川藿苷A的NMR数据解析

吴鸣建，张 燕，2，张海艳，赵天增

(1.郑州大学化工与能源学院，河南郑州450001;2.河南省科学院天然产物重点实验室，河南郑州450002)

0 引言

川藿苷A(Sutchuenoside A)为山奈酚的苷类化合物，具有显著的免疫抑制活性［1］.迄今已从小檗科淫羊藿属植物 Epimedium Sutchuenense［2］、蚌壳蕨科狗脊属植物狗脊［3］和鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物粗茎鳞毛蕨 Dryoptens Crassirhizoma，Aspidiaceae［1］中发现该化合物的存在.其δH、JHH、δC数据已有报道［1-2］，但其归属详细解析过程未见报道.

最近，我们首次从光叶淫羊藿 (Epimedium Sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.Var.Glabratum T.S.Ying)叶乙酸乙酯萃取物中分离得到川藿苷A.笔者对其分别进行了1H和13C NMR检测，并通过DEPT和1H-1H COSY、HSQC、HMBC 等2D NMR技术对其所有的1H和13C NMR信号进行了全归属和详细解析，指出其NMR数据特征.川霍苷A的结构如图1所示.

1 实验部分

所有NMR实验均在Bruker DPX 400型核磁共振仪上进行.1H NMR的工作频率为400 MHz，13C NMR 的工作频率为 100.577 MHz，以DMSO-d6为溶剂.使用5 mm NMR探头，NMR实验在室温下进行.1H NMR的谱宽为8 000 Hz，数据点为32 000，弛豫延迟为1 s.13C NMR的谱宽为25 000 Hz，数据点为32 000，弛豫延迟为2 s.二维谱均采用正检测探头.

图1 川藿苷A的结构Fig.1 The structure of Sutchuenoside A

质谱ESI-MS用Waters Micromass公司Q-Tof MicroTM型高分辨质谱仪测定.

光叶淫羊藿2005年6月采自贵州江口，经河南农业大学朱长山教授鉴定为光叶淫羊藿.

2 结果与讨论

高分辨质谱(HR ESI-MS)确定川藿苷A分子式为 C29H32O15(m/z 643.166 1［M+Na］+，calcd.for C29H32O15Na 643.163 9).

川藿苷 A 的1H NMR 中，δH6.47(1H，d，J=2.0 Hz)为A环C-6位质子信号，6.80(1H，d，J=2.0 Hz)为A环C-8位质子信号，7.78(2H，d，J=8.8 Hz)，6.95(2H，d，J=8.8 Hz)分别为 C 环AA'BB'自旋系统［4］中 C-2'，6'和 C-3'，5'位的质子信号，10.31(1H，s)和12.56(1H，s)分别为OH-4'和 OH-5 的质子信号;0.70(3H，d，J=6.0 Hz)，1.13(3H，d，J=6.0 Hz)分别为 2 个鼠李糖的6位甲基质子信号5.27(1H，brs)，5.56(1H，brs)分别为2个鼠李糖的端位质子信号.

川藿苷A的13C NMR数据显示27条碳峰信号，其中由于C-2'，6'和 C-3'，5'为 C环上的对称结构，显示重叠的单峰，因此，27条碳峰信号实际表示29个碳.DEPT显示3个甲基碳、16个叔碳(14条碳峰，其中有2条碳峰各含2个叔碳)、10个季碳信号［5］.其中，δC161.1，99.7，161.9，94.8，156.4，106.0 分别为 A 环 5，6，7，8，9 和 10 位苯环碳信号，120.4，130.9 ×2，115.6 ×2，160.5 分别为 C环 1'，2'和 6'，3'和 5'，4'位苯环碳信号，178.0 为 B环C-4羰基信号，158.2，134.5为B环C-2、C-3信号;δC17.3和18.1为2个鼠李糖的6位甲基碳信号，101.7和98.6为2个鼠李糖的端位碳信号，68.0，68.2，70.0，70.1，70.3，70.4，71.8，73.3 为 2个鼠李糖的其他8个碳信号.

川藿苷A的1H、13C NMR数据归属主要通过1H-1H COSY、HSQC、HMBC［6］进行，具体分析如下.

川藿苷A具有2个鼠李糖，其NMR数据解析主要应是如何区分2个鼠李糖的NMR数据归属.根据黄酮醇苷C-3化学位移一般为134左右，可以认定δC134.5为川藿苷A的C-3信号，HMBC显示 δC134.5与 δH5.27相关，说明 δH5.27归属H-1″，因此，另一个鼠李糖端质子化学位移为5.56;H-1″和 H-1‴得到区分后，即可通过1H-1H COSY分别将2个鼠李糖质子由 H-1″(或 H-1‴)到 H-6″(或 H-6‴)逐次进行归属，然后再通过HSQC归属2个鼠李糖的碳峰.

但是，由于在1H-1H COSY中，没有看到H-1″和 H-2″、H-2″和 H-3″的相关，对与 C-3 相连的鼠李糖1H NMR数据归属带来一定困难.为此，可以从两方面入手，一方面，HMBC显示δC101.7(C-1″)与 δH5.32(OH-2″)相关，1H-1H COSY 显示 5.32与4.02相关，则4.02归属H-2″;另一方面，由于H-4″同碳连有 OAc，H-4″化学位移移向低场，δH4.71的三重峰可认定为 H-4″，1H-1H COSY显示4.71与3.70和3.29相关，3.29与0.70相关，则3.70 归属 H-3″，3.29 归属 H-5″，0.70 归属 H-6″，至此，与C-3相连的鼠李糖所有1H NMR数据得到归属;然后通过 HSQC 数据，δC101.7/δH5.27，70.1/4.02，68.2/3.70，73.3/4.71，68.0/3.29，17.3/0.70，将其13C NMR数据明确归属.

通过1H-1H COSY 数据，δH5.56/δH3.84，3.84/3.63，3.36/3.32，3.32/3.43，3.43/1.13，7位鼠李糖1H NMR数据得到明确归属;再通过HSQC 数据，δC98.6/δH5.56，70.0/3.84，70.4/3.63，71.8/3.32，70.3/3.43，18.1/1.13，其13C NMR数据得到明确归属.

川藿苷A的1H、13C NMR数据解析结果见表1.

表1 川藿苷A的1H NMR，13C NMR，HSQC，1H-1H COSY和HMBC数据 (DMSO-d6，)Tab.1 1H NMR，13C NMR，HSQC，1H-1H COSY 和 HMBC data of Sutchuenoside A in DMSO-d6

续表1

3 结论

对川藿苷 A进行1H、13C NMR、DEPT一维NMR 技术和1H-1H COSY、HSQC、HMBC 二维NMR技术检测，对其所有的1H和13C NMR数据进行了详细解析和全归属，为黄酮醇苷类化合物的结构鉴定提供了可靠的NMR数据解析方法和依据，也为该类化合物的深入研究和应用提供了重要的结构信息.

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