c-myc和Skp2在口腔鳞状细胞癌中的表达及关系

赵静 南欣荣

[摘要] 目的 探讨c-myc、Skp2在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其相互关系。 方法 采用免疫组化SP法检测c-myc、Skp2在OSCC患者癌组织中的表达。 结果 在OSCC组织中，c-myc与Skp2阳性表达明显高于正常口腔组织，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。OSCC的阳性表达与OSCC的病理分级及临床分期有关；与患者性别、年龄及肿瘤发生部位无关。c-myc与Skp2呈正相关。 结论 c-myc与Skp2蛋白的表达参与了OSCC的发生与发展，为OSCC的诊断及预后提供重要依据。

[关键词] OSCC；c-myc；Skp2；免疫组化技术；蛋白表达

[中图分类号] R739.85[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）16-0067-02

The expression and relationship between c-myc and Skp2 in oral squamous cell carcinom

ZHAO Jing NAN Xinrong

Department of Stomatology, the First Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China

[Abstract] Objective To detect the expression of c-myc and Skp2 in oral squamous cell carcinoma (OSCC), and there may be relationship between the different installments. Methods The expression of c-myc and Skp2 was detected in OSCC and normal oral tissues by immunohistochemistry method. Results In OSCC the positive of c-myc and Skp2 was significantly higher than that in normal oral tissues, the result had statistical significance (P ＜ 0.05). The expression of positive in OSCC was closely related to cell differentiation, pathological grade and clinical stage. There was no relationship between gender, age and position. The expression levels of c-myc and Skp2 protein were positively correlated in OSCC. Conclusion C-myc and Skp2 might play an important role in the progression and development of OSCC. Take an important evidence for the diagnosis and prognosis of OSCC.

[Key words] Oral squamous cell carcinoma; c-Myc; Skp2; Immunohistochemistry method; Protein expression

在我国，口腔颌面部的恶性肿瘤中口腔鳞状细胞癌（OSCC）最多，多发生在40～60岁。研究发现OSCC的发生与致癌因子作用密切相关。c-myc可促进细胞恶变并导致肿瘤的发生。Skp2作为细胞周期中重要的调节因子与c-myc相互作用可以活化靶基因[1]。 目前有关c-myc与Skp2在OSCC的表达及相关性研究较少，本实验采用sp法，对2006年1月～2010年12月间手术治疗的患者进行探讨。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1．1 试剂c-myc小鼠抗人多克隆抗体，Skp2兔抗人多克隆抗体（均为武汉博士德公司）。

1.1.2 标本来源选取山西医科大学第一医院口腔颌面外科2006年1月～2010年12月间手术治疗的患者。其中76例为OSCC标本切片，10例为正常口腔黏膜。所有患者入院前均未接受过任何治疗，术后均有明确病理诊断。年龄33～78岁，男42例，女 34例。参考临床分期（UICC,2002）标准，病变在舌部35例，牙龈16例，颊黏膜13例，唇7例，腭5例。高-中分化61例，低分化15例；Ⅰ、Ⅱ期57例，Ⅲ、Ⅳ期19例。

1.2 方法

1.2.1 实验方法标本经石蜡包埋、切片、SP染色。Skp2一抗浓度1∶100，热修复2 min；c-myc一抗浓度1∶100，热修复90 s，均4℃过夜，DAB显色，复染，树脂封片。

1.2.2 图像及统计学方法生物显微镜观察，在肿物区内高倍镜下（×400）选至少10个视野，100个细胞，请经验丰富的医师，在各病理标本中找出细胞核或胞浆为棕黄色的细胞作为标准，染色程度大于等于标准细胞即为阳性细胞，取平均值作为阳性细胞率；c-myc＞10% ，Skp2＞20%为阳性[2]。用SPSS 17.0软件进行统计分析，P ＜ 0.05有统计学意义。两蛋白各临床参数间用χ2检验；两指标间用Spearman相关分析。

2 结果

2.1 Skp2与c-myc在OSCC与正常口腔组织中的表达

Skp2细胞核阳性，少数表达在胞浆（图1）；c-myc胞核或包浆为阳性（图2）。c-myc与Skp2阳性表达明显高于正常口腔黏膜组织，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。见表1。

2.2 Skp2、c-my与OSCC临床病理关系

通过检测，可见低分化阳性表达高于中-高分化；Ⅲ、Ⅳ期阳性表达高于Ⅰ、Ⅱ期。OSCC的阳性表达与患者性别、年龄及肿瘤发生部位无关。见表2。

3 讨论

研究表明，Skp2能特异性识别磷酸化底物并介导其泛素化降解。Skp2表达水平在G0/G1期非常低,而在S期表达增加。Skp2的表达受转录及转录后水平双重调节,作为细胞周期中重要的调节因子,能特异性识别磷酸化底物并介导其泛素化降解。myc作为一种癌蛋白转录因子,与细胞的生长、分化、增殖相关。

本研究结果显示，Skp2在OSCC中的阳性表达明显高于正常口腔黏膜组织，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。表明Skp2的过表达可能对OSCC的发生发展起重要作用。

Kaplan-Meier研究发现，Skp2高表达生存率显著降低。GSTAIGER[3]发现，上皮分化程度越低，Skp2表达越高。本实验在对OSCC中Skp2病理表达的研究时发现，Ⅲ、Ⅳ期阳性表达高于Ⅰ、Ⅱ期，表明Skp2会影响OSCC的分化与转移。研究发现c-myc基因在BL细胞中出现c-myc与Ig位点之间易位，组成一个高转活性的重排基因，启动c-myc转录，使 c-myc表达增强，细胞恶变，导致肿瘤发生。Skp2作为细胞周期中重要调节因子,能特异性识别磷酸化底物并介导其泛素化降解。Skp2与c-myc相互作用，可提高c-myc所引起的S期酶转化，从而活化靶基因。c-myc可促进SCF Skp2 对p27的泛素化降解[4]。本研究显示，c-myc在OSCC中阳显高于正常组织。病理分级表明，阳显与OSCC分化程度及临床分期呈正相关。有人发现[5]Skp2既参与了myc的蛋白降解,同时也是myc的转录协同因子，Skp2以myc依赖的方式增强c-myc诱导的S期转变,活化靶基因，myc诱导的转录也依赖Skp2，两者共同参与肿瘤的形成。研究显示，Skp2与c-myc在OSCC中呈正相关表达，可推断Skp2、c-myc与OSCC有相关性。

[参考文献]

[1]vonder Lehr N，Johansson S，Wu S，et al. The F-box protein Skp2 participates in c-myc-regulated[J]. Mol Cell，2003，11（5）：189-200.

[2]Hershko D，Bornstein G. Inverse relation between levels of p27（kipl） and of its ubiquitin ligase subunit Skp2 in colorectal oscc[J]. Cancer，2001，91（9）：45-51.

[3]Rangarajan A，Hong SJ，Weinberg RA． Species-and cell type-specific requirements for cellulartransformation[J]． Cancer Cell，2004，6（2）：171-183．

[4]Guo Y，Niu C，Breslin P，et al. c-Myc-mediated control of cell fate in megakaryocyte-erythrocyte progenitors[J]. Blood，2009，114（10）：2097-2106.

[5]邹叔彪，刘庭波，陈志哲. C-myc小干扰RNA对急性粒细胞白血病HL-60细胞增殖凋亡的影响[J]. 中国实用内科杂志，2007，27（Suppl 1）：94.

（收稿日期：2012-03-13）