王和飞 张燕 文攀 陈川平
摘要:利用蒽酮比色法对海南裸花紫珠的野生种和人工林的地上部分总糖进行测定,研究两者间的差异。结果显示,不论是野生林还是人工林,叶片糖含量都较皮部和木质部高,分别为11.00%和10.47%。
关键词:裸花紫珠;总糖;蒽酮比色法
中图分类号:S665.9文献标识码:ADOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2012.01.007
Determination of Total Sugar from the Aerial Part of Callicarpa nudiflora
WHANG He-fei,ZHANG Yan,WEN Pan,CHEN Chuan-ping
(College of Biological Science and Technology,Qiongzhou University,Sanya,Hainan 572022,China)
Abstract: Total sugar from the aerial part of Callicarpa nudiflora in wild forest and plantation was determined by anthrone colorimetry. The results showed that the sugar content of leaves was higher than bark and xylem, leaf sugar content in wild forest and plantation reached 11.00% and 10.47%, respectively.
Key words: Callicarpa nudiflora; total sugar; anthrone colorimetry
裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn),马鞭草科植物,为海南正致力于大力开发利用的南药品种之一。植株高3~4 m为灌木至小乔木,除老枝外浑身被褐色茸毛,单叶对生,花夏季开放,紫色或粉红色,果小红色[1]。喜阳光充足和湿润环境,适应性强,耐寒耐旱,也较耐阴,宜在肥沃、疏松的腐叶土中生长。紫珠全株可入药,其味苦、微辛,具有消炎、解毒、收敛止血等功效。可内服外敷,用于化脓性炎症,急性传染性肝炎,烧伤或烫伤,外伤出血[2-4]。主治咯血、吐血、便血、创伤出血、跌打瘀肿、风湿痹痛等症,为民间止血药,是海南常用黎药之一。目前国内外对紫珠属植物化学成分研究主要集中在黄酮、萜类、挥发油等成分的分析,对其可溶性总糖含量的研究未见报道。开展该研究旨在为裸花紫珠的综合利用提供理论依据。
1材料和方法
1.1材 料
栽培种由海南制药厂南繁基地提供,野生种采自五指山市毛阳镇。材料分为树皮、木质部、叶片3类。采集时间为4月份。
1.2方 法
1.2.1样品溶液的制备将样品放入烘箱内105 ℃烘干后调至60 ℃烘至恒质量,粉碎过0.2 mm筛,称取样品3 g于锥形瓶中,加入80 mL沸蒸馏水,放入沸水浴,振动提取0.5 h后逐滴加入25%醋酸铅溶液10~15 mL至沉淀出现,并加入10~15 mL10%磷酸二氢钠溶液,至不再产生沉淀为止,过滤,残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤,合并滤液,冷却至室温,用蒸馏水定容至100 mL [5-9]。每个样品各制备3份,备用。
1.2.2制作标准曲线分别取7支干净干燥的试管,按表1操作。用1 cm厚度的比色皿,以1号管为空白,在620 nm处迅速测其他各管的光吸收值。
1.2.3总糖的测定取4支试管按表2操作。操作过程与1.2.2相同,以1管为空白,测出2~4号管的A620nm平均值。
1.2.4 重现性试验准确称取人工林裸花紫珠叶片3 g,按照上述方法测定,检验其结果的稳定性。
1.2.5 加样回收率试验按下表3操作,测定试验加样回收率。
2结果与分析
2.1标准曲线的绘制
以2~7号管溶液含糖量为横坐标,吸光度(A620nm)为纵坐标,得出含糖量与A620nm值的相关标准曲线如图1。
2.2不同部分的吸收值
每个样品试验重复3次,取平均值,结果如图2。
从图2可以看出,无论是野生林还是人工林总糖含量在三者组织中都表现为:叶片>皮>木质部,其中,野生种和人工林叶片中总糖含量分别达到11.00%和10.47%,分别是皮部、木质部的 3.17倍、6.21倍和4.23倍、4.92倍。
2.3试验方法考察分析
2.3.1重现性其结果如表4。根据表4数据显示,吸光度稳定,RSD=1.76%,表示试验稳定,重复性良好。
2.3.2加样回收率根据试验设置分别测试验材料水溶性总糖含量,计算加样回收率,数据如表5。
3讨 论
药用植物中,多糖类化合物是其中非常重要的成分,研究表明,多糖在增强免疫能力、抑菌、调节血糖、抗氧化、抗病毒、抗疲劳、抑制肿瘤生长、延缓衰老等方面具有众多药理功能,且无毒副作用[10]。因此从植物中提取具有生物活性的多糖,已成为近年来的研究热点。本试验采用蒽酮比色测定紫珠总糖含量,因该方法操作简单、方便准确性高,糖含量在30 μg左右就可以测定。
笔者还分别对不同季节的野生林和人工林的上述各组织进行总糖的测定,其数据差异不大,各组织间的总糖含量规律一致。试验数据显示海南裸花紫珠野生种总糖的含量要略大于栽培种,但差异并不大,基本处在一致的水平。从某个意义上讲,人工林完全达到野生林的糖分含量,可以通过人工育苗进行大规模的人工种植,其有效糖分成分没有减少。一方面通过扩大人工林的种植面积,减轻野生资源的压力,另一方面人工林由于人为的施肥、管理,在相同的时间里可以获得更高的产量,同时也可以缩短砍伐的间隔。所以本研究对海南紫珠大规模开发利用,进一步挖掘紫珠药用价值提供了理论参考。
参考文献:
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收稿日期:2011-11-01;修订日期:2012-01-11
基金项目:琼州学院2011年度科研项目(QYQN201131)
作者简介:王和飞(1977-),男,海南人,讲师,硕士,主要从事作物遗传育种及生化研究。