9%毒死蜱·烯唑醇悬浮种衣剂液相色谱分析

高青环，张志岩，岳艳荣，张强华

(河南省化工研究所有限责任公司，河南郑州 450052)

毒死蜱(chlorpyrifos)，又名氯吡硫磷，属硫代磷酸酯类杀虫剂，具有胃毒、触杀、熏蒸三重作用，在土壤中的残留期较长，对地下害虫防效好。烯唑醇(diniconazole)名称速保利，属三唑类杀菌剂，对于囊菌、担子菌引起的多种植物病害如白粉病、锈病、黑粉病、黑星病等有特效。9%毒死蜱·烯唑醇悬浮种衣剂由毒死蜱和烯唑醇混配而成，用于防治玉米地下害虫和丝黑穗病效果明显。目前9%毒死蜱·烯唑醇悬浮种衣剂国内还未见高效液相色谱的分析方法。本文使用高效液相色谱法，使用反相C18柱对试样中的毒死蜱和烯唑醇进行定量分析，该方法操作简便、分析速度快，精密度和准确度均符合分析要求，可以满足常规分析和生产中的质量控制。

1 实验部分

1.1 试剂和溶液

乙腈:色谱纯;水:二次蒸馏水;乙酸:分析纯;毒死蜱标准品:质量分数≥98.5%(上海市农药研究所提供);烯唑醇标准品:质量分数≥98.5%(上海市农药研究所提供);9%毒死蜱·烯唑醇悬浮种衣剂(河南省农科院植保所农药实验厂提供)。

1.2 仪器

仪器:Agilent1200高效液相色谱仪;紫外检测器;Agilent Chemstation色谱工作站;色谱柱:ZORBAX SB －C18(5μm，150 mm ×4.5 mm);超声波清洗器;过滤器:过滤膜孔径0.45 μm。

1.3 色谱操作条件

流动相:乙腈—水—乙酸(82∶18∶0.5体积比);柱温:室温;检测波长:230nm;流动相流速:1.0 mL/min;进样体积:5.0 μL;保留时间:烯唑醇约3.03 min，毒死蜱约 5.17 min。见图 1、2。

图1 毒死蜱和烯唑醇标准品液相色谱图

图2 9%毒死蜱·烯唑醇FS液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

分别称取毒死蜱标准品0.10 g(精确至0.0002 g)，烯唑醇标准品0.05 g(精确至0.0002 g)置于同一50 mL容量瓶中，加入20 mL流动相置于超声波清洗器中超声溶解，冷却至室温后用流动相稀释至刻度，摇匀，静置，备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取1.5 g样品(精确至0.0002 g)于50 mL 容量瓶中，加入20 mL流动相置于超声波清洗器中超声溶解，冷却至室温后用流动相稀释至刻度，摇匀，静置，过滤，备用。

1.4.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各相对响应值，待相邻两针的相对响应值变化小于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.5 计算

将测得的两针试样溶液及试样前后两针标样溶液的峰面积分别进行平均，按下式计算毒死蜱和烯唑醇的质量分数(X)。

式中:A1为标样溶液中毒死蜱(或烯唑醇)峰面积平均值;A2为试样溶液中毒死蜱(或烯唑醇)峰面积平均值;m1为毒死蜱(或烯唑醇)标样的质量，g;m2为试样的质量，g;P为标样中毒死蜱(或烯唑醇)质量分数，%。

2 结果分析

2.1 流动相的选择

为了实现毒死蜱和烯唑醇的有效分离，先后试验了甲醇—水、乙腈—水、乙腈—水(以乙酸调pH值为4)、乙腈—水—乙酸等多种流动相配比进行反复试验，最后确定乙腈—水—乙酸(体积比82∶18∶0.5)为试验的流动相。毒死蜱和烯唑醇分离效果好，峰形对称，保留时间适中，可以满足分析要求。

2.2 检测波长的选择

通过Agilent 1200高效液相色谱仪的紫外光谱采集功能，经紫外光谱扫描烯唑醇在220～270 nm之间有很好的吸收，毒死蜱在230、290 nm均有很好的吸收，为了保证毒死蜱和烯唑醇都有较好的吸收，采用230 nm为检测波长。结果见图3、4。

图3 烯唑醇紫外吸收图

图4 毒死蜱紫外吸收图

2.3 方法线性关系的测定

分别称取毒死蜱标准品0.10 g(精确至0.0002 g)，烯唑醇标准品0.05 g(精确至0.0002 g)置于同一25 mL容量瓶中，用流动相溶解并定容后，用移液管分别准确移取 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 于 25 mL容量瓶中，用流动相溶解并定容，按上述操作条件进行测定，以进样浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线(见图5、6)，得线性回归方程为:烯唑醇 y=845.42x+7.3762，相关系数为 0.9997;毒死蜱 y=614.23x+4.4143，相关系数为 0.9989。

图5 烯唑醇标准曲线

2.4 方法精密度测定

按上述操作条件对同一样品平行测定5次，结果见表1，毒死蜱和烯唑醇的标准偏差分别为0.035和0.030，变异系数分别为0.83%和0.98%。

图6 毒死蜱标准曲线

表1 精密度测定结果

2.5 方法准确度测定

在已知含量的样品中加入一定数量的标准品，在上述操作条件下进行测定，结果见表2，测得毒死蜱的回收率为98.00% ～100.5%，平均回收率为99.29%;烯唑醇的回收率为 98.04% ～101.00%，平均回收率为99.56%。

表2 回收率的试验测定结果

3 结论

通过实验表明，本方法可以同时测定9%毒死蜱·烯唑醇悬浮种衣剂中的两种有效成分，方法操作简单、快速、分离效果好，精密度和准确度高，符合定量分析要求，可以满足生产企业生产中的质量控制分析。

［1］王汉芳，季书勤，李向东.9%毒死蜱·烯唑醇悬浮种衣剂防治玉米地下害虫、丝黑穗病的田间药效试验［J］.农药，2009，(10):762－764.