孙晓冬 杨君
[摘 要]三唑仑为苯二氮类安定药,分子式C17H12CL2
N4,英文名:Triazolam。该药具有很强的抗惊厥、抗癫痫、抗焦虑、镇静催眠、中枢性骨骼肌松弛和暂时性记忆缺失(或称遗忘)作用。其口服吸收快而完全,口服15~30分钟即生效,2小时血药浓度达峰值。四川甘孜州发生的一起麻醉抢劫案件,犯罪嫌疑人将三唑仑投入藏区日常饮品酥油茶中,趁受害人昏迷后抢走价值十余万元财物。接案后,侦查人员送来现场剩余酥油茶。对送检检材经固相萃取后在气质联用仪上分析,结果从酥油茶中均检验出三唑仑。
[关键词]三唑仑;酥油茶;固相萃取
一、实验部分
(一)仪器和试剂
Varian450GC/220MS系统;HP-5ms30m×0.25mm×0.25?滋m弹性石英毛细柱;Varian-MS Date Review化学工作站;Agela Technologies lncC18萃取小柱;固相萃取仪;涡旋混匀振荡仪;Eppendorf高速离心机;Eppendor移液枪;水浴锅;甲醇、氯仿、丙酮、异丙醇等试剂为分析纯;去离子水。
(二)仪器分析条件
色谱条件:柱温:80℃(1min)→20℃/min→280℃,保持14 min(共25 min);进样口温:280℃;载气:氦气;恒流模式:1.0ml/min;分流比:20:1。
质谱条件:阱温trap:200℃,manifold:45℃,传输线xferline:280℃,溶剂延迟:3min,扫描范围:45-500m/z。
(三)实验方法
1.酥油茶为淡黄色乳浊液,中间混有糌粑粉末、核桃碎粒,表面凝有少量酥油,PH值为7。取10ml酥油茶于水浴锅中升温至50℃,涡旋震荡混匀,再放入0℃冰水中冷却,9000rpm离心4min。此时试管底部为糌粑、核桃沉淀,表面为凝固酥油,用回形针小心挑去表面酥油,移液枪吸取出中间清液过固相萃取柱。
(2)固相萃取:分别用3ml甲醇及3ml去离子水淋洗C18固相小柱,流速控制在1ml/min左右。加样:将上述制备好的上清液加入到已活化好的C18小柱,控制样品流速为0.5ml/min,之后空气加3ml,控制样品流速在6 ml/min左右。柱洗涤:用3ml去离子水洗涤小柱(1.0ml/min),之后空气加压5ml,流速控制在为10 ml/min左右。洗脱及浓缩:洗涤后小柱分别用3ml氯仿/丙酮(1:1)及3ml氯仿/异丙醇(7:3)洗脱,流速均为0.5 ml/min,之后空气加压5ml,流速为5 ml/min,收集洗脱液,在60OC水浴锅上挥干,用0.5ml氯仿定容,取1ul进样GC/MS分析。
二、结果与讨论
(一)检测结果
酥油茶GC/MS检测的总离子流和三唑仑特征离子313+342图(见图1),出峰时间为20.747min组分的质谱图(见图2),经NIST库检索,该组分质谱图与NIST库中三唑仑(Triazolam)的质谱图(见图3)匹配度为94.14,证明酥油茶中含有三唑仑,为案件侦查及给嫌疑人定罪量刑提供了科学依据。
(二)讨论
该案中酥油茶为砖茶煮沸加入酥油、盐、核桃碎粒、糌粑剧烈搅动混匀后形成的淡黄色乳浊液,含油脂量极大,如果采用液液提取,极易产生乳化并且提出油脂
含量高。而固相萃取具有方法简便、易操作、富集率高、污染小、不乳化等优点,因此采用该方法分离富集酥油茶中的三唑仑得到了较好的检验效果。同时在前处理酥油茶时先温热,让酥油融化并涡旋混匀,保证待检物品在乳浊液中的均一性,再低温离心,让酥油重新凝固并全部浮于液体表面,达到了油、水、固体沉淀三者分离的目的,更有利于后期净化处理,因此今后在处理类似油水混合乳浊液样品时可以运用这一思路。
[参考文献]
[1]张新威.中国刑事科学技术大全——毒品和毒物检验[M].北京.中国人民公安大学出版社,2002.
[2]国家药典委员会.中国人民共和国药典.2010年版二部[M].中国医药科技出版社,2010.
[作者简介]孙晓冬、杨君,甘孜州公安局物证鉴定所。