布（%）及其HBV DNA水平（）比较

表2 不同肝病患者血清HBV标志物分布（%）及其HBV DNA水平（）比较

/HBcAb阳性 其 他 HBV DNA（lg copies/ml）肝癌 151 38（25.2） 90（59.6） 6（4.0） 16（10.6） 5.6±1.1肝硬化 140 58（41.4） 77（55.0） 4（2.9） 1（0.7） 6.2±1.2乙型肝炎 132 86（65.2） 43（32.6） 3（2.3） 0（0.0） 6.7±1.4例数 HBsAg/HBeAg/HBcAb阳性HBsAg/HBeAb/HBcAb阳性HBsAg

讨论

HBV携带者可发展为肝硬化，其中1%～5%可演变为肝细胞癌[7]。在本组151例肝癌患者中，有147例（97.5%）乙型肝炎病毒标记物阳性。HBV感染已成为肝癌发生的主要致癌因素，与陈帆等[8，9]报道结果相近。随着HBeAg阳性率的降低以及抗-HBe阳性率的逐渐升高，即从HBeAg至抗-HBe的自发血清转换，肝脏的病变没有静止，反而逐渐加重，而且癌变的发生率也逐渐增加。有学者认为，HBeAg是一个免疫耐受因子[4]，它的缺失将导致免疫耐受被破坏，从而诱导炎症活动;HBeAg又是细胞毒性T细胞的靶抗原，在肝细胞膜上HBeAg的缺失，会使变异株逃避宿主免疫的清除，使感染得以继续存在。在组织再生时，这部分肝细胞膜上HBeAg缺失的肝细胞可大量增生，使肝脏的纤维化程度逐渐加重，并且发生癌变的危险性增加。

慢性乙型肝炎发生HBeAg自发血清学转换的确切机制目前仍不清楚，乙型肝炎病毒前C区变异可发生在HBeAg自发血清学转换之前、之中或之后，但前C区的变异不是 HBeAg自发血清学转换的必须条件[10]。这与使用干扰素等抗病毒药物治疗后出现的HBeAg血清学转换有着本质的不同，前者可能与长期受到机体的免疫压力，HBV相继发生HBV前C区或基本核心区启动子双变异有关，而后者是基于药物的抗病毒效应，使病毒载量下降，抗原阴转。

本研究显示绝大多数肝癌的发生不仅与HBV感染高度相关，尤其与乙型肝炎病毒复制密切相关，与梁丽[7]等报道原发性肝癌患者HBV DNA检出率为76.4%相近。PHC患者血清HBV DNA水平不是很高的原因有：（1）在慢性肝炎发展到肝硬化和肝细胞癌过程中，HBV复制有一个从高到低的过程，免疫清除过程使病毒载量减少，同时可使肝细胞受损；（2）血清HBV DNA反映的是血清游离的HBV DNA，不能反映肝细胞中HBV的整合状态。另外，肝细胞癌大部分在肝硬化的基础上发生，肝纤维化的发生使病毒载量也不高[12]。国内有学者用分子杂交方法检测HBV DNA，发现持续抗-HBe阳性者更易发生HBV DNA基因整合现象。有资料证实，原发性肝癌患者HBV DNA整合率可达 90.5%，而整合的HBV DNA更易诱发原发性肝癌[13]。HBV导致肝细胞癌的发生机制可能有：（1）HBV的活动性复制能直接使致癌机制启动和恶性转化，增加病毒DNA插入原癌基因中或其附近、插入肿瘤抑制基因中或其附近或插入细胞DNA调节成分中或其附近；（2）病毒DNA整合可增加反式激活因子蛋白的产生，该蛋白能诱导肝细胞的恶性转化，它还能与p53肿瘤抑制基因结合并干扰其功能；（3）HBV还可通过引起慢性坏死性肝病间接诱发肝细胞癌变，使慢性坏死性炎症过程中产生的致突变活性氧族诱导细胞恶性转化[14～16]。

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