几种中草药提取物防治莴苣霜霉病研究

黄兴学，王斌才，胡侦华，林处发，周国林，汪爱华，邓耀华，张润花，姚芳

（武汉市蔬菜科学研究所，430345）

莴苣霜霉病是莴苣上的毁灭性病害，化学防治是当前控制该病的主要措施，但由于化学杀菌剂连续使用，病菌的抗药性越来越强，而为了提高防治效果又不得不增加施药量和施药次数，导致农药残留问题日趋严重。有机蔬菜不能使用任何化学药剂，目前对莴苣霜霉病尚无有效办法，急需研制出对该病治疗和预防比较有效的且对蔬菜和环境友好的药剂。植物源杀菌剂符合有机蔬菜生产标准，针对其他病害的植物源杀菌剂已有报道，但是对莴苣霜霉病有效的植物源杀菌剂尚少有研究，本研究报道了几种中草药防治莴苣霜霉病的药效试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试病原菌为莴苣霜霉病 （Bremia lactucae Regel），莴苣品种为武汉花叶莴苣。

1.2 试验方法

①植物中草药提取物的制备 将各中药称取30 g，加入1 500 mL水用煎药壶熬煮。熬煮完成后过滤，用水定容至500 mL，即为60 g/L的药剂。如果是混合物提取液，总质量100 g，浓度60 g/L。

②抑制孢子囊萌发试验 从大田采回莴苣霜霉病病叶，用自来水洗去原有孢子囊，保湿24 h后，用毛笔轻轻将病斑处新产生的病原孢子囊刷入不同处理药液中，配制成含药孢子悬浮液，以不含药的孢子悬浮液为对照。用悬滴法测定孢子萌发情况，于25℃下培养4 h后，显微镜下检查萌发率，计算抑制率：抑制率（%）＝[（对照萌发率-处理萌发率）/对照萌发率]×100%。

③苗期试验 将供试药剂分别配制成12.5，25，50，100 mg/L， 以 500 mg/L 甲霜灵为标准药剂对照，清水为空白对照，每个处理重复3次。当莴苣长出2片叶时进行试验。a.预防作用测定试验。用点滴法施药，保湿24 h后，再用点滴法接菌保湿24 h，然后转入常规管理，待清水对照充分发病后，调查防治效果。b.治疗作用测定试验。方法与保护作用基本相同，区别在于先接菌，保湿24 h后再施药。分级方法及计算公式：0级，叶片无病斑；1级，病斑面积占整个叶片面积5%以下；3级，病斑面积占整个叶片面积6%～10%；5级，病斑面积占整个叶片面积11%～25%；7级，病斑面积占整个叶片面积26%～50%；9级，病斑面积占整个叶片面积的50%以上。病情指数＝（∑病级叶片数×该病级数值）/（调查总叶数×最高病级数值）；相对防效（%）＝[（对照区病情指数-处理区指数）/对照区病情指数]×100%。

1.3 数据分析

用Excel 2003进行数据统计及分析，用SAS 8.1进行方差分析。

2 结果与分析

2.1 中草药提取液对孢子萌发的影响

从表1可以看出，8种中草药提取液对莴苣霜霉病孢子的萌发抑制效果以穿心莲最好，其次是厚朴和牛蒡，其他几种中草药提取液对孢子萌发的抑制率均在80%以下，对照最低。

2.2 3种中草药混合物提取液对莴苣霜霉病孢子的萌发的影响

对莴苣霜霉病孢子萌发最大的用3种中草药混合物进行室内抑菌测定（表2）。表2结果表明，3种混合物提取液抑制效果比两种混合物和对照抑制效果好， 穿心莲∶厚朴∶牛蒡＝2∶1∶1 混合物对莴苣霜霉病孢子的萌发抑制效果最好，其次是 1∶1∶1、1∶2∶1、1∶1∶2。 2种混合物抑制效果比3种混合物抑制效果差，但比对照好，差异达显著水平。

2.3 中草药提取物对莴苣苗期霜霉病的防效测定

由表3可知，除了苦参的治疗效果，其他提取物的预防和治疗效果都显著高于对照。每一种提取物的预防效果都优于其对莴苣霜霉病的治疗效果。从对莴苣霜霉病的预防效果来看，以牛蒡和穿心莲最佳，显著高于其他处理。而苦参和黄柏提取物效果较差，与其他中草药提取物保护效果差异显著。牛蒡对霜霉病发生后的治疗效果优于其他提取物，其次为穿心莲和厚朴。最差的是对照和苦参。

2.4 中草药提取物混合液对莴苣霜霉病的田间防效

将对莴苣霜霉病孢子萌发抑制和莴苣幼苗霜霉病田间防效较好的穿心莲、厚朴和牛蒡混合提取后进行防效测定。结果表明（表4），中草药混合物对莴苣霜霉病的预防和治疗作用分别优于于单个中药提取物。预防效果和治疗效果最好的是穿心莲∶厚朴∶牛蒡=2∶1∶1 和 1∶1∶2 处理， 较差的是 1∶1∶0处理。

3 小结与讨论

从对莴苣霜霉病孢子抑制和田间防效的观察来说，都是穿心莲、厚朴和牛蒡效果较好，3种中草药混合物的防治效果比单个中药要好。当混合物中穿心莲和牛蒡比例增加的时候，药效提高，因此改善防治莴苣霜霉病的中草药配方，应选用混合制剂，其中穿心莲和牛蒡是必须的组分，但比例还需要进一步研究。试验证明，用中草药提取物防治莴苣霜霉病是可行的。

中草药制剂对孢子囊萌发的抑制率高于田间试验的防效，原因可能是孢子萌发试验测得的仅是药剂与病原菌相互作用的结果；而田间试验是药剂、病原菌、寄主及环境条件之间相互作用的结果。

表1 中草药提取液对莴苣霜霉病孢子萌发的影响

表2 3种混合物提取液对莴苣霜霉病孢子萌发的影响

表3 中草药提取物对莴苣苗期霜霉病的防效测定

表4 3种中草药混合物对莴苣霜霉病田间防效测定

中草药制剂防治霜霉病的效果与其在田间的稳定性、渗透性、提取介质等有关，为进一步加强其防治效果，减少其有效防治浓度，降低成本，须在剂型、稳定性和渗透性等方面加强研究。另外，因为多种中药混合物可以通过不同的方式抑制霜霉病的发生和蔓延，所以中草药的配方还可进一步完善。