HPLC法测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量

罗世芳

(咸宁学院附属第二医院，湖北 咸宁 437100)

康乐鼻炎片为中西结合复方制剂，其主要的成分是苍耳子、辛夷、麻黄等十味中药和西药马来酸氯苯那敏，具有疏风清热、活血驱瘀、祛湿通窍等功用，主要用于外感风邪、胆经郁热、脾胃湿热而致的伤风鼻塞、鼻窒、鼻鼽、鼻渊，临床上主要用于治疗急、慢性鼻炎，过敏性鼻炎，鼻窦炎等，系卫生部药品标准(中药成方制剂第十二册)收载的中西药复方片剂。马来酸氯苯那敏在康乐鼻炎片的含量较少，且又受中药多成分的影响，因此检测有一定的难度。本文基于现代色谱技术，采用高效液相色谱法建立了马来酸氯苯那敏的含量分析方法［1～6］，实验表明，该方法科学，重现性好，杂质无干扰，可以用于康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量控制方法。

1 仪器与材料

LC-10A高效液相色谱仪(岛津，日本)，SK5200H超声波清洗机(上海科导超声仪器有限公司)，UV-2001型紫外可见分光光度计(北京创新通恒有限公司)。康乐鼻炎片(市售，武汉康乐药业股份有限公司)，马来酸氯苯那敏对照品(购于中国药品生物制品检定所，批号:100047-20030)，乙腈、甲醇、冰乙酸均为色谱纯，十二烷基硫酸钠为优级纯，水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

取马来酸氯苯那敏对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得。

2.2 供试品溶液的制备

取康乐鼻炎片10片，除去糖衣，研细，混匀，取0.5g，精密称定，置 50ml量瓶中，加甲醇45ml，超声处理30min，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

2.3 阴性样品溶液的制备

按部颁标准制备工艺制得不含马来酸氯苯那敏的片剂，依照供试品溶液的制备制成阴性样品溶液。

2.4 色谱条件

Zorbax Eclipse XDB-C18(4.5mm × 150mm，5μm);乙腈:0.5%十二烷基硫酸钠:冰乙酸(55∶45∶0.1)为流动相;柱温:室温;检测波长为 262nm。灵敏度0.20AUFS，流速1ml/min 量 20μl，理论板数按马来酸氯苯那敏峰计算应不低于3000。在该色谱条件下，马来酸氯苯那敏保留时间为8.1min，对照品、样品和阴性样品的色谱图分别，见图1、2、3。

图1 马来酸氯苯那敏对照品色谱图

图2 康乐鼻炎片样品色谱图

图3 未加马来酸氯苯那敏的康乐鼻炎片样品色谱图

2.5 测定波长的选择

取马来酸氯苯那敏对照品加甲醇制成适宜的浓度，置紫外-可见分光光度仪上于200～400nm波长范围内扫描测定，得紫外光谱图(图4)，马来酸氯苯那敏在262nm波长处有最大吸收，确定测定波长为262nm。

图4 马来酸氯苯那敏紫外扫描图

2.6 提取时间的选择

取样品(批号080701)3份，依照含量测定方法实验，分别超声提取 10、20、30min，测定含量，分别为 1.76、1.78、1.79mg/g。结果表明，超声提取20min即提取完全，故将提取时间定为20min。

2.7 阴性对照试验

取不含马来酸氯苯那敏的样品，供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液，分别吸取阴性对照品溶液，样品(批号:080701)溶液，马来酸氯苯那敏对照品溶液，注入液相色谱仪，结果:阴性样品对测定无干扰。

2.8 线性关系考察

取浓度为78.0μg/ml的马来酸氯那敏对照品溶液，依次进样 1、2、4、6、8、10μl，记录色谱图，以马来酸氯苯那敏的量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:Y=841329X－10678(r=1.0000)，结果马来酸氯苯那敏的进样量在0.073～0.73μg范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系。

2.9 精密度试验

取浓度为19.8μg/ml的马来酸氯苯那敏对照品溶液，分别连续进样5次，进样量20μl，记录峰面积，平均峰面积为314372，结果RSD为0.8%，表明仪器精密度符合要求。

2.10 稳定性试验

取样品(批号:080701)，照标准正文方法制成供试品溶液，分别在 0、2、4、6、8h 进标一次，测定峰面积，平均峰面积为313672，RSD为1.0%(n=5)。结果表明，供试品溶液在8h内稳定，能保证含量测定的时间要求。

2.11 重复性试验

取同一样品(批号:080701)5份，按供试品溶液制备方法制备，平行制备5份供试品溶液，并进样测定，结果测量马来酸氯苯那敏的平均含量为1.79mg/g，RSD=0.82%(n=5)，表明方法的重现性良好。

2.12 回收率试验

取已知含量的样品(批号:080701，含量为1.79mg/g)5份，分别加入马来酸氯苯那敏对照品，照标准正文含量测定方法操作，计算回收率，测得平均回收率为100.5%，RSD=1.75%，表明本法回收率良好。结果见表1。

表1 回收率试验结果表

2.13 样品的测定含量测定

取3批样品，依据供试品溶液制备方法制备样品，测定含量。批号080901样品含量(相当于标示量百分数)为87.1%，批号080902样品含量(相当于标示量百分数)为95.4%，批号080901样品含量(相当于标示量百分数)为93.0%。

3 讨论

由于康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量较低，又是一种复方制剂，成分复杂，采用常规的滴定方法准确度不好，而采用液相色谱法可以解决这些问题。马来酸氯苯那敏在常用C18色谱柱中易出现拖尾的现象。如果用去碱活性色谱柱比一般的色谱柱要好。在实验过程中，采用十二烷基硫酸钠比庚烷磺酸钠的效果要好。能取得较好的分离度，也没有杂质峰的干扰。

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