邹大琼 蔡长缨 詹连生
植酸酶在饲料工业中得到了广泛的应用。但因其对高温、高湿的敏感性,影响了其在饲料制粒中的活力。为了解决植酸酶在颗粒饲料中的应用,在颗粒饲料生产过程中,采取制粒后喷涂液态植酸酶的方法,从而有效地减少了制粒过程中高温、高湿条件造成的酶活损失。
饲用植酸酶的测定,国标GB/T18634—2009(以下简称GB/T)已有明确规定,但对液态植酸酶试样溶液的制备没有明确规定。由于各质监部门对液态植酸酶试样溶液制备理解不同,故采用的稀释液各异,从而导致所得到的检验结果差异很大,引起产品质量纠纷。
为了解决由于检验方法的不统一而导致的质量纠纷,按GB/T中固体样试液制备的提取液方法,我们进行了用其它提取液提取酶样对测定结果影响的试验。
试验结果表明:按GB/T中固体样试液制备的提取液方法进行液体酶试样溶液的制备和稀释,所测结果是正确的。
乙酸缓冲液(参照GB/T18634—2009中5.3配制,以下简称GB/T5.3);蒸馏水为市售纯净水;其余试剂均遵照GB/T执行。
试样溶液制备:分别准确移取一定量的液体样品于100 ml容量瓶中,分别加入GB/T5.3缓冲液、蒸馏水和纯净水,定容摇匀,分别用GB/T5.3缓冲液和水稀释。以下操作按GB/T进行。
表1结果说明,提取酶样的溶液不同,其结果相差较大,只有按照GB/T用乙酸-乙酸钠、牛血清白蛋白缓冲液(即GB/T5.3缓冲液)提取酶样并稀释,其结果即可符合标示量,其余两种提取液测定结果均偏低。
表1 液体酶试样溶液提取液的测定结果
取6个全国具代表性公司的植酸酶液体样品,分别用GB/T5.3缓冲液和蒸馏水制备试样溶液,按GB/T操作程序测定其酶活,结果见表2。
表2 缓冲液和蒸馏水制备试样溶液的测定结果
表2试验结果说明,GB/T5.3缓冲液提取液酶活测定结果均高于蒸馏水提取液测定结果。有的公司的酶液用蒸馏水提取液测定的酶活仅为缓冲液提取液的40%左右,高者为70%~80%。按蒸馏水提取液提取酶液样的测定结果,仅一个公司的样品达到标示量(其标示量与实测值相差较大)。而按GB/T5.3缓冲液提取酶液样品测定,6家公司样品酶活全部达到标示量指标。
为了避免不必要的产品质量纠纷,应更明确地指出植酸酶液体酶样的试样溶液制备操作程序,我们认为,应按GB/T中8.2.3规定,即取定量的酶液样于容量瓶中,加入GB/T5.3缓冲液,定容至刻度,摇匀,并用GB/T 5.3缓冲液稀释后按GB/T中8.3规定进行。只有这样统一样品提取方法,才能避免不必要的质量纠纷,维持市场的正常秩序。