肾细胞癌患者手术前后外周血T 淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

管德辉，王晓民，苏 宇，王科亮，徐万海

肾细胞癌是肾实质最常见的恶性肿瘤，占肾脏恶性肿瘤的80% ～90%，占成人全身恶性肿瘤的2% ～3%，发病率位居泌尿生殖系肿瘤的第2 位，每年以2%的速度增加［1］。RCC 是一种免疫原性很强的肿瘤，其发生、发展、转移及预后与机体的免疫功能变化密切相关。RCC 患者多表现为细胞免疫功能低下，经过治疗后患者的免疫功能又有不同程度的恢复。因此，监测患者的细胞免疫功能，对RCC的诊断、疗效分析、预后判断有着重要的临床意义。T 淋巴细胞亚群在细胞免疫中起到极其重要的作用，外周血T 淋巴细胞亚群的水平是反映机体细胞免疫功能的重要指标之一，在肿瘤的免疫监测中起着举足轻重的作用。笔者对我院2006－12 至2009－01 间39 例RCC 患者手术前后外周血T 细胞亚群进行检测，并与同期健康对照组相比较，以了解RCC 患者的免疫功能变化，为临床诊断、治疗及判断预后提供科学依据。

1 对象与方法

1.1 对象 男27 例，女12 例，年龄36 ～80 岁，平均56 岁。左侧18 例，右侧21 例，病程3 d ～2.4 年。均行肾癌根治术。病理类型:透明细胞癌32 例，嫌色细胞癌2 例，混合细胞癌5 例。所有患者治疗前血常规、肝功、肾功均正常，无急、慢性炎性反应，无自身免疫性疾病，不伴有其他原发恶性肿瘤，无营养不良和恶病质。健康对照组40 例来自我院同期健康体检正常者，其中男28 例，女12 例，年龄35 ～78岁，平均54 岁。

1.2 方法 RCC 患者术前及术后2 周采集外周血2 ml，以肝素抗凝，24 h 内送检，采用流式细胞术检测被检者外周血T 淋巴细胞亚群。所用仪器为美国BD 公司的FACSCali－bur 流式细胞仪，单克隆抗体为美国BD 公司的BD Tritest 产品。同期取体检健康的成人外周血，同法检测T 淋巴细胞亚群，与之对照。

2 结果

RCC 患者与健康对照组外周血淋巴细胞亚群检测结果见表1。统计结果显示，RCC 组与健康对照组外周血淋巴细胞亚群比较，RCC 患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较健康者降低，差异有统计学意义(P ＜0.05)，CD8+略有升高，差异无统计学意义。RCC 患者行肾癌根治术后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高，与治疗前相比，差异有统计学意义(P ＜0.05);CD8+降低，差异无统计学意义。

表1 RCC 患者与健康对照组外周血淋巴细胞亚群检测结果(±s;%)

表1 RCC 患者与健康对照组外周血淋巴细胞亚群检测结果(±s;%)

注:与对照组比较，①P ＜0.05;与治疗前比较，②P ＜0.05

组别nCD3 +CD4 +CD8 +CD4 + /CD8+健康对照组4069.81 ±7.7239.80 ±4.9524.74 ±4.141.64 ±0.28 RCC 组治疗前3954.91 ±7.37①29.58 ±4.67①25.12 ±4.081.19 ±0.17①治疗后3961.46 ±5.76②34.66 ±4.26②24.35 ±3.151.52 ±0.16②

3 讨论

机体免疫功能与肿瘤发生发展有密切关系。免疫功能低下或受到抑制时，免疫细胞不能有效识别、排斥和杀灭肿瘤细胞，肿瘤的发病率就增高;而肿瘤进行性生长时，患者免疫功能就受到抑制。经过有效的治疗后，机体的免疫功能可不同程度地恢复［2，3］。

RCC 早期临床表现具有隐蔽性、多变性和非特异性，出现典型的临床症状时往往已有广泛进展，甚至有远处转移。其主要治疗手段是根治性切除术，但对于晚期转移性肾细胞癌，手术治疗效果欠佳。RCC 对放疗、化疗均不敏感，但却是一种免疫原性极强的肿瘤，免疫治疗是晚期及转移性肾细胞癌患者术后主要的辅助治疗手段，细胞因子［4］、靶向治疗［5］、肿瘤疫苗［6］、单克隆抗体［7］、过继细胞免疫治疗［8］和基因治疗［9］等相继进入实验研究和临床试验阶段，生物免疫治疗方法逐渐成为晚期肾细胞癌治疗的重要手段。通过纠正肿瘤患者的免疫缺陷，激活特异性抗肿瘤免疫反应，达到消灭肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞生长的目的。治疗过程中，需要有一个客观、准确的指标，反映机体免疫功能的变化，来检测各种治疗方法的疗效。

机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主，主要是T 淋巴细胞介导的特异性细胞免疫。CD(cluster of differentiation)为人白细胞分化抗原，T 淋巴细胞按其表面标志和功能不同分为CD4+辅助亚群和CD8+抑制亚群，CD4+为辅助性T 细胞，能促进效应细胞抗肿瘤作用，CD8+为抑制性T 细胞，抑制机体的免疫应答，而CD3+为成熟T 细胞［10］。T 淋巴细胞亚群在细胞免疫中起主导作用，在正常情况下，CD4+/CD8+比值处于相对平衡状态，基本恒定在1.5 ～2.0 之间，免疫功能稳定，维持体内环境的平衡。患者细胞免疫的状态直接反映机体的抗肿瘤免疫机能，也常作为判断肿瘤患者预后的一种重要指标。因此，检测患者外周血T 细胞亚群的变化可作为反映机体抗肿瘤免疫能力的一个指标，而免疫治疗后CD3+、CD4+、CD8+的水平和患者长期生存关系密切。肿瘤患者血清中存在抑制淋巴细胞分化增值的可溶性免疫抑制因子，包括肿瘤细胞产生的PGE2和免疫抑制酸性蛋白(IAP)等，导致淋巴细胞表面CD3+、CD4+抗原表达明显减少，CD8+增高。CD4+细胞的减少及CD8+细胞的增多造成患者CD4+/CD8+比例明显失调。文献［11，12］报道肿瘤患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比例显著低于健康对照组，而CD8+高于健康对照组，表明细胞免疫功能明显受到抑制。因此，在治疗过程中检查T 细胞亚群能够了解细胞免疫功能状况，进而了解疾病发生发展、治疗效果以及预后情况，这对制定治疗方案有重要的参考价值。

本研究通过检测外周血T 淋巴细胞亚群，对RCC 患者与健康者的细胞免疫功能状态进行了对比，对RCC 患者手术前后的免疫功能状态的变化进行了观察和分析。研究结果显示，RCC 患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较健康者明显降低，CD8+升高，与文献［13，14］报道一致，说明RCC 患者细胞免疫功能较健康人低。肾癌根治术后患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较术前明显升高，差异有统计学意义(P ＜0.05)，CD8+也有所下降，但无统计学意义，说明手术治疗后RCC 患者细胞免疫功能比手术前有所提高，但仍然低于正常水平。

大量基础及临床试验证明，RCC 根治术后辅以免疫治疗，能够激发体内抗肿瘤免疫反应，可以清除肿瘤微转移灶，提高患者的生存率，是RCC 治疗的重要辅助方法，对预防RCC 术后复发和转移有较好的疗效，越来越多地应用于RCC 的治疗。本研究通过对RCC 患者外周血T 淋巴细胞亚群的分析，能够了解RCC 患者的细胞免疫功能状况，从而监测疾病的发生、发展进程，为包括免疫治疗在内的各种治疗方法的疗效评定提供科学的指标，为临床制定和调整治疗方案提供客观的参考依据，并有助于对疾病的预后做出准确的判断。

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