火焰原子吸收分光光度法测定鹿角胶源钙中钙的含量

韩晶 李丹

摘 要：目的：建立火焰原子吸收分光光度法测定鹿角胶源钙中钙的含量。方法：Ca空心阴极灯电流10mA；狭缝宽0.7nm；波长422.7nm；点灯方式NON-BGC；火焰：空气-乙炔；火焰原子吸收分光光度法。结果：钙在10-80?g/mL范围内线性关系良好，相关系数r=0.9994，平均回收率（n=6）为99.6%，RSD为2.7%。结论：此测定方法操作简单快捷且重现性好、专属性强，是该产品质量控制的有效方法。

关键词：鹿角胶源钙 钙 火焰原子吸收分光光度法 含量测定

中图分类号：O657 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2012）12（a）-00-02

鹿角胶源钙以东北梅花鹿角为原料，经低温萃取、低温冷冻分离干燥、低温超微粉碎等国内最先进的生产技术精制而成。具有温补脾肾、滋益精血、跌打损伤、刺激血红蛋白、肌蛋白的合成，预防贫血、强健体质之功效。为了控制质量，该文采用火焰原子吸收分光光度法对鹿角胶源钙中的钙进行了含量测定。

1 原理

试样经微波消解后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收422.7 nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量。

2 试剂

（1）去离子水；（2）盐酸（优级纯）；（3）硝酸（MOS级）；（4）20 g/L氧化镧溶液。称取23.45 g氧化镧（高纯试剂4 N），先用少量去离子水湿润再加75 mL盐酸于1000 mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度；（5）钙单元素标准溶液1000 μg/mL（国家标准物质中心）GBW（E）080118。

3 仪器设备

（1）岛津AA-6300原子吸收分光光度计；（2）CEM MARS5微波消解炉；（3）EH20B LabTech电加热板。

4 方法与结果

实验中的样品及原料药均由生产企业提供。

4.1 预实验

由于样品及原料药中钙的含量范围未知所以进行预实验对实验条件进行摸索。精密称取样品0.5 g于消解罐中，加入硝酸5 mL，放置15 min，然后把消解罐放入微波炉中的转盘上进行消解。待微波消解仪停止工作后，小心泄掉罐内压力，将消解液转移至烧杯中，于电加热板上缓缓加热至红棕色挥尽，并继续缓缓浓缩至2～3 mL，放冷，用20 g/L氧化镧溶液转入25 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得样品的供试品溶液。同法制成原料药的供试品溶液。精密吸取钙单元素标准溶液（1000 μg/mL）5 mL置100 mL容量瓶中，加20 g/L氧化镧溶液稀释至刻度，摇匀，制成50 μg/mL的钙标准储备液。分别精密吸取钙标准储备液0.5 mL、1 mL、3 mL、4 mL、6 mL置50 mL容量瓶中，加20 g/L氧化镧溶液稀释至刻度。制成标准系列含钙0.5 μg/mL、1 μg/mL、3 μg/mL、4 μg/mL、6 μg/mL。测定其吸光度，并进行回归分析。经预实验发现：样品溶液的吸光度远远超过了标准曲线的测定范围，若要在线性范围内需要稀释2500倍。样品的逐步稀释必然会给测定的结果带来较大的影响，所以减小称样量至0.02 g（精确至0.00001 lg），使用十万分之一天平进行称量；同时赶酸后直接稀释至100 mL容量瓶中，仅进行一步稀释；最后再扩大标准曲线的范围，制成标准系列含钙10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL、60 μg/mL、80 μg/mL测定其吸光度，并进行回归分析。

4.2 样品的处理

精密称取样品0.02 g（精确至0.00001 g）于消解罐中，加入硝酸5 mL，放置15 min，然后把消解罐放入微波炉中的转盘上，如表1所示的微波消解程序进行消解。待微波消解仪停止工作后，小心泄掉罐内压力，将消解液转移至烧杯中，于电加热板上缓缓加热至红棕色挥尽，并继续缓缓浓缩至2～3 mL，放冷，用20 g/L氧化镧溶液转入100 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。微波消解程序见表1：

4.3 空白的处理

同法同时制备试剂空白溶液。

4.4 钙标准曲线及线性范围

分别精密吸取钙单元素标准溶液（1000 μg/mL）0.5 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL置50 mL容量瓶中，加20 g/L氧化镧溶液稀释至刻度。制成标准系列含钙10 μg/mL、20μg/mL、40 μg/mL、60 μg/mL、80 μg/mL。测定其吸光度，并进行回归分析。结果表明线性关系良好。见表2。

4.5 结果

4.5.1 仪器条件的选择

a）Ca空心阴极灯电流10 mA；b）狭缝宽0.7 nm；c）波长422.7 nm；d）点灯方式NON-BGC；e）火焰：空气-乙炔。

4.5.2 精密度试验

取同一批样品，依法制成供试品溶液。导入原子分光光度计中，测定其Abs值，重复6次，结果样品含量的RSD为0.4%，结果表明所用仪器具良好的精密性。见表3。

4.5.3 稳定性试验

取同一批样品，依法制成供试品溶液。分别在第0，2，4，6，8h导入原子分光光度计中，测定Abs值，其RSD为1.0%，结果表明8 h内供试品溶液中钙的含量基本稳定。见表4。

4.5.4 重复性试验

取同一批样品，按供试品溶液的制备方法平行制备6份，导入原子分光光度计中，从标准曲线中计算其含量，结果钙的平均含量为0.21g/g，RSD为1.6%，结果表明本法具良好的重复性。

见表5：

4.5.5 回收率试验

精密称取已知含量的供试品6份，精密称定，分别精密加入对照品溶液（1000μg/mL）1 mL，依法测定，计算回收率，结果见表6：

如表6所示，测得钙的平均回收率为99.6%，RSD=2.7%。

结果表明本法回收率较好，准确度较高。

5 结语

经过整个方法学验证表明：该方法精密度高、重现性好，所制备的样品溶液稳定、回收率高。并且测定的方法简单快捷、处理过程简单，在实际检验工作中具有良好的前景，是该产品质量控制的有效方法。

经测定：5批原料药平均含量为0.22 g/g，10批样品含量均在0.21 g左右，所以建议本品限度定在每1 g钙含量应为0.17～0.24 g。

参考文献

[1] 国家药典委员会编.中国药典[M].化学工业出版社，2005年版一部.

[2] 国家药典委员会编.中国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

[3] 食品中钙的测定.GB/T5009.92-2003[S].