跌打紫金丸的质量标准研究

曾蔚欣，刘礼斌，唐菀晨，孙路路

跌打紫金丸是由土鳖虫、乳香、没药、红花、川芎、当归等15 味中药材制备而成的大蜜丸，为传统自拟处方制剂，临床应用多年，功能活血化瘀，通络消肿。用于跌打损伤、闪腰岔气、伤筋折骨等疗效显著。笔者对制剂中的8 味药材进行了鉴别，建立了该制剂的质量标准。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 GB303 型电子分析天平(瑞士梅特勒公司)，XSP－18S 型显微镜(南京江南光学仪器厂)，ZF－I 型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)，CQ50 超声波清洗器(上海超声仪器厂)，高效硅胶G 薄层板(20 cm×5 cm，安徽良臣硅源材料有限公司)。

1.2 试剂 跌打紫金丸(首都医科大学附属北京世纪坛医院中药制剂室生产，批号:20110403)，水合氯醛、醋酸乙酯、环己烷、乙醚、苯、香草醛、硫酸均为分析纯。

2 方法

2.1 显微鉴别 (1)取跌打紫金丸1 丸，从中间切开，挑取适量样品，置载玻片中央，滴加水合氯醛试液2 滴，透化后装片。置显微镜下观察。

2.2 薄层色谱鉴别

2.2.1 样品的制备 按制剂处方、制法和配制规程，制备跌打紫金丸样品。

2.2.2 阴性对照品的制备 按制剂处方、制法和配制规程，制备跌打紫金丸阴性对照品3 份。其中第1 份不含当归、第2 份不含乳香、第3 份不含没药。

2.2.3 当归薄层色谱鉴别

2.2.3.1 供试品溶液的制备 取2.2.1 项下制备的样品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研匀，加醋酸乙酯30 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 ml 溶解为供试品溶液。

2.2.3.2 阴性对照品溶液的制备 取2.2.2 项下制备的第1 份阴性对照样品9 g，照供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。

2.2.3.3 对照药材溶液的制备 取当归对照药材1 g，照供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。

2.2.3.4 薄层色谱法试验 参照中国药典2010 年版一部附录ⅥB，吸取上述3 种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－醋酸乙酯(8∶2)为展开剂，展开距离15 cm，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。

2.2.4 乳香薄层色谱鉴别

2.2.4.1 供试品溶液的制备 取2.2.1 项下制备的样品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研匀，置具塞锥形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，间歇振摇3 次，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚1 ml 使溶解，作为供试品溶液。

2.2.4.2 阴性对照品溶液的制备 取2.2.2 项下制备的第2 份阴性对照品9 g，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.2.4.3 对照药材溶液制备 取乳香对照药材1 g，照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

2.2.4.4 照薄层色谱法试验 参照中国药典2010 年版一部附录ⅥB，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯－醋酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开距离15 cm，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C 加热至斑点显色清晰。

2.2.5 没药薄层色谱鉴别

2.2.5.1 供试品溶液的制备 取2.2.1 项下制备的样品9 g，剪碎，加硅藻土6 g，研匀，置具塞锥形瓶中，加乙醚30 ml，放置60 min，间歇振摇3 次，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚1 ml 使溶解，作为供试品溶液。

2.2.5.2 阴性对照品溶液的制备 取2.2.2 项下制备的第3 份阴性对照品9 g，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.2.5.3 对照药材溶液制备 取没药对照药材1 g，照供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

2.2.5.4 薄层色谱法试验 参照中国药典2010 年版一部附录ⅥB，吸取上述3 种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－醋酸乙酯(8∶2)为展开剂，展开距离15 cm，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105 °C 加热至斑点显色清晰。

3 结果

3.1 显微鉴别结果 (1)土鳖虫:体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8 ～24 μm，有的具长短不一的刚毛;(2)熟大黄:草酸钙簇晶大，直径60 ～140 μm;(3)续断:草酸钙簇晶，直径约45 μm，存在于淡棕色皱缩的薄壁细胞中，常数个排列成行;(4)红花:花粉粒类圆形或椭圆形，直径43 ～46 μm，外壁具短刺和点状雕纹，有3 个萌发孔;(5)川芎:木栓细胞深黄棕色，表面观呈多角形，微波状弯曲。

3.2 薄层色谱鉴别结果

3.2.1 当归 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点(Rf 值为0.58 和0.66)，阴性对照品相应位置上无荧光斑点(图1)。

3.2.2 乳香 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点(Rf 值为0.25、0.42、0.57 和0.75)。阴性对照品相应位置上无斑点(图2)。

3.2.3 没药 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点(Rf 值为0.33)。阴性对照品相应位置上无斑点(图3)。

4 讨论

4.1 显微鉴别 土鳖虫的体壁、熟大黄、续断的草酸钙簇晶、红花的花粉粒、川芎的木栓细胞各具显著的显微特征，在显微镜下易于识别。显微鉴别法可作为上述五味药材在本方中的定性鉴别方法。

4.2 薄层色谱鉴别

4.2.1 提取条件的选择 文献［1］报道的当归供试品溶液的制备较为复杂，耗时较长。笔者简化了当归供试品溶液的制备，鉴别结果良好。乳香中含有约15 种萜类等挥发性成分及乳香酸等不挥发性成分［2－4］，没药亦含有约45 种挥发性成分［4］，二者均选用乙醚作为溶剂萃取。因乙醚极易挥发，无论采用回流提取，还是超声提取的方法均对环境及操作者有很大的危害，故笔者采用“供试品中加入乙醚放置60 min，间歇振摇3 次，滤过”的提取方法。

4.2.2 展开剂的选择 在没药的薄层色谱研究中，曾以苯－醋酸乙酯(19∶1)为展开剂［5］，薄层色谱显示斑点重叠，展开效果不理想。换用环己烷－醋酸乙酯(8∶2)后，薄层色谱主斑点分离较好。故采用环己烷－醋酸乙酯(8∶2)作为没药薄层色谱鉴别的展开剂。

4.2.3 乳香、没药、当归3 味药材的薄层色谱试验结果 斑点集中、层次清晰、重复性好，空白无干扰，具有可操作性，可作为上述3 味药材在本方中的定性鉴别方法。

［1］ 杨晔琼，赵俊苹. 开郁舒肝丸中当归薄层色谱鉴别的研究［J］. 北方药学，2010，10(3):11

［2］ Ahmed Al－Harrasi，Salim Al－Saidi. Phytochemical Analysis of the Essential Oil from Botanically Certified Oleogum Resin of Boswellia sacra(Omani Luban)［J］. Molecules，2008，13(9):2181－2189.

［3］ Mathe C，Culioli G，Archier P，et al. High－Performance Liquid Chromatographic Analysis of Triterpenoids in Commercial Frankincense［J］. Chromatographia，2004，60(9/10):493－499.

［4］ 王艳艳，王团结. 乳香、没药药对配伍挥发油成分的GC－MS分析［J］. 现代中药研究与实践，2011，25(2):31－34.

［5］ 王苏会，王 瑞. 消骨增贴中乳香、没药的薄层鉴别［J］. 中国医药导刊，2009，11(1):151－152.