异丙托溴铵雾化吸入液的制备与质量控制

路 伟，李玉珍，李 成，罗意文，王蔓琳（深圳市第四人民医院药剂科，广东深圳 518033）

吸入给药是临床上防治支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病的首选给药方法[1，2]，常见给药剂型有吸入气雾剂、吸入粉雾剂和雾化吸入剂。雾化吸入剂是将药物的溶液、乳状液或混悬液经雾化器来输送药物、不含抛射剂的一种剂型，具有可输送较大药物剂量、制备处方工艺简单、雾化器使用简便等优点，在临床上得到越来越多的应用[2]。

异丙托溴铵为阿托品的N-异丙基取代衍生物，为胆碱能受体阻滞药，在慢性阻塞性肺疾病治疗、支气管哮喘治疗上应用广泛。其支气管扩张作用主要依赖局部的药物浓度，由于口服不易从胃肠道吸收，主要通过雾化吸入给药[3，4]。目前，市场上广泛使用的吸入用异丙托溴铵溶液（商品名：爱全乐）由勃林格殷格翰有限公司生产，国内尚未见吸入用异丙托溴铵溶液或异丙托溴铵雾化吸入液制剂的有关报道。笔者对异丙托溴铵雾化吸入液进行立项研究，设计剂量为每支2m L，每支500μg，临床使用时，将药液置于雾化器中，用生理盐水稀释至3～4m L，安装好雾化器，按说明使用，通常情况成人每次500 μg（14岁以下儿童50～250μg），每日3～4次。本研究所制制剂与爱全乐比较，具有价低等优点，现对其制备及质量控制报道如下。

1 仪器与试药

HP1100系列高效液相色谱（HPLC）仪，包括四元泵、二极管阵列检测器、LC-3D化学工作站（美国Agilent公司）；AG-285电子天平（瑞士Mettler toledo公司）。

异丙托溴铵（北京双鹤制药厂，批号：101001，纯度：＞99%，精制后为单峰并作为对照品使用）；异丙托溴铵雾化吸入液（自制，批号：20110104、20110105、20110106，规格：每支2 m L，每支500μg）；乙腈为色谱纯，庚烷磺酸钠、三乙胺、磷酸、溴化钾为分析纯，水为重蒸馏水。

2 处方与制备

2.1 处方

异丙托溴铵0.25 g，氯化钠9.0 g，乙二胺四乙酸二钠0.5 g，硫酸适量，矫味剂适量，水加至1 000m L。

2.2 制备

将乙二胺四乙酸二钠、氯化钠加入冷却水约800m L中，搅拌使之溶解。向上述溶液中加入异丙托溴铵，搅拌使溶，加入矫味剂，搅拌使溶，用硫酸适量调节pH至3.5，补加冷却水至1 000m L，混匀，分装即得几乎无色的澄明液体。

3 质量控制

3.1 性状

本品为几乎无色的澄清液体。

3.2 鉴别

在“3.4”项下，异丙托溴铵雾化吸入液供试品溶液主峰的保留时间应与异丙托溴铵对照品溶液主峰的保留时间一致。

3.3 检查

（1）pH值：应为3.0～5.0；（2）澄清度与颜色：取本品，应澄清无色或几乎无色。（3）其余：应符合《中国药典》2010年版二部附录“口服溶液剂”项下有关各项检查[5]。

3.4 含量测定

3.4.1 色谱条件。色谱柱：Hypersil ODS（250mm×4.6mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.25%庚烷磺酸钠（含0.5%三乙胺，磷酸调pH＝3.2）＝22∶78，流速：1.0m L·min－1；柱温：30 ℃；检测波长：210 nm；进样量：20μL。

3.4.2 溶液制备。精密称取异丙托溴铵50mg，置于100m L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为500μg·m L－1的异丙托溴铵贮备液。上述溶液置于5℃冰箱中避光保存。

精密量取贮备液5m L于10m L容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为对照品溶液。精密量取样品5m L于10m L容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液。按处方比例称取除异丙托溴铵以外的其他成分，按“2.2”项下方法制备空白制剂，其余按“3.4.6”项下供试品溶液制备方法进行，即得空白样品溶液。另称取溴化钾9mg，置于100m L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为90μg·m L－1的溴化钾溶液。

取空白样品溶液、溴化钾溶液、对照品溶液、供试品溶液按上述色谱条件进样分析，结果溴离子不影响本品含量测定，异丙托溴铵出峰时间约为10.4m in。色谱详见图1。

图1 高效液相色谱图A.空白样品；B.溴化钾；C.对照品；D.供试品；1.异丙托溴铵Fig 1 HPLC chrom atogram s A.blank sample；B.potassium bromide；C.reference substance；D.sample；1.ipratropium bromide

3.4.3 线性关系考察。分别精密量取上述异丙托溴铵贮备液1、2、3、4、5m L于10m L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为50、100、150、200、250 μg·m L－1的系列标准液。按上述色谱条件进样分析。以浓度（c）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，计算得回归方程为：A＝20.64c+66.90（r＝0.999 8），表明异丙托溴铵检测浓度线性范围为50～250μg·m L－1。

3.4.4 回收率试验。分别精密称取异丙托溴铵约20、25、30 mg（低、中、高3种浓度各3份），按“2.2”项下方法进行处理，所得溶液定容至100m L容量瓶中，摇匀。分别精密量取5m L于10m L容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为供试液，按上述色谱条件进样分析，测定含量，计算回收率。结果，平均回收率为100.60%（RSD＝0.58%，n＝9），详见表1。

3.4.5 精密度与稳定性试验。取“3.4.4”项下方法制备的低、中、高3个浓度的供试液各1份，按上述色谱条件，每个浓度各进样6次，每次20μL，测定主峰峰面积，分别计算峰面积的RSD。结果，3个浓度峰面积的RSD分别为0.36%、0.30%、0.42%（n＝6）。

表1 回收率试验结果（n＝9）Tab 1 Resultsof recovery test（n＝9）

取同一份样品溶液（批号为20110106），分别在制备后0、1、2、6、8、24 h，依法测定，结果，含量的RSD为0.32%，表明样品溶液在24 h内稳定。

3.4.6 样品含量测定。精密量取自制样品液5m L于10m L容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液，按上述色谱条件进样分析，测定含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（n＝3）Tab 2 Resultsof content determ ination of samp le（n＝3）

3.5 样品稳定性试验

3.5.1 光照试验。取样品在照度（4 500±500）lx的条件下放置10 d，分别于0、1、5、10 d取样，考察其性状，测定pH值、主药含量，由自身对照法测定有关物质含量。结果10 d时，制剂颜色略加深，pH值略有升高，主药含量明显下降，详见表3。

表3 样品光照和高温试验结果Tab 3 Results of light testand high tem perature test of samp les

3.5.2 高温试验。取样品在60℃恒温水浴中放置10 d，分别于0、1、5、10 d取样，观察外观变化，测定pH值、主药含量及有关物质含量。结果10 d内制剂颜色、pH值无明显变化，主药含量有所下降，详见表3。

3.5.3 加速试验。取样品3批，在温度（40±2）℃条件下避光放置6个月，分别在第0、1、2、3、6个月末取样分析，指标同“3.5.1”项下，同时增加微生物限度检查项，结果详见表4。

样品稳定性试验表明，异丙托溴铵雾化吸入液对光不稳定，高温放置下含量也明显下降，应注意置于凉暗处贮存。

4 讨论

雾化吸入液在处方设计、制备过程中，除以水作溶剂外，必要时还可加入乙醇、丙二醇、甘油等；为改善制剂的稳定性，通常加入合适的辅料如张力调节剂、pH调节剂、络合剂；为减轻对呼吸道的刺激性，还可加入矫味剂；对多剂量包装，应考虑加入防腐剂。张力调节剂通常选择氯化钠；对于pH调节剂，无机酸有硫酸、盐酸，有机酸有抗坏血酸、柠檬酸等，无机碱为氢氧化钠；络合剂有乙二胺四乙酸或其盐。本制剂选择氯化钠为张力调节剂，乙二胺四乙酸二钠为络合剂，硫酸为pH调节剂。因为本制剂为单剂量包装，故未加入防腐剂。

表4 样品加速试验结果Tab 4 Resultsof accelerated testof sam ples

文献[6，7]报道的异丙托溴铵含量测定方法中，色谱柱采用C8，虽然峰形好，但主峰出峰时间太长；笔者选用ODS柱为分析柱，在0.25%庚烷磺酸钠溶液中加入0.5%三乙胺，可使异丙托溴铵出峰时间大为缩短，峰形对称，且处方中的辅料、溴离子不影响其测定。综上所述，本文建立的异丙托溴铵雾化吸入液中异丙托溴铵含量测定方法准确、重复性好、操作简单，可用于异丙托溴铵雾化吸入液的质量控制。

由于《中国药典》2010年版二部尚未收载雾化吸入液，硫酸沙丁胺醇雾化吸入溶液国家药品标准[8]规定检查项目与制剂通则口服溶液剂规定检查项目一致，故本制剂常规检查按照《中国药典》2010年版二部附录“口服溶液剂”项下规定进行。

[1]中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2007年修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2007，30（1）：13.

[2]王兆东，邓家华，周建平，等.呼吸道药物递送-雾化吸入剂的研究进展[J].世界临床药物，2011，32（5）：316.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典临床用药须知（化学药和生物制品卷）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：335.

[4]陈新谦，金有豫，汤 光.新编药物学[M].第17版.北京：人民卫生出版社，2010：445-446.

[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录15-16.

[6]卢来春，张 蓉，刘同华，等.反相高效液相色谱法测定吸入用异丙托溴铵溶液的含量[J].儿科药学杂志，2007，13（3）：22.

[7]谭生建，张启明，刘 刚，等.高效液相色谱法测定复方异维倍克气雾剂中异丙托溴铵和盐酸克仑特罗的含量[J].药物分析杂志，2005，25（9）：1 070.

[8]WS1-（X-292）-2003Z，硫酸沙丁胺醇雾化吸入溶液[S].2004.