张洪友,唐晓艳,李徐延,夏 成,李修明,徐 闯
(1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆 163319;2.中国农业大学生物学院,北京 海淀 100193;3.黑龙江省农垦九三分局畜牧兽医局,黑龙江 黑河 161441)
随着奶牛生产水平的提高,隐性酮病的发病率也逐年上升,给奶牛业的发展造成严重影响。目前,针对该病缺乏有效、实用的预防为主的药物。因此,本试验采用组方药物-“酮病制剂1号”防治隐性酮病,通过血液一些指标的变化,研究探讨其作用机制,为该药防治奶牛隐性酮病提供科学依据。
1.1 供试奶牛的选择、分组和饲养管理 选择年龄、胎次相近,产后10~30d,305d个体产奶量大于6000kg的奶牛24头,分为4组,每组6头。其中Ⅰ组、Ⅳ组为隐性酮病组,Ⅱ组、Ⅲ组为健康组。其中,Ⅰ组、Ⅱ组将10g“酮病制剂1号”分早晚两次混于精料中任其自由采食,饲喂期8d,Ⅲ组、Ⅳ组奶牛不给药。四组奶牛管理条件相同,试验期为12d。各组奶牛均饲喂按NRC标准配制的产奶日粮。
1.2 “酮病制剂1号”:组方药物。
1.3 样品的采集 试验奶牛分别于试验前0d和投喂药物后第4、8、12天清晨尾根静脉采血,肝素抗凝,分离血浆,液氮中保存待测。
1.4 检测项目与方法 葡萄糖(GLU,氧化酶法);β-羟丁酸(BHBA,酶速率法);谷草转氨酶(GOT,比色法);谷丙转氨酶(GPT,酶试剂法);甘油三酯(TG,酶试剂法);乙酸、丙酸、丁酸(高效液相色谱);胰岛素(Ins,放免法);胰高血糖素(Gn,放免法)。
1.5 数据处理 数据均以平均值±标准差表示,用SPSS 11.5软件进行分析,组间差异显著性用ONE-WAY ANOVA(方差分析)统计分析。组间不同大写字母(A、B、C、D)表示差异极显著(P<0.01),不同小写字母(a、b、c、d)表示差异显著(P<0.05)。列间不同大写字母(E、F、G、H)表示差异极显著(P<0.01),不同小写字母(e、f、g、h)表示差异显著(P<0.05)。
2.1 “酮病制剂1号”对血浆生化指标的影响 从表1可见:试验期间,Ⅰ组血浆GLU浓度升高,血浆BHBA浓度降低,与Ⅳ组差异极显著(P<0.01),Ⅱ组血浆GLU浓度呈现升高趋势,试验后12d与与Ⅳ组差异极显著(P<0.01);Ⅰ组GOT在投药期间呈下降趋势,试验后12d上升至最高(P<0.01),与健康组差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);Ⅰ组TG在投药期间呈下降趋势,试验前0d与Ⅱ组差异显著(P<0.05)。
2.2 “酮病制剂1号”对血浆挥发性脂肪酸的影响从表2可见,Ⅰ组血浆乙酸浓度呈下降趋势,试验后8d,Ⅲ组与Ⅰ组、Ⅱ组差异显著(P<0.05);试验后12d,Ⅱ组与Ⅳ组差异显著(P<0.05)。Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组间血浆丙酸浓度呈上升趋势(P<0.01或P<0.05),试验后8d、12d,Ⅰ组与Ⅳ组差异极显著(P<0.01);试验后8d、12d,Ⅱ组与Ⅲ组差异显著(P<0.05或P<0.01)。Ⅰ组血浆丁酸浓度呈现下降趋势(P<0.05或P<0.01);Ⅱ组试验后4d、8d、12d与试验前差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);试验后12d,Ⅳ组与Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组间差异显著(P<0.05)。
2.3 “酮病制剂1号”对血浆激素水平的影响 从表2可见:投药期间,Ⅰ组和Ⅱ组血浆Ins浓度呈上升趋势,试验后12d,Ⅰ组与Ⅲ组、Ⅳ组差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);Ⅰ组和Ⅱ组血浆Gn浓度呈上升趋势,Ⅰ组试验后8d、12d均显著高于试验前0d(P<0.05)。
3.1 “酮病制剂1号”对血浆生化指标和挥发性脂肪酸的影响 血浆GLU和BHBA浓度呈显著的负相关[1],本试验中,Ⅰ组奶牛血浆BHBA浓度显著下降,血浆GLU浓度显著上升并达到正常水平,提示能量正平衡状态,隐性酮病得以治愈。Ⅰ组、Ⅱ组血浆乙酸和丁酸浓度下降,丙酸浓度升高,可能是烟酸提高了瘤胃中丙酸盐的浓度,烟酸还可诱导生糖氨基酸转化为糖,提高血浆GLU浓度[2]。此外,高锰酸钾可明显抑制瘤胃中易利用糖的降解,使大量淀粉在瘤胃后消化道吸收,提高了利用效率[3],从而使血浆GLU浓度升高,减少丙酸的利用,使血浆中丙酸含量增加。试验后12d,Ⅰ组血浆GOT浓度升高可能与酮病本身对肝脏代谢不利有关,即使酮病症状有所缓解,酮病对肝脏代谢仍会产生一定的影响。试验前Ⅰ组血浆TG浓度较高,并高于健康奶牛血浆中TG浓度[4],这可能是肝细胞受损害,肝脏转化过多摄入的能量并加以储存的能力有限,使
得血中TG浓度明显增高[5]。
表1 “酮病制剂1号”对血浆生化指标的影响
表2 “酮病制剂1号”对血浆挥发性脂肪酸的影响
表3 “酮病制剂1号”对血浆激素水平的影响
3.2 “酮病制剂1号”对血浆激素水平的影响 能量负平衡时,Gn可激活脂肪酶,促进脂肪分解,同时又能加强脂肪酸氧化,使酮体生成增多。体脂动员使血浆GLU浓度升高,而血浆GLU浓度升高会引起lns分泌增多,从而使血浆GLU浓度维持稳定。本试验中,Ⅰ组、Ⅱ组血浆lns、Gn及GLU浓度均呈上升趋势,Ⅰ组血浆Gn浓度显著上升(P<0.05),表明在试验期间,Gn的生糖作用处于主导地位,因此血浆GLU浓度升高。
综上所述,“酮病制剂1号”通过对奶牛血浆lns、Gn、乙酸、丙酸、丁酸浓度的调控,起到降低血浆BHBA浓度,提高血浆GLU浓度的作用。
[1]Bruss,M L,Lipids and ketones.In:J J.Kaneko,J W.Harvey and M L.Bruss,Clinical Biochemistry of Domestic Animals[M].London:Academic Press,1997:83-113.
[2]李新建.烟酸和烟酸铬对奶牛热应激和犊牛断奶应激的影响[D].郑州:河南农业大学,2003.
[3]傅启高,梁其英,焦勇.高精料日粮条件下高锰酸钾对绵羊消化代谢的影响[J].八一农学院学报,1995,18(3):88-92.
[4]肖定汉主编.奶牛疾病监控[M].北京:北京农业大学出版社,1994:90-103.
[5]薛瑞益.围产期奶牛血中某些生化指标与脂类代谢病关系的研究[D].呼和浩特:内蒙古农业大学,2006.