柴胡皂苷d对小鼠免疫性肝损伤丙二醛、白介素-8的影响

李 严 王 磊

柴胡皂苷d对小鼠免疫性肝损伤丙二醛、白介素-8的影响

李 严 王 磊

目的观察柴胡皂苷 d对免疫性肝损伤小鼠肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-8（IL-8）的影响。方法60只雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组和柴胡皂苷组，正常对照组一次性尾静脉注射0.9%生理盐水（20mg/kg），模型组和柴胡皂苷组一次性尾静脉注射刀豆蛋白A（20mg/kg），模型组给予0.9%生理盐水（160mg/kg）灌胃，柴胡皂苷组给予柴胡皂苷d（160mg/kg）灌胃，正常对照组给予0.9%生理盐水（160mg/kg）灌胃，每日2次，连续7d，末次给药后4h再次尾静脉注射ConA（20mg/kg），12h后检测肝组织中SOD、MDA的含量和血清TNF-α、IL-8的含量。结果模型组小鼠肝组织中SOD的含量明显低于柴胡皂苷组，柴胡皂苷组小鼠肝组织中SOD的含量明显低于空白对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）；柴胡皂苷组小鼠肝组织中MDA含量明显低于空白对照组、模型组，差异具有统计学意义（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷组小鼠肝组织中TNF-α、IL-8的含量明显低于空白对照组、模型组，差异具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。结论柴胡皂苷d对ConA所致的小鼠免疫性肝损伤有较好的保护作用。

柴胡皂苷d；肝损伤；SOD；MDA；IL-8；TNF-α

柴胡主要化学成分为挥发油、柴胡皂苷及多糖。柴胡皂苷可分为 a、b、d、e、f、h，其中最具活性的成分是柴胡皂苷d。研究发现柴胡皂苷具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、调节内分泌及免疫系统等作用。目前，国内外学者把柴胡皂苷应用于肾病、肝纤维化、肿瘤等疾病的治疗，笔者从柴胡皂苷 d对免疫性小鼠免疫性肝损伤的 SOD、MDA、TNF-α、IL-8的影响来研究其对肝损伤细胞的保护作用[1]。

1 资料与方法

1.1一般资料①动物雄性昆明种小鼠60只，清洁级，体重（25±3）g，6周龄，实验室温度20～26℃，相对湿度60%～80%，定时通风换气，每日12h光照环境饲养。②药物与试剂：刀豆蛋白A(Concanavalin,ConA)；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测试剂盒，TNF-α、IL-8的ELISA检测试剂盒，柴胡皂苷d。③仪器2K-15低温高速离心机；玻璃匀浆器；752型紫外可见分光光度计；HH-S11.2电热恒温水浴器；550酶标仪。

1.2动物分组及处理60只小鼠适应性喂养 3天后，随机分为正常对照组、模型组、柴胡皂苷组，每组20只，正常对照组一次性尾静脉注射0.9%生理盐水（20mg/kg），模型组和柴胡皂苷组一次性尾静脉注射ConA（20mg/kg），模型组给予0.9%生理盐水（160mg/kg）灌胃，柴胡皂苷组给予柴胡皂苷d（160mg/kg）灌胃，正常对照组给予0.9%生理盐水（160mg/kg）灌胃，每日2次，连续7d，末次给药后4h再次尾静脉注射ConA（20mg/kg）。

1.3标本采集及处理小鼠尾静脉末次给药后注射ConA 12h后，摘眼球取全血，低温条件下处死动物，摘取肝脏观察大体外观后，取同一肝叶组织制成匀浆待检。

1.4指标检测小鼠肝组织，剪碎后加入 0.9%氯化钠溶液，冰浴中制肝匀浆，3500r／min离心 15 rain，取上清液，按试剂盒测肝匀浆中SOD、MDA的含量。血清 TNF-α、IL-8采用双抗体夹心ABC-ELISA法。按试剂盒说明书操作。

1.5统计学处理所有数据均采用SPSS 12.0统计软件分析，所有计量资料用（±s）表示，采用t检验。

2 结果

模型组小鼠肝组织中 SOD的含量明显低于柴胡皂苷组，柴胡皂苷组小鼠肝组织中SOD的含量明显低于正常对照组，差异具有统计学意义（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷组小鼠肝组织中MDA含量明显低于正常对照组、模型组，差异具有统计学意义（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷组小鼠肝组织中TNF-α、IL-8含量明显低于正常对照组、模型组，差异具有统计学意义（P＜0.01、P＜0.05），见表1。

表1 三组小鼠肝组织中SOD、MDA、TNF-α及IL-8的比较

3 讨论

ConA是一种在人体内对肝细胞有特异性毒性作用的植物凝集素，是一种能在体外激活T细胞的丝裂原，其活化T淋巴细胞而致免疫性肝损伤是该动物模型的基本病理特点。与其他中毒性肝损伤模型相比，该模型被认为更加近似地模拟人类病毒性肝炎和自身免疫性肝病等病理过程，其病变与人类慢性肝炎非常接近，并且有肝脏特异性和靶向性。因此更适合研究人类病毒性肝炎、自身免疫性肝病等的病理机制和进行抗肝损伤的药物筛选[2]。综上所述，柴胡皂苷d通过抗氧化及抑制炎症因子保护免疫性肝损伤小鼠的肝细胞。对于柴胡皂苷d的其它方面作用机制还有待进一步研究。

[1]祖宁,李平.柴胡皂苷的生理作用及临床意义[J].中国中医药信息杂志,2005,12(4):94-96.

[2]张秀明,陈科力,李翰明,等.蛇葡萄根的抗肝降酶及抗自由基损伤作用[J].中国药师,1999,2(5):225-228.

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