张 扬 张晓娜 韩志国 朱晓波 (吉林大学第一医院神经外科,吉林 长春 300)
症状性脑血管痉挛(SCV)是指自发性蛛网膜下腔出血(SAH)引起的脑血管痉挛,是SAH后严重的并发症之一,对患者临床经过和预后具有重大影响。血管痉挛也是SAH病人致死、致残的主要原因,本文观察银杏达莫对大鼠SAH后SCV的临床效果。
1.1 实验分组 将80只大鼠双侧颈总动脉结扎后,将很快死亡和出现严重神经功能缺损的23只大鼠排除本实验。将无症状和轻微神经功能缺损的57只大鼠在结扎颈总动脉后随机分为三组:假手术组,SAH组,SAH+银杏达莫组。
1.2 方法
1.2.1 动物模型的制备 参照Roux等〔1〕的方法制备大鼠SAH模型。10%水合氯醛(400 mg/kg)腹腔注射麻醉后,大鼠头部及左侧股动脉区备皮,常规消毒铺巾;大鼠仰卧位,手术显微镜下暴露左侧股动脉备用;然后改俯卧位,取枕外隆凸以下约2.0 cm正中直切口,暴露枕骨、环椎及环枕膜,用5 ml注射器针头刺破环枕膜并稍稍推进到达枕大池;有脑脊液流出后,用1 ml注射器抽取股动脉血0.3 ml,在2 min之内注入枕大池;注血后环枕膜穿刺处填塞可吸收性明胶海绵一块,俯卧位头低30°约30 min,以利血液沉积在脑底血管周围,缝合头部及股部切口。48 h后同法抽取右侧股动脉血0.3 ml注入枕大池,制成大鼠SAH动物模型。假手术组两次均注入0.3ml生理盐水。
1.2.2 给药方式 SAH+银杏达莫组大鼠在第一次注血后30 min经静脉给0.4 ml/kg体重银杏达莫(用生理盐水稀释),此后每日按同样的方式分别给药至SAH第4天实验结束。每次注药时间为10 min。假手术组,SAH组大鼠以同样的方式分别经静脉给予同量的生理盐水。
1.2.3 神经症状的观察 神经功能缺损症状通过观察大鼠的
运动功能进行分级描述。采用1998年Endo神经症状分级法:1级,无神经功能缺损;2级,轻微或者可疑神经功能缺损;3级,轻度神经功能缺损,不伴有异常运动;4级,严重神经功能缺损,伴有异常运动。
1.2.4 血液流变学检查 用一次性2 ml注射器采颈静脉血2 ml注入含1.019 mol/L的枸橼酸钠抗凝无菌试管内,用日本SysmexCA-500全自动血凝分析仪处理标本,取样、检测及结果打印均自动完成。各组在实验结束时采血。
1.2.5 基底动脉形态学检查 每组各取8只,取出基底动脉后立即放入预冷的2.5%戊二醛磷酸缓冲液中固定,并且用1%锇酸磷酸缓冲液后固定。丙酮酸逐级脱水,环氧树脂包埋,半薄切片,次甲基蓝天青Ⅱ染色光镜下观察并定位,超薄切片机切片,用枸橼酸铅和醋酸铀双重电子染色,在H-600透射电镜下观察。
1.3 统计学方法 应用SPSS统计软件进行分析,数据资料以±s表示,组内计数资料采用方差分析,组间比较采用两样本均数的t检验。
2.1 大体观察 SAH后第4天取脑组织,血液分布于脑底,以桥脑前池和基底池量最多,有血块形成,脑底池呈暗红色。
2.2 神经功能缺损观察 假手术组神经功能缺损分级13只为1级,6只为2级;其余两组在向蛛网膜下腔注血前每组分别有13只为1级,6只为2级。在SAH后第3天SAH组2级4只,3级12只,4级3只;SAH+银杏达莫组分别为10只、7只、2只。SAH组在SAH后第4天最为严重,其中6只为4级,10只为3级,3只为2级,SAH+银杏达莫组在SAH第0~4天神经功能缺损症状较SAH组,第4天有3只表现为4级,8只表现为3级,8只表现为2级。
2.3 各组血液流变学变化 SAH组全血比黏度与其他两组比较显著增高(P<0.01)。SAH组血浆比黏度与假手术组显著增高(P<0.01),与SAH+银杏达莫组比较,其血浆比黏度明显增高(P<0.05)。SAH组纤维蛋白原(Fbg)含量与假手术组相比显著增高(P<0.01),与SAH+银杏达莫组比较明显增高(P<0.05)。见表1。
2.4 基底动脉形态学观察 SAH+银杏达莫组与SAH组可见细胞质内空泡,内皮细胞肿胀,内弹力膜皱折;且SAH组还可见内皮细胞脱落。假手术组未见明显变化。见图1,图2。
表1 各组血液流变学变化(±s,n=14)
表1 各组血液流变学变化(±s,n=14)
与假手术组比较:1)P<0.05;与SAH+银杏达莫组比较:2)P<0.05
组别 全血比黏度(ηb)(Mpa·s)血浆比黏度(ηp,Mpa·s)纤维蛋白原(FbG,g/L)假手术组3.95±0.29 1.53±0.09 3.15±0.60 SAH 组 8.34±0.461) 1.89±0.151)2)5.05±0.621)2)SAH+银杏达莫组 5.89±0.471)1.53±0.06 3.32±0.44
图1 光镜下各组基底动脉形态学观察(×400)
图2 电镜下各组基底动脉形态学改变
银杏达莫具有良好的药物作用:①调节血流动力学:扩张动脉血管,降低血管壁通透性,改善水肿;②血液流变学的改善:降低缺血黏度、抑制血小板和红细胞的高聚集性、增加红细胞的变形性;③改善组织代谢:稳定细胞膜、维持正常的细胞结构和功能;④神经保护作用:直接保护神经元,加强神经传导、加快神经递质的更新。
研究证明〔2〕,银杏达莫可以增加红细胞变形能力和携氧能力,从而改善缺血细胞的氧供,促进大脑循环、代谢,改善记忆功能;银杏内酯特异性拮抗血小板活化因子,抑制血小板的活化与聚集,降低血液黏度;双嘧达莫双重阻断血小板聚集,抑制中性粒细胞的趋化和聚集,增加缺血区的血流灌注;银杏黄酮甙与银杏内酯双向调节血管张力,纠正病理性毛细血管高渗透性,可清除自由基,保护血管内皮细胞,提高超氧化物歧化酶的活性,拮抗内皮素,抑制毛细血管通透性,抑制炎症与过敏反应,从而保护脑组织,改善脑缺血;白果内酯直接保护神经细胞,抑制自由基诱导的神经细胞凋亡,加强神经传导,加快神经递质更新,促进神经功能的回复。
银杏达莫内的各种有效成分决定了其具有多方面生物效能〔3〕,可纠正病理性毛细血管的高渗性,双向调节血管张力,减轻血管源性及细胞性脑水肿;抗血小板活化因子,减少血小板的高聚集性;改善细胞能量代谢及末梢血液循环;清除自由基,保护细胞膜,直接保护神经元;增加毒蕈碱型胆碱能受体密度,对抗兴奋性氨基酸的神经毒性作用,从而减轻或改善脑缺血、缺氧及脑水肿的发生发展,改善脑组织的血氧供应,减轻病损程度,促进病变区神经功能恢复和临床症状好转。本文证实其有效率高,显效率显著,且无明显毒副作用,安全性高,故值得临床应用。
1 Roux S,Lofflor BM,Gray GA,et al.The role of endothelin in experimental cerebral vasospasm〔J〕.Neurosurgery,1995;37(1):78-85.
2 蔡 鸿,桂芗湘,向道康,等.杏丁与金纳多对急性脑梗死患者血液流变学影响的临床研究〔J〕.浙江中西医结合杂志,2002;12(8):484-5.
3 王筠默.银杏的药理研究〔J〕.中草药,1999;29(2):9-10.