不同病因对男性不育患者精子形态的影响

王玉丰，吴 玲，陈雪银

（1.海南省第三人民医院 检验科，海南 三亚 572000；2.海南医学院公共卫生学院，海南 海口571101；

3.海南医学院附属医院生殖中心，海南 海口 570102）

不同病因对男性不育患者精子形态的影响

王玉丰1，吴 玲2，陈雪银3

（1.海南省第三人民医院 检验科，海南 三亚 572000；2.海南医学院公共卫生学院，海南 海口571101；

3.海南医学院附属医院生殖中心，海南 海口 570102）

目的 探讨不同病因对男性不育患者精子形态的影响。方法426例男性不育患者根据病因分为7组：精索静脉曲张组（68例）、慢性前列腺炎组（127例）、精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组（36例）、特发性弱精子症组（42例）、少精子症组（115例）、小睾丸症组（21例）及其它组（17例），用瑞－姬氏染色法进行精子形态分析。以78例供精者精液检查结果作为对照。结果不育患者的形态正常精子百分率明显低于对照组（P＜0.001），精子头部畸形率明显高于对照组（P＜0.001）；不育各组精子形态异常率与对照组比较，差异均有统计学意义，不育各组精子形态异常率均高于对照组；精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组、少精子症组、小睾丸症组分别与慢性前列腺炎组相比较，差异均有统计学意义，慢性前列腺炎组精子形态异常率低于精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组、小睾丸症组和少精子症组。结论精子形态缺陷率在不同病因男性不育患者中呈现出不同程度的增高，提示精子形态学分析是反映患者睾丸受损程度的一项敏感指标。

男性不育；病因；精子形态；畸形精子症

（ChinJLabDiagn，2012，16：1236）

资料表明，全球10%－15%育龄夫妇存在生育障碍，而男性因素导致的不育高达40%－50%，且仍呈逐年上升趋势。因此，近年来有关精子质量与男性不育原因的研究越来越引起临床的重视，而精子形态学正是研究中最受关注的领域之一。本文采用瑞－姬氏染色方法对各种病因导致不育的患者进行精子形态分析，旨在评价不同病因对患者精子形态及功能的影响程度，为男性不育症的诊断和治疗提供研究依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象选自2009年6月－2011年6月拟在海南医学院生殖中心进行常规IVF-ET助孕治疗的男性不育患者（排除无精子症及精子数量过少无法形态分析者）426例，年龄22－46岁。根据不育病因将患者分为以下7组：精索静脉曲张组（68例），慢性前列腺炎组（127例），精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组（36例），特发性弱精子症组（42例），少精子症组（115例），小睾丸症组（21例）及其它组（17例），在IVF前3个月内，对患者进行精液常规及精子形态学分析。以同期来院的78例供精者的精液筛查结果作为对照，年龄21－38岁，排除VC、CP、生殖道感染和遗传性疾病等。

1.2 方法

1.2.1 精液采集 禁欲4－7天后在医院取精室经手淫法取精液于干燥经消毒的洁净广口杯中，置于37℃水浴箱内，完全液化后转移至刻度离心管内测量体积，待检。

1.2.2 精子常规检查 按世界卫生组织（WHO）《WHO人类精液及精子－宫颈黏液相互作用实验室检验手册》（第4版）的操作方法，进行精液常规检测，包括精液量、液化时间、pH值、黏稠度、精子密度、活率及活力等内容。

1.2.3 精子形态分析 待精液液化后，取约10μl的精液，滴于载玻片上，拉薄涂片，每份标本推2张涂片，空气中自然干燥，瑞氏－姬氏混合液（临用前10∶1混匀）染色5min，自来水轻轻冲洗玻片，自然干燥后立即显微镜观察，100倍油镜下观察不少于200个精子形态，按文献［1］进行精子头、颈中部和尾部缺陷的形态描述，并记录结果。正常形态精子百分率≥15.0%为形态正常，15.0%＞正常形态精子百分率≥10.0%为轻度畸形，10.0%＞正常形态精子百分率≥5.0%为中度畸形，正常形态精子百分率＜5.0%为重度畸形。

1.2.4 统计学处理 用SPSS 16.0软件包进行统计学分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验；等级资料比较，采用秩和检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不育组与对照组精子形态比较

不育组形态正常精子百分率明显低于对照组（t＝12.557，P＜0.001），而头部畸形率明显高于对照组（t＝22.073，P＜0.001），颈及中部畸形、尾部畸形两组差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。头部畸形以锥形、不定形及梨形头多见。

表1 不育组与对照组的精子形态比较（±s）

表1 不育组与对照组的精子形态比较（±s）

注：与对照组比较，★P＜0.001

头部畸形 颈及中部畸形 尾部畸形对照组 78 28.52±11.51 51.26±12.35 19.35±10.23 13.7组别 例数 形态正常精子（%） 形态异常精子（%）6±9.73不育组 426 13.26±9.54★ 80.14±10.28★21.25±8.65 15.32±7.56

2.2 患者精子畸形程度分布

在426例患者的精液标本中，精子形态正常者（正常形态精子百分率≥15.0%）131例，占30.8%，畸形精子者295例，占69.2%，其中轻度畸形者（15.0%＞正常形态精子百分率≥10.0%）占34.5%（147／426），中度畸形者（10.0%＞正常形态精子百分率≥5.0%）占21.8%（93／426），重度畸形者（正常形态精子百分率＜5.0%）占12.9%（55／426）。

2.3 不同病因对患者精子形态的影响

8个不同组比较，精子形态差异有统计学意义（H＝63.996，P＜0.001）。两两比较结果显示，对照组与不育各组精子形态差异均有统计学意义，对照组精子形态异常率低于不育各组；精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组、少精子症组、小睾丸症组分别与慢性前列腺炎组相比较，差异均有统计学意义，慢性前列腺炎组精子形态异常率低于精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组、小睾丸症组、少精子症组。见表2。

表2 不同病因对患者精子形态的影响

3 讨论

近年来，辅助生殖技术的发展为不孕不育患者带来了福音，而精子质量的检测对体外生殖技术的指导起着举足轻重的作用，尤其精子形态分析被认为是最能够反映男性生育力的一项指标。本研究对426例拟IVF助孕的不同病因男性不育患者在精液常规检查的基础上进行精子形态分析，结果显示不育症患者中，精子形态异常者比率高达69.2%，与曹兴午等［2］采用同种染色方法调查的结果相近（76.1%），基本反映了我国当前不育症患者的精子质量状况。

精子形态异常产生的机制目前尚未切确。一般认为，精索静脉曲张、化学性中毒、感染、氧化系统平衡受到破坏、睾丸内环境改变、染色体异常以及吸烟等均为导致精子发生畸形的主要原因［3］。在本研究中，不育患者的形态正常精子率显著低于对照组，而头部缺陷精子百分率显著高于对照组，说明不育患者的精子形态缺陷主要发生在头部。而头部缺陷类型以锥形、不定形及梨形多见。研究结果还显示，不同不育病因患者的精子形态异常程度并不尽相同。各不育组中精子形态异常患者比例均明显高于对照组；而精索静脉曲张合并慢性前列腺炎组、小睾丸症组和少精子症组患者的精子形态异常比例明显高于慢性前列腺炎组，说明前三种疾病状态存在时患者的精子畸变程度可能大于后者。目前诸多研究已表明，精子的形态与其功能有着极其密切的关系，任何形态上的缺陷都可能导致精子功能的下降，最终导致男性生育能力的降低［4］。然而，精子形态缺陷影响受孕的原因是多方面的，首先形态异常的精子穿透宫颈粘液的能力将显著降低，尤其是头部畸形的精子，其经受来自宫颈粘液的阻力更大；其次，精子形态发生改变将影响精子识别和结合卵子透明带的能力，使精子无法穿透透明带及卵膜实现受精；第三，头部畸形的精子，其顶体结构常发生改变，出现顶体与核膜分离、双膜性结构消失、顶体反转及核分离等现象，严重影响顶体反应，例如圆头精子综合征，常表现为顶体缺如、过少或脱离。在不育症患者精液中圆头精子比例常显著增高［5］。

综上所述，精子形态缺陷在不同原因男性不育患者中，均呈现出不同程度的增高，这充分提示精子形态分析作为一项反映患者睾丸生殖功能状况以及有害因素对睾丸损害程度指标所具有的高度敏感性。临床上将精子形态分析与常规检查相结合，将更有利于男性生育能力的评估以及对辅助生殖结局的预测作用［6，7］。

［1］World Health Organization.WHO laboratory manual for the examination of human semen and Sperm-cervical mucus interaction［M］.4th ed.London：Cambridge University Press，1999：71－74.

［2］曹兴午，周 强，王传航，等.不育症患者293例精子形态分析［J］.中华检验医学杂志，2008，31（10）：1169.

［3］曹兴午.精子形态学检验分析［J］.中华检验医学杂志，2006，29（4）：382.

［4］Yu JJ，Xu YM.Ultrastructural defects of acro-some in infertile men［J］.Arch Androl，2004，50（6）：405.

［5］王瑞雪，孙卉芳，刘睿智.畸形精子症研究进展［J］.生殖与避孕，2007，27（4）：292-295，303.

［6］Guzick DS，Overstreet JW，Factor-Litrak P，et al.Sperm morphology motility and concentration in fertile and in fertile men［J］.N Engl JM ed，2001，345（19）：1388.

［7］De Vos A，Van De Velde H，Joris H，et al.Influence of individua l sperm morphology on fertilization，embryo morphology，and pregnancy outcome of intra-cytoplasmic sperm injection［J］.Fertil Steril，2003，79（1）：42.

Effect of different etiology on sperm morphology in male infertility

WANGYu-feng1，WULing2，CHENXue-yin3.（1.DepartmentofClinicalLaboratory，ThirdPeople’sHospitalofHainanProvince，Sanya572000，China；2.SchoolofPublicHealth，HainanMedicalUniversity，Haikou571101，China；3.ReproductiveMedicalCenter，AffiliatedHospitalofHainanMedicalUniversity，Haikou570102，China）

ObjectiveTo evalute the effect of different etiology on sperm morphology in male infertility.MethodsSemen from 426infertile men which were divided into seven groups，varicocele groups（VC groups，68cases），chronic prostatitis groups（CP groups，127cases），varicocele patients with chronic prostatitis groups（VC with CP groups，36cases），idiopathic asthenozoospermia groups （42cases），oligospermia groups （115cases），small testes syndrome groups（21cases）and other groups（17cases），Sperm morphology was analyzed by Wright-Giemsa stain and those of 78normal semen donors were taken as the control.ResultsThe percentage of morphologically normal sperm in infertile men groups were significantly lower and the percentage of head defect sperm were significantly higher than that in control groups（P＜0.001）；A significantly increased percentage of teratozoospermia were found in all infertile groups comparing with those in controls.The percentage of teratozoospermia in CP groups were significantly lower than that in VC with CP groups，small testes syndrome groups and oligospermia groups.ConclusionThe rate of sperm morphological defects increased to varying degrees in different causes of male infertility.Sperm morphology analysis is one of the good indexes in evaluating testes injury.

male infertility；etiology；sperm morphology；teratozoospermia

R711.6

A

1007－4287（2012）07－1236－03

王玉丰（1978－），男，硕士研究生在读，主管检验师，主要从事生殖遗传及分子生物学检测。

2011－12－24）