聚合酶链反应与涂片法检测对诊断结核病的价值

王盈

(江西省抚州市第一医院检验科，江西 抚州 344000)

结核病是当前对人类的健康具有严重威胁的重大传染性疾病之一，作为一种传染疾病，结核病已经成为全球性的社会问题和公共卫生问题。在我国，根据抽样调查结果，其感染率达到44.5%，而2004年WHO的一项统计显示，我国每年新发的结核病例占全球每年新发病例的15%，感染人数位居全球第二[1]。结核病不仅感染率高，其患病率、耐药率以及死亡率也处于较高水平。当前，对结核病的预防、诊断以及临床治疗已经成为我国重点解决的医学课题。临床症状、实验室检查以及影像学检查等是当前结核诊断的主要途径，通过早诊断、早治疗，绝大多数的结核病患者均可以治愈[2]。由于患者数量较多，现有的实验室检查手段无法满足临床上的快速检测需求，因此建立快速和准确的诊断方法，是当前结核病研究的重要方向。我院2011年1月至2012年1月间收集了疑似结核病呼吸道和体液标本共426份，采用FQ-PCR 法和涂片法对其进行同步检测，现对这两种方法的诊断效果进行分析总结，报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 我院2011年1月至2012年1月间收集了疑似结核病呼吸道和体液标本共426份，均为我院门诊或住院患者，每位患者留取呼吸道或体液标本一份。426份标本全部送检，其中痰液198份，支气管灌洗液100份，尿液51份，胸腔积液28份，淋巴穿刺液21份、脑脊液18份，脓性分泌物10份。426例患者中，最终有201例临床确诊为结核病，非结核 病患者则为225例，包括肺炎、肺癌、慢性支气管炎、哮喘等。

1.2 试剂和仪器 FQ-PCR 仪：美国ABI7300 扩增仪，购自中山达安基因；TB-PCR 荧光定量检测试剂盒：购自中山大学达安基因股份有限公司。

1.3 检测方法 本次共送检426份呼吸道和体液合格标本，对每个标本同时进行FQ-PCR 法和 涂片法检测，对于痰液标本则先用4%的氢氧化钠溶液进行消化浓缩结核杆菌。FQ-PCR 法检测 按照试剂盒说明进行操作，涂片法则按照常规的实验操作规程进行操作。

1.4 统计学处理 统计数据采用SPSS 12.0软件分析，变量数据分析采用t 验，率的比较则采用秩和检验分析，P＜0.05 差异有统计学意义。

2 结果

2.1 426份标本的FQ-PCR和涂片法检测结果426份标本的FQ-PCR和涂片法检测结果如表1所示，总阳性率:FQ-PCR 法34.51%，涂片法为14.32%，结果差异有统计学意义(P＜0.01)。

2.2 201例确诊病例的检测结果 本组共有201例患者临床确诊为结核病患者，阳性率：FQ-PCR 法66.67%,涂片法29.85%,结果有统计学差异(P＜0.05)，如表2 所示。

2.3 两种方法的敏感性和特异性结果 两种检测方法的敏感性和特异性结果如表3 所示，FQ-PCR法分别为66.67%和100%，涂片法分别为29.85%和100%。

表1 426份标本的FQ-PCR和涂片法检测结果

表2 201例确诊病例的检测结果

表3 两种方法的敏感性和特异性结果

3 讨论

结核病的实验室诊断长期以来主要依赖细菌学的涂片和培养法进行检查。涂片法具有操作简便、快捷、价格低廉且可以明确结核传染源等优点，但通常情况下敏感性较低，无法满足对结核病的诊断需求[3]。分子生物学技术近年来得到了飞速发展和进步，已被广泛应用结核的实验室鉴别和诊断，具有快速准确、高灵敏度、高特异性等特点[4]。本文共收集各类标本426份，其中采用涂片法的阳性率仅为14.32%，敏感性仅为29.85%，而FQ-PCR 法的阳性率则可以达到34.51%，敏感性更是达到了66.67%，但两者的特异性结果则均为阳性和假阴性均具有较好的检测准确率。由此可见结核病诊断中，FQ-PCR 法与涂片法相比具有更高的敏感性和阳性检出率，检测结果更加可靠，但该法相对价格较高，需要医院具备相应的医疗设施。综合上述，FQ-PCR 法因其显著的优势必将在临床上得到越来越广泛的应用，而涂片法亦因其自身存在的优势而继续在临床上得到使用。

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