青海省湟中县某奶牛场奶牛流产病因的血清学调查和分析

王晓云，徐天刚，王光华，李秀萍，马国福，马利青，蔡其刚

（1.青海省湟中县畜牧兽医工作站，青海湟中 817000；2.青海省畜牧兽医科学院， 青海西宁 810016；3.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266114）

青海省湟中县田家寨某奶牛场，为2009年新建奶牛场，建成后陆续从山西、陕西和甘肃等不同地方引进了320多头奶牛，由于引进时没有进行很好把关，牛群中陆续发生流产病例，截止2011年累计发生流产54例，给牛场造成了极大地经济损失，为了摸清奶牛场发生流产的原因，在相关部门的协助下，我们于2011年12月份在该牛场采集了发生过流产群的95份奶牛血清，进行了布氏杆菌病、衣原体病及弓形虫病的血清学调查，现报告如下：

1 材料与方法

1.1 被检血清

95份血清均采自青海省湟中县田家寨某奶牛场发生过流产的奶牛群，均空腹，经奶牛尾根静脉采集血3～5 mL血液，采集后摆成斜面，置4 ℃冰箱5 h后，放在室温下待血清析出后收集血清，冷冻保存。

1.2 诊断试剂盒

布病试管凝集抗原、阳性血清、阴性血清均由中国CDC 传染病所提供，生产日期：20110423；

衣原体的IHA抗原、阴性标准血清、阳性标准血清和稀释液，均购自中国农业科学院兰州兽医研究所，批号为：2010331；

弓形虫的GST、GST-SAG1、阴、阳性血清等，均由青海省畜牧兽医科学院兽医生物技术室提供。

1.3 器械

康氏管、96孔“V”型有机玻璃微量反应板、微量加样器、微量振荡器、酶标仪和培养箱均为实验室自备。

1.4 检测方法

布氏杆菌病的SAT法、衣原体HIA法和弓形虫ELISA法，分别按文献介绍的方法进行操作[1-3]。

1.5 结果判定

1.5.1 布氏杆菌病结果判定 被检血清在1:100稀释度出现“++”以上的凝集现象时，判为阳性，在1:50稀释度出现“++”以上的凝集现象时，判为可疑。

1.5.2 衣原体病结果判定 阳性对照血清各孔均为（+），阴性对照血清各孔均为（-），被检血清滴度不低于1:16（第二孔）为阳性，被检血清滴度低于1:4（第一孔）为阴性，被检血清滴度在1:4～1:16之间为可疑。

1.5.3 弓形虫的结果判定 ELISA滴度表示成最大稀释度的倒数，且展示ELISA值是等于或大于0.1，在抗原GST-SAG1孔和GST孔之间的光密度吸收值是不同的，两孔阴性血清对照孔的平均值必须低于0.1，样品ELISA抗体滴度值等于或大于0.1为阳性，低于0.1为阴性。

2 结果

应用SAT、IHA和ELISA三种方法，对来自青海省湟中县田家寨镇某奶牛场发生过流产群的95份奶牛血清，进行布氏杆菌病、衣原体病和弓形虫病的血清学调查。结果：检出布氏杆菌病阳性血清1份，衣原体阳性血清15份，弓形虫阳性血清2份，血清阳性率分别为1.05%、15.79%和2.11%。初步说明引起该牛场流产的病因为布氏杆菌病、衣原体病及弓形虫混合感染引起。检测结果详见表1。

表1 布病、衣原体病和弓形虫病的血清学检测结果

3 讨论

3.1 从监测结果看，该奶牛场奶牛布氏杆菌、衣原体病和弓形虫病的感染率为1.05%、15.79%和2.11%，说明该奶牛场牛群中存在布氏杆菌病、衣原体病及弓形虫混合感染。通过回访发现，以上阳性血清的牛均发生过流产，进一步说明该牛群中流产与上述疾病有直接的关系。同时，在部分发生过流产的奶牛的血清中没有检测到上述疫病的抗体，是否存在其他未检测的疫病，或由于管理方面存在的问题引起的，有待于在今后进一步确诊。

3.2 在常规例行检查中，国家把布病列入必检范围内，而没有把衣原体病和弓形虫病列入必检范围内，这是该牛场发生衣原体病和弓形虫病的主要原因，也成为引起奶牛的流产的主要原因，同时给奶牛场造成了一定的经济损失。建议今后的养牛业中把衣原体和弓形虫也作为常规检测项目。常规检测的所有步骤必须如实进行，发现阳性病畜及时进行隔离、淘汰，将该类疾病的控制在发病初期，确保人畜安全。

3.3 为了彻底杜绝此类传染病发生，探讨该牛场感染以上疾病的途径有三种形式，一是产地感染，二是运输过程感染，三是饲养过程感染。为此，严格把关，尤其认真开展产地检疫，阳性者一律全部淘汰，切断传染源。布氏杆菌、衣原体和弓形虫病可以引起动物的流产，给养殖业造成了巨大的经济损失。另外这三种病也是人畜共患传染病，人们可以通过跟动物及其产品的接触而感染，并造成该类疾病的流行和传播，给人畜的安全带来了威胁[4]。

[1]国家质量监督检验检疫局.SN/T1090-2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程[S].北京：中国标准出版社，2003.

[2]周继章，邱昌庆.鹦鹉热衣原体分子结构研究 [J].中国兽医科技，2002，36（12）：18-21.

[3]陆艳，马利青.青海省牛弓形虫病的ELISA诊断及试剂盒建立[J].中国动物检疫，2009，26（10）：40-41.

[4]李桂兰，蔡其刚，马利青，等.青海省某奶牛场引进奶牛群的流产类疾病血清学调查[J].畜牧与兽医，2011，43（7）：112-113.