基质金属蛋白酶-2在口腔鳞癌中的表达及意义

张玉新

口腔鳞癌(OSCC)患病率和死亡率较高，而浸润和转移是造成其不良预后的主要因素，早期诊断非常重要。有研究表明基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的活性和表达的增加与人类多种恶性肿瘤浸润转移潜能及预后密切相关［1］。作者采用免疫组化方法检测OSCC中MMP-2的表达，分析其与OSCC浸润转移的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 30例口腔鳞癌标本取自作者单位2009～2011年手术切除标本，10例正常口腔黏膜标本取自作者单位同期非肿瘤患者手术切除标本。30例口腔鳞癌病例术前未经化疗、放疗或其他生物治疗，经病理证实，其中19例为深层浸润(浸润累及肌层、骨质或深层腺体)，11例为浅层浸润(肿瘤局限于黏膜及黏膜下层)。全部标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。

1.2 方法 采用免疫组化SP法(试剂均购于福州迈新生物工程有限公司)，以MMP-2即用型鼠抗人多克隆抗体标记MMP-2，抗原修复采用柠檬酸组织抗原修复液进行加热抗原修复，严格控制实验时间、实验温度和各种试剂浓度等条件，按照说明书进行染色，以0.01 mol/LPBS液代替一抗做阴性对照，阳性对照切片由试剂公司提供

1.3 结果判定 MMP-2免疫组化阳性信号位于细胞浆内，呈棕色或棕黄色颗粒，依照阳性细胞密度计分:0%，0分;＜25%，1分;25% ～50%，2分;＞50%，3分。＜2分者为(-)，≥2分者(+)。

1.4 统计学方法 应用SPSS 14.0软件进行统计学分析，采用χ2检验，P＜0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 MMP-2的表达 MMP-2阳性信号位于OSCC细胞胞浆中，口腔鳞癌组织中，MMP-2的阳性率为76.7%(23/30)，正常口腔黏膜中，MMP-2的阳性率为10%(1/10)，两者相比，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

2.2 MMP-2的表达与口腔鳞癌浸润深浅程度的关系 研究表明，在深层浸润的口腔鳞癌组织中，MMP-2的阳性表达率显著高于浅层浸润的口腔鳞癌组织，两者相比，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表1 MMP-2在口腔鳞癌及正常口腔黏膜中的表达

3 讨论

表2 MMP-2表达与口腔鳞癌临床病理特征的关系

浸润转移是恶性肿瘤的重要生物学特征，浸润主要是指癌细胞侵犯和破坏周围正常组织，进入循环系统的过程，同时癌细胞在继发组织器官中定位生长也包含浸润，浸润的实现取决于肿瘤细胞对正常组织的破坏能力，肿瘤本身可产生多种分解酶降解细胞外基质及基底膜，基质蛋白酶在这一过程中起重要作用［2］。与肿瘤浸润转移有关的基质金属蛋白酶主要是MMP-2。MMP-2的主要水解底物是变性胶原及细胞外基质(BM)的主要成分Ⅳ型胶原和Ⅴ型胶原等。大多数口腔鳞癌呈高度局部破坏性，并由于侵犯周围组织器官而危及生命。在口腔鳞癌浸润及转移过程中，细胞外基质和基底膜的降解和破坏是重要的环节。MMP-2在肿瘤细胞介导的细胞外基质和基底膜降解中起关键作用。有研究者对高转移和非转移口腔癌细胞株的MMP-2表达进行了研究，发现高转移口腔癌细胞株主要表达MMP-2，且MMP-2的活性与淋巴结转移和对局部下颌骨浸润显著相关［3］。活化的MMP-2定位于细胞穿透基质的突出部位，估计其有‘钻头'的作用。该组实验免疫组化染色显示MMP-2蛋白主要表达于口腔鳞癌的细胞浆内，在浸润至肌层、骨质、深层腺体口腔鳞癌组织中的表达显著高于位于黏膜及黏膜下的表达。提示MMP-2可能是口腔鳞癌具有高转移高浸润能力的分子基础。

［1］Jouce ER.Matrix Metailopmteinases.Angiogenesis，and Cancer Clinical.Cancer Research，2003:549.

［2］Fan J，Shing Y，Wienderschain D，et al.Matrix met alloproteinase-2 is required for the swich to the angiogenic phenotype in a tumomodel.Proc Natl Acad Sci USA，2000，97(21):3884.

［3］张 锋，谢志坚，宋 恩，等.口腔鳞状细胞癌细胞基质金属蛋白酶2表达与颈淋巴结微转移的关系.口腔医学，2008，24(1):15.