益母草颗粒工艺改进及质量标准提高的研究

郑艳春 李 君 崔雅慧 李俊芳 董海荣 朱 磊

承德颈复康药业集团有限公司，河北省中药新辅料工程技术研究中心，河北承德 067000

益母草颗粒现收载于《中国药典》2010年版一部，为妇科经产之要药，主要用于经闭、痛经、产后瘀血、腹痛等妇科疾病[1]。现在市面上规格是每袋装15 g，由于服用量相对较大，辅料用量多，不利于患者的服用，颗粒干燥时间长，没有控制质量的指标性成分。为此，通过对制剂工艺进行改造，制剂规格由原来的每袋装15 g变更为每袋装5 g，每袋疗效不改变，辅料量减少了60%以上，有效地控制了成品的质量，方便了患者的使用，增强患者依从性，降低企业生产成本。

1 仪器与试药

多功能提取罐（武汉制药机械厂），DBP-3 多功能制粒包衣机（重庆广厦生产），UV-2401 紫外-可见分光光度仪（日本岛津公司生产），医用型超声清洗器KQ-700DE（昆山市超声仪器有限公司），盐酸水苏碱对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110702-200709），硫氰酸铬铵（上海天莲精细化工有限公司，批号：2006-08-12-520），益母草药材、糊精、蔗糖均有承德颈复康药业集团提供，水为二次蒸馏水；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 制剂工艺的研究

益母草颗粒原工艺为提取浸膏湿法挤压制粒，药物与辅料的比例相差较大，特别是干燥过程较慢，导致生产周期也较长，工艺改进后采用沸腾制粒技术制备颗粒，降低了制剂中辅料的用量，减少了颗粒干燥的时间，降低了生产的成本。

2.1.1 提取浸膏比例的选择

按照益母草提取工艺，提取浓缩后浸膏的比重为1.36～1.38，浸膏较黏稠，浓缩过程黏附在浓缩罐中的浸膏较多，损失较大，采用沸腾制粒技术，浸膏比重调整在1.15～1.30 范围内，浸膏损耗少，优选后发现浸膏在1.20～1.25 时，制粒效果较好。

2.1.2 药物、辅料比例的确定

根据试验设计规格，确定制剂中辅料的用量，以颗粒的制备状态、颗粒的粒度为考察点，分别设定糊精∶蔗糖比为5∶4、4∶5、3∶6 三个比例进行优选，而以糊精∶糖粉比例为 4∶5 时制得的颗粒大小均匀，粒度好，过程控制稳定。

2.1.3 工艺对比研究

试验中将变更前后两种工艺进行对比，结果采用喷雾制粒技术，浸膏相对密度降低到1.20～1.25；药物与辅料的比例降低到1.0∶2.2；干燥温度和干燥时间最为明显，由原来的22～24 h降低到2～3 h。结果制得的颗粒硬度适中，粒度均匀，明显缩短了生产周期，降低了生产成本。

2.2 质量研究

2.2.1 薄层色谱鉴别

取本品 5 g，研细，加乙醇 50 mL，超声 30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加入0.1 mol/L盐酸溶液10 mL使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5 mL使溶解，作为供试品溶液。取除去益母草，按益母草颗粒工艺制备的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性样品溶液。另取盐酸水苏碱对照品，加乙醇制成每1 mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，分别吸取供试品溶液、阴性样品溶液各10 μL及对照品溶液5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-盐酸（3∶2∶1）为展开剂展开，取出，晾干，105℃烘干10 min，晾凉。喷以碘化铋钾-碘化钾碘（1∶1）试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰。

2.2.2 方法学考察

2.2.2.1 线性关系考察 精密吸取盐酸水苏碱对照品溶液（1 mg/mL）4、6、8、10、12、14 mL， 分别置 25 mL 容量瓶中，加0.1 mol/mL的盐酸溶液使成20 mL，另取盐酸溶液20 mL，置另一25 mL容量瓶中，作为空白样品溶液，采用含量测定的方法测定，以盐酸水苏碱的浓度（X）为横坐标，吸收度的差值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，测得盐酸水苏碱的线性回归方程：Y=0.605 6X-0.003 1，r=0.999 4，线性范围为 0～8.153 6 mg。

2.2.2.2 精密度试验 精密称取上述对照品溶液6份，各8 mL，按照样品含量测定方法进行测定，测定的平均吸收度值为0.283 6，RSD 值为 0.26%（n=6）。

2.2.2.3 稳定性试验 取同一批号的供试品溶液，分别在放置0、2、4、6、8 h 后，测定其吸收度，结果样品溶液在 8 h 内稳定性良好，样品吸收度值的RSD值为1.34%（n=6），

2.2.2.4 重复性试验 取益母草颗粒（批号：080508）40 g，研细，精密称取 9份，分为三组，每组分别为 1.6、2.0、2.4 g，按“2.2.1”项下供试品溶液的制备方法制成供试品溶液，另取对照品溶液，按上述样品测定方法分别测定盐酸水苏碱的吸收度，记录吸收度值，计算样品含量。样品平均含量为18.7 mg/袋，RSD 值为 1.81%（n=9）。

2.2.2.5 加样回收率试验 取益母草颗粒（批号：080508）40 g，研细，精密称取9份，每份约1.0 g，精密加入不同量的盐酸水苏碱对照品溶液，按“2.2.1”项下供试品溶液的制备方法制成供试品溶液，按上述测定方法测定各样品的吸收度，计算回收率，盐酸水苏碱的平均回收率为98.5%（n=9），RSD=1.03%（n=9）。

2.2.2.6 专属性试验 按照处方配比，除去益母草，参照“2.2.1”项下供试品溶液的制备方法制成阴性样品溶液。按上述样品测定方法进行测定，阴性样品与空白试剂的吸收度无显著性差异，说明辅料不干扰盐酸水苏碱的测定。

2.2.2.7 对照品溶液的制备 精密称取105℃干燥至恒重的盐酸水苏碱对照品适量，用0.1 mol/L盐酸溶液溶解，制成每1 mL含盐酸水苏碱1 mg的溶液，即得。

2.2.2.8 供试品溶液的制备 取本品，研成细粉，精密称取2.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50 mL，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，置蒸发皿中，水浴蒸干，精密加入0.1 mol/L盐酸溶液 10 mL，使溶解，加活性炭0.5 g，置水浴中加热半分钟，搅拌、滤过，滤液置25 mL量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液分次洗涤蒸发皿及滤器，洗液并入同一量瓶中，备用。

2.2.2.9 测定方法 精密量取对照品溶液10 mL，置量瓶中，另取0.1 mol/L盐酸溶液20 mL，置25 mL量瓶中，作为空白样品溶液。在对照品溶液、0.1 mol/L盐酸空白样品溶液及上述备用供试品溶液的量瓶中，各精密加入新配制的2%硫氰酸铬铵溶液3 mL，摇匀，加0.1 mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，置冰浴中放置1 h，过滤，取续滤液，以0.1 mol/L盐酸溶液为空白，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010年版一部附录ⅤA），在520 nm的波长处测定吸收度，用空白样品的吸收度分别减去对照品及供试品的吸收度，计算，即得。各批的测定结果见表1。

表1 益母草颗粒中盐酸水苏碱含量测定结果（mg/袋，n=3）

2.2.3 质量对比研究

取同一批次的药材，分别采用以上两种方法制备不同规格的益母草颗粒各三批，两种规格的样品所含的生药量相同，辅料的用量不同。从检测的结果看，鉴别项没有明显的变化，主斑点颜色清晰；含量测定项，平均含量分别为4.14 mg/g和4.18 mg/g，RSD=0.68%。提示沸腾制粒技术制备的颗粒不会对原规格颗粒的成分产生影响，但在一定的程度上提高了质量的可控性。

2.2.4 含量限度确定

从以上10 批样品测定结果看，益母草颗粒中盐酸水苏碱的含量在16.5～28.5 mg/袋范围内不等，平均含量为21.5 mg/袋。由于不同产地、规格、批次的益母草药材差异较大[2]，导致制剂中盐酸水苏碱的含量也有较大的波动。因此，在上述测得平均值的基础上适当调整，根据生产的实际情况及检测的方法，将每袋颗粒含盐酸水苏碱确定为18.0 mg。

3 讨论

3.1 展开系统和条件的选择

对于益母草鉴别的展开系统，文献报道很多，常用的有正丁醇-盐酸-水（4.0∶1.0∶0.5）[3]、正丁醇-盐酸-乙酸乙酯（4.0∶1.5∶0.5）[3]、丙酮-无水乙醇-盐酸（10∶6∶1）[4]，乙酸乙酯-正丁醇-盐酸（3∶2∶1）[5]等。 考察了各种展开剂对盐酸水苏碱的分离情况。前两种的展开系统，展开时间长，对薄层板的选择性强，展开的重现性差，斑点分散、不稳定；丙酮-无水乙醇-盐酸（10∶6∶1）展开系统展开速度快，样品的分离效果不明显；乙酸乙酯-正丁醇-盐酸（3∶2∶1）展开系统，用时短，分离度好，因此选用其作为该项的展开系统。

3.2 显色剂的选择

选用了盐酸水苏碱常用的显色剂：稀碘化铋钾试液、碘化铋钾试液、改良碘化铋钾试液、改良碘化铋钾-1%三氯化铁无水乙醇液（5∶1）等，均不能使斑点保持圆润、稳定不褪色，而使用碘化铋钾-碘化钾碘（1∶1）进行显色，盐酸水苏碱斑点显色快，清晰，稳定。

[1] 李文仕.益母草颗粒的质量控制[J].中国药师，2008，11（4）：471-472.

[2] 张清民，朱颖虹，熊艳，等.益母草不同制剂盐酸水苏碱含量的测定[J].中成药，2001，23（6）：437-438.

[3] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：1025-1026.

[4] 张玲，时延增，于宗渊，等.双波长薄层扫描法测定益母口服液中水苏碱的含量[J].中国药科大学学报，1996，27（l）：15-16.

[5] 严优勺.益母草质量标准、提取工艺剂型的改进研究[D].广州：广州中医药大学，2005.