聚合酶链反应技术诊断淋病的体会

闫鑫

(莘县人民医院检验科，山东 莘县 252400)

2009年1月至2011年1月，我科采用聚合酶链反应技术(PCR)检测淋病标本1568份，现将检测结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 本组泌尿生殖器分泌物采集标本共1568例，均来自于我院泌尿外科和妇科门诊病例。其中男性标本656例，女性标本912例。年龄18～60岁，其中18～30岁526例(33.55%)；31～40岁437例(27.87%)，41～50岁386例(24.62%)，51岁以上者219例(13.97%)，本组均为有淋病症状的疑似病人。职业类别：从事休闲服务业如美容美体业、发廊、男士或女士会所、酒店、宾馆、足浴、按摩房、洗头房等从业人员625例(39.86%)。进城务工人员585例(37.31%)，个体商户、企业老板、经理类人员148例(9.44%)，流动人口无固定职业人员178例(11.35%)，公职干部、职员类人员32例(2.04%)。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 女性未婚者取其尿道口及阴道口周围脓性分泌物，女性已婚患者在拭净宫颈表面分泌物后，用无菌拭子插入宫颈管1～2cm，转动2周取出拭子。男性患者拭净茎头后将拭子插入尿道1.5cm 取材。

1.2.2 检测方法 取分泌物于500μl 生理盐水中，14000r/min 离心5min，弃上清液，用50μl 裂解液悬浮沉淀，100℃15min，14000r/min 离心5min，取上清液2μl 做PCR反应模板。取出已分装有PCR 混合物的离心管，室温融化，离心数秒。在PE480型微电脑扩增仪上进行扩增，条件为94℃45s，55℃45s，72℃45s，共35个循环。取10～15μl 扩增产物于2%的琼脂糖凝胶上进行电泳，以溴化乙锭染色在紫外线灯下观察到400bp的DNA 片段即为淋病奈瑟菌(NG)PCR 阳性。每批标本扩增同时行阳性对照(2μl 阳性模板)和阴性对照(2μl 双蒸水)。

2 结果

2.1 泌尿外科就诊的男性受检者656人，年龄最小18岁，最大60岁，PCR-NG 阳性者246人，阳性检出率为37.5%；各年龄组阳性率见表1。

2.2 妇科门诊就诊女性受检者912例，年龄最小21岁，最大56岁，PCR-NG 阳性312例，阳性检出率为34.21%；各年龄组阳性率见表2。

2.3 不同类别从业人员受检者PCR 结果显示：从事美容美体、发廊、会所、宾馆、足浴、酒店、按摩房等休闲服务人员PCR-NG 检出率最高达47.36%，各职业人员检出率见表3。

表1 泌尿外科男性受检者PCR 结果

表2 912例妇科门诊受检者PCR 结果

表3 1568例受检者PCR 结果

3 讨论

3.1 检测结果分析 本组1568例，PCR-NG 阳性558例，阳性率为35.59%，其中男性656例，PCRNG 阳性246例，阳性率为37.5%，女性912例，PCR-NG 阳性312例，阳性率为34.21%；总阳性率男性与女性阳性率之间比较无显着性差异 (P>0.05)。职业类别人员分析：休闲服务业检出率最高，为47.36%，其次为进城务工人员，检出率为30.94%，流动人口检出率为22.47%，个体企业人员为24.32%，公职人员为15.63%。本组检出率最高与最低组比较，有非常明显性差异(P<0.01)表明休闲服务人员等是淋病PCR-NG 检出率较高的人群[1]。本资料符合文献报道[2]。

3.2 PCR 技术的价值 淋病由淋病奈瑟菌引起，其特点是侵袭黏膜，以生殖泌尿系统黏膜的柱状上皮与移行上皮为主[3]。其临床表现相同[4]。因此，单凭症状与临床表现诊断淋病有一定困难[5]。PCR 是一种体外扩增特异DNA 片段的检验技术，可在短时间内使极微量的核酸片段扩增到数百万个特异DNA 序列拷贝。本研究采用PCR 技术方法，直接检测标本中淋球菌DNA，不需作分离培养，具有特异性强，灵敏度高，简便快速等优点。可为临床治疗提供及时、准确、客观、可靠的诊治依据，具有科学有效的实用价值[6]。

[1]侯建峰.基层医院淋病治疗面临的问题调查[J].中国性科学,2005,14(6):26.

[2]翟文海.淋球菌4种常用检测方法比较[J].皮肤与性病杂志,23(2):55.

[3]蒋廷武.性传播疾病常见病原体检测结果分析[J].中国误诊学杂志,2006,6(11):2103.

[4]孙继英,于晶石,李 阳.淋病患者多部位感染因素调查[J].中华临床中西医药杂志,2005,6(9):179-80.

[5]王平江.淋病误诊为前列腺炎，输卵管炎2例[J].中国误诊学杂志,2006,6(14):2846.

[6]李爱素,吴相义.聚合酶链反应技术在淋病诊治中的应用[J].中华综合临床医学杂志,2001，3(1):48-49.