鸭副黏病毒病并发大肠杆菌病的诊治

张秀峰，丁 壮，刘佳旭，刘玉茹

（1.吉林大学畜牧兽医学院，吉林 长春 130062；2.吉林农业科技学院动物医学学院，吉林 吉林 132101；3.吉林市船营区越北镇动物疾控中心，吉林 吉林 132100）

吉林省吉林市经济技术开发区某养殖场饲养的1500只蛋鸭于2011年9月发生了传染病，并引起大量死亡，发病后经我校实验室诊断、治疗，病情得到了控制，现将该病的诊断及防治情况介绍如下。

1 临床症状

患鸭发病初期拉白色稀粪，其后粪便呈水样、暗红色或墨绿色；食欲减退、少食或拒食，饮欲增加，体重迅速减轻[1]。有的病鸭呼吸道发出“咕咕声”，出现张口呼吸、甩头、咳嗽等呼吸道症状；耐过鸭会出现神经症状，饮水时上述症状更加明显。部分鸭头肿胀，并有流泪现象，3d后出现死亡。

2 病理剖检变化

剖检濒死鸭或病死鸭，头颈部皮肤充血、出血，脑充血、出血；有的见鼻腔充血或出血，喉头黏膜出血，支气管内充满黄色干酪样物；个别鸭气囊出现轻度浑浊[2]。脾脏肿大、淤血；心脏外膜见出血斑点，肝脏充血、出血，个别有包肝现象；腺胃和肌胃角质层下出血；胰腺见出血点或灰白色坏死；盲肠扁桃体出血，肠道黏膜出血、坏死、溃疡、结痂，从十二指肠开始至后肠段病变更加明显和严重，直肠尤其明显，有散在性溃疡病灶，有的覆盖红褐色结痂[3]。

3 诊断

3.1 细菌学检查

3.1.1 直接涂片镜检 取病死鸭肝、脾等病料触片进行革兰和瑞特染色镜检，观察有无细菌[4]。

3.1.2 细菌的分离培养 无菌取病鸭的肝、心脏病料分别划线接种于普通琼脂平板、伊红美蓝琼脂平板、肉汤于37℃恒温培养箱培养24h后观察结果[5]。

3.1.3 涂片染色镜检 挑取普通琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板上可疑菌落涂布于载玻片上，革兰染色，在油镜下观察细菌的基本形态。

3.1.4 生化试验 糖类分解试验、硫化氢试验、MR试验、VP试验等，然后观察记录结果。

3.1.5 动物试验 将已鉴定菌株作为接种菌株，随机选取10只小鼠平均分为两组，即试验组和对照组各5只，试验组每只小鼠腹腔接种菌液0.2mL，对照组每只小鼠腹腔注射0.2mL无菌生理盐水，接种后隔离饲养，每日观察数次，连续观察5d，记录小鼠的发病情况、死亡时间及死亡数量，然后对小鼠进行解剖分离致病菌，进行培养，观察菌落的形态及细菌染色特征。

3.1.6 药敏试验 取经纯化后的单个菌落接种肉汤培养基，37℃培养24h后，将菌液均匀涂布在普通琼脂培养基上进行药敏试验，然后置37℃培养24 h，观察、测定抑菌环的大小。药敏纸片包括四环素、强力霉素、卡那霉素、红霉素、链霉素、青霉素、恩诺沙星、氟苯尼考[6]。

3.2 病毒的分离、鉴定

取少量病死鸭的病料 （肝脏、脾脏、胰腺等），按照1∶5的比例加入灭菌的生理盐水，在组织研磨器中研磨，制备组织匀浆。将匀浆转移到灭菌的离心管，于台式高速离心机中10000r／min离心5 min，吸取上清，转移至另一灭菌离心管中，并加入双抗（青霉素和链霉素），37℃水浴锅中作用30min。用无菌注射器吸取上述处理液，0.1mL／只的剂量，尿囊腔接种10日龄的SPF鸡胚4只，37℃培养箱中培养，每天人工翻胚、照胚各2次，及时取出死亡鸡胚，并置4℃冰箱中6h左右，观察死胚病变，并无菌收集鸡胚尿囊液，然后进行病毒血凝试验和血凝抑制试验，观察记录结果[7]。

4 诊断结果

4.1 细菌学检查结果

4.1.1 染色镜检结果 镜下观察到单个散在的革兰阴性两端钝圆的短杆菌。

4.1.2 细菌培养特性 普通琼脂平板上长出形态凸起，光滑湿润，灰白色，半透明，边缘整齐，有特殊的粪便臭味的菌落。伊红美蓝琼脂平板上为圆形蓝紫色菌落，中心为紫黑色带金属光泽。肉汤呈均匀浑浊，管底有黏液样沉淀物。经染色镜检细菌形态与直接涂片镜检形态一致。

4.1.3 生化培养结果 糖类分解试验结果：发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、木糖、甘露醇，产酸产气，产生靛基质，不发酵蔗糖。硫化氢试验阴性；MR阳性、VP阴性[8]。

4.1.4 动物试验结果 试验组的5只小鼠全部死亡，剖检小鼠，分离培养小鼠肝脏上病菌，发现与病死鸭分离出的病菌的形态、染色特性、培养特性完全一样。

4.1.5 药敏试验结果 结果该菌对四环素、卡那霉素、红霉素、链霉素、青霉素、恩诺沙星不敏感，对氟苯尼考和强力霉素高效。

4.2 病毒的分离、鉴定结果

4.2.1 病料研磨液接种10日龄鸡胚 4枚鸡胚均在48h左右死亡，死亡后的鸡胚尿囊液清亮，胚体背部及爪尖有出血现象。

4.2.2 无菌收集上述4枚鸡胚尿囊液 并对这4枚鸡胚尿囊液分别进行血凝试验，试验结果显示，已经分离出病毒，且病毒具有凝集鸡红细胞的能力，平均血凝效价为27[9]。

4.2.3 进行血凝抑制试验 试验结果显示，标准阳性的新城疫血清对鸡胚尿囊液有抑制作用。

经上述诊断可以确诊为鸭副黏病毒病并发大肠杆菌病。

5 防治措施

5.1 对病鸭用抗鸭副黏病毒血清注射

同时用百毒杀带鹅消毒和水槽、料槽等用具，用氟苯尼考和强力霉素配合金刚烷胺拌料饲喂5d～7 d，治疗效果较好；未发病鸭使用疫苗紧急接种[10]。

5.2 供给鸭群足量的多种维生素和电解多维等

加强饲养管理，降低鸭群密度，注意搞好环境卫生，全场清除粪便、污物、彻底消毒，对病死鸭要做深埋处理。

经上述处理后，鸭群在第4天死亡开始减少，第5天鸭群食欲开始增加，第10天后鸭群基本恢复正常。

[1]张 坤，刁有祥，陈 琳.鸭瘟与鸭副黏病毒混合感染种鸭的诊治[J].中国家禽，2011，33（22）：56－57.

[2]甘孟侯.中国禽病学[M].北京：中国农业出版社，2003：8－11.

[3]袁圣丹，袁 生.蛋鸭副黏病毒病的初步诊断和防治[J].中兽医学杂志，2011（3）：43－44.

[4]丁孟建，胡世君.规模养殖场肉鸭大肠杆菌病病原的分离鉴定及耐药性检测[J].黑龙江畜牧兽医，2012（3）：105－107.

[5]潘俊斌.雏鸭大肠杆菌病的诊断与防治[J].养禽与禽病防治，2011（7）：14.

[6]龚新辉，沙依兰古丽，汪 萍，等.鸭大肠杆菌药敏试验研究[J].现代农业科技，2011（6）：331－335.

[7]温纳相，周 全，宋永峰，等.种番鸭副黏病毒病的生的学特性研究[J].养禽与禽病防治，2011（1）：2－5.

[8]刘风波，闫 芳，许 蓓，等.鸡传染性法氏囊病继发大肠杆菌病的诊治[J].国外畜牧学，2010，30（2）：89－91.

[9]陈延芝，庄志伟.应用新城疫弱毒疫苗与灭活疫苗防制鸭副黏病毒病的探索[J].养禽与禽病防治，2011（3）：35－37.

[10]程晓霞，朱小丽，陈仕龙，等.新城疫疫苗预防鸭副粘病毒病效果[J].畜牧兽医杂志，2010，29（2）：25－29.