林向东,韦加梅,邹冬梅,任 萍,果 虹
(1、南京市浦口区疾病预防控制中心,江苏 南京 210031;2、南京市浦口区妇幼保健所,江苏 南京 211800)
妇科白带涂片多功能染色液(即BTR)为一种液态双试剂,是利用化学反应分子之间的相互吸附原理:病原体、细胞等含有多种氨基酸,其极性基带有不同的电荷,与带不同电荷的染料亲合,而染成不同的颜色,达到对细胞、病原形态的鉴别作用。用BTR 染色检测发现淋病可疑患者,现将检测情况报告如下。
1.1 检测对象 581例淋病可疑患者,其中男89例,女492例,年龄18~77岁。
1.2 试剂来源
1.2.1 BTR (即妇科白带涂片多功能染色液) 由湖南省株洲康乐检测试剂有限公司提供。生产日期/批号为:2009年11月2 日/09、2011年11月15日/08,避光常温保存,无需冷藏,有效期两年。
1.2.2 生理盐水 由浙江济民制药有限公司提供;Lot:09112543,EXP:201310。
1.3 检测方法
1.3.1 BTR 染色方法 分泌物直接涂片,待干后,加R1 液(red)2 滴,染液盖满涂膜,染色5~10s,水洗;加R2 液(blue) 2~4 滴,染液盖满涂膜,染色10~20s,水洗。趁湿片用低倍镜和高倍镜检查;待片干后,换油镜仔细检视。根据染色后淋球菌的形态加以判定:淋病奈瑟菌染黑蓝色,呈典型的肾形相对双球菌,可分散或成团出现于中性白细胞内外。结果以肾形相对双球菌,分中性白细胞内外发报告。
1.3.2 清洁度 取阴道分泌物,用生理盐水涂片,高倍镜检查,根据所含白细胞(脓细胞)、上皮细胞、杆菌、球菌的多少,分成Ⅰ~Ⅳ度。清洁度在Ⅰ~Ⅱ度内视为正常,Ⅲ、Ⅳ度为异常[1]。
1.4 统计学方法 采用χ2检验。
2.1 阴道清洁度与淋病奈瑟检出率,见表1。
2.2 581例淋病可疑患者检查情况,见表2。
2.3 BTR 染色法淋病奈瑟菌检出71例与细菌培养结果比较,见表3。
3.1 人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主 淋病奈瑟菌对单层柱状上皮和移行上皮敏感,通过淋病奈瑟菌菌毛的黏附因子黏附于有亲和力的部位,如尿道、宫颈和输卵管黏膜上皮,然后通过菌毛毒素(脂多糖、内毒素)与补体,IgM等共同作用,在局部形成炎症反应[2]。淋病奈瑟菌感染后,黏膜上皮及粘膜下组织充血、水肿、渗出、坏死,上皮脱落,白细胞聚集形成脓液。因此,淋病奈瑟球菌常存在于女性阴道清洁度Ⅳ度的标本中。由表1可知,在女性阴道清洁度Ⅳ度的标本中淋病奈瑟菌检出率达64.52%。
表1 阴道清洁度与淋病奈瑟菌检出率
表2 581例淋病可疑患者检查情况
表3 BTR 染色法淋病奈瑟菌检出71例与细菌培养结果比较
3.2 由表2可知 BTR 染色结果,男性淋病奈瑟菌检出率明显高于女性(χ2=55.08,P<0.01),说明男性尿道取材特异性高。
3.3 由表3可知 用BTR 染色法检出淋病奈瑟菌71例,与细菌培养结果比较,阳性检出相差2例。这2例经认真总结考虑是由于女性宫颈取材特异性低,宫颈分泌物中杂菌多,有的在形态上很象淋病奈瑟菌的缘故。
3.4 实验对照结果分析表明 BTR 染色法淋病奈瑟菌阳性检出结果与细菌培养结果基本一致(χ2=55.08,P<0.01)。由于BTR 染色法操作简便,只需一台显微镜即可开展项目、试剂含有固定剂和灭菌剂,且蒸馏水配制,不含甲醇;染色时间短,只需15~30s,2min 内即可发出报告,细胞和病原体形态清楚,背景清晰,结果准确,阳性率高,因此我们认为BTR 染色法是初筛淋病的一个好方法。对于无条件开展淋病奈瑟菌培养的基层医疗单位和农村特别经济适用,可以广泛开展应用。
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3.版南京:东南大学出版社,2006:324.
[2]丛玉隆,尹一兵,陈 瑜.检验医学高级教程[M].北京:人民军医出版社,2010:878~879.