猪衣原体病的诊断

段正赢，郭 锐，杨克礼，刘泽文，周丹娜，袁芳艳，梁望旺，田永祥＊

（1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，湖北 武汉 430064；2.动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北 武汉 430064）

猪衣原体病（Swine chlamydiosis）主要是由猪衣原体（Chlamydia suis）感染猪引起的一种慢性接触性传染病，临床表现妊娠母猪流产、早产和产弱仔；新生仔猪肺炎、肠炎、胸膜炎、心包炎、脑膜脑炎、多关节炎和结膜炎；种公猪睾丸炎等症状。常因菌株毒力，猪性别、年龄、生理状况和环境的变化而出现不同的征候群。猪群一旦感染本病，要清除十分困难，康复猪群可长期带菌，成为幼龄猪群的主要传染源，猪场内活动的野鼠和禽鸟可能是本病的自然散毒者。该病部分病例与猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪瘟等病有相似症状，给诊断和防治增加了难度。猪衣原体引起的流产和仔猪衣原体性肺炎－肠炎对集约化养猪业危害相当严重[1]。衣原体病也是一种人畜共患传染病，该病原体可以感染190多种鸟、几十种哺乳动物及人，具有重要的公共卫生学意义[2]。

2011年，湖北省A、B两个猪场发生了以怀孕母猪流产、适繁母猪返情为特点的疾病，两个猪场母猪群的数量分别为210头 和80头，均按本场的免疫程序对母猪群接种过乙脑疫苗、猪瘟疫苗及猪伪狂犬病疫苗，未注射猪蓝耳病疫苗、猪圆环病毒疫苗及衣原体疫苗。具体的发病情况见表1。经临床症状结合实验室检验，诊断为衣原体病。

表1 猪场发病情况Table1 The incidence of pig fields

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试样品 A场采集了21头母猪的血样及5头流产胎儿，B场采集了5头发病猪的血样。

1.1.2 主要试剂 衣原体间接血凝试验（IHA）[3]和酶联免疫吸附试验（ELISA）为本单位自制；JEV ELISA抗体检测试剂盒购自武汉科前公司；CSF ELISA抗体检测试剂盒、PRVgB／gE鉴别ELISA抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司；DNA、RNA提取试剂盒、Taq DNA聚合酶，均购自TAKARA公司；RNA反转录试剂盒，购自Fermantas公司；引物均由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。

1.2 方法

衣原体、日本脑炎病毒（JEV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪细小病毒（PRV）及猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体及病原检测根据目的不同分别应用IHA、ELISA、PCR及RT－PCR方法（表2），试验方法均按试剂盒说明书及分子克隆实验指南（第三版）[4]操作。

表2 抗体及病原检测方法Table2 Detection methods of antibody and pathogen

2 结果

2.1 抗体检测结果

由表3可知，CSFV 抗体、PRV－gB抗体、PRV－gE抗体、衣原体IHA抗体、衣原体ELISA抗体、JEV抗体阳性率分别为 88.5%（23／26）、80.8%（21／26）、0（0／26）、84.6%（22／26）、88.5%（23／26）、80.8%（21／26）。结果表明，猪群未免疫接种衣原体疫苗，检测到抗体阳性样品存在，说明猪群感染过衣原体。

2.2 病原检测结果

由表4可知，CSFV、衣原体、PRRSV病原检测阳性率分别为0（0／26）、69.2%（18／26）、0（0／26）。结果表明，衣原体PCR检测有18份阳性，说明猪群存在衣原体病原。

表3 猪场抗体检测结果Table3 Antibody test results in pig fields

表4 猪场病原检测结果Table4 Pathogen test results in pig fields

3 讨论

实验室检测结果显示，衣原体IHA抗体和ELISA抗体阳性份数为22份和23份，经PCR检测衣原体阳性份数为18份，A场的JEV抗体阳性率为33.3%，其他疾病经抗体和病原检测未见异常，结合临床症状，诊断为猪衣原体感染。

针对两个猪场的实际感染情况，经采取综合防控措施，疫情得到了有效控制。

加强消毒，隔离病猪，切断传播媒介。对发病猪做好隔离工作，避免病原传染给健康猪只。做好猪场卫生清洁工作，全场实行带猪消毒。栏舍彻底清洗，用20g／L氢氧化钠浸泡消毒。加强产房、场区环境消毒，以有效控制发生衣原体接触传染的机会。将流产胎儿及分娩排泄物集中无害化处理，保证产房卫生，以防新生仔猪感染本病。做好灭鼠工作，同时要防止其他动物如猫、野狗、野鸟等携带衣原体病原侵入和感染猪群，达到切断各种传播媒介的目的。

建立衣原体疫苗免疫计划，实施紧急免疫接种。全场紧急接种衣原体灭活苗。以后的衣原体灭活苗免疫接种计划里，应对种公猪每年免疫接种2次，繁殖母猪群在每次配种前1个月或配种后1个月免疫接种一次。

加强药物防治，细心护理病猪。选用四环素、强力霉素、土霉素等药物对病猪进行治疗，连用5d～7 d，要加强对病猪的护理。同时选用四环素、强力霉素、土霉素、红霉素、金霉素等药物混入饲料中，对猪群进行群体性防治。为防止出现抗药性，要合理交替使用敏感药物。对无治疗价值的病猪应及时淘汰。

猪衣原体病引起的流产，临床上某些症状与猪伪狂犬病、猪蓝耳病、猪乙型脑炎等相似，因此给临床诊断增加了难度，只有结合实验室检验方能确诊。与以上几种病毒病相比较，目前养猪生产上对衣原体病没有足够的认识和重视，疾病有可能得不到及时诊断和防治。

湖北省农业科学院畜牧兽医研究所从20世纪80年代开始关注和研究猪衣原体病，杨宜生等[5]在国内首先报道猪衣原体病，并研制猪衣原体疫苗。近些年来，从各省衣原体病的调查情况表明，猪衣原体病在我国的规模化猪场流行比较普遍，不同年龄、不同品种的猪群均可感染本病，尤其怀孕母猪和新生仔猪更为敏感。由于衣原体很难清除，感染场应将猪衣原体病纳入常年免疫计划，实施抗体监测，这是预防本病的主要措施。但猪衣原体疫苗目前尚未广泛应用，一方面可能因为该病未引起猪场足够重视，认为危害不是很大；另一方面，从疫苗的研究现状来看，衣原体需在鸡胚卵黄囊或细胞上培养，疫苗存在生产周期相对较长、大批量生产困难等等因素。由于衣原体所引起的传染病是一种人畜共患病，因此猪场员工在免疫、消毒等具体操作时要做好个人防护工作，尤其是衣原体感染场应更加重视。

[1]邱昌庆，高双娣，周继章，等.猪衣原体病的调查[J].动物医学进展，2003，24（2）：88－91.

[2]谢 彬，马 玲，黄红梅，等.种猪衣原体与伪狂犬混合感染的诊断与防治[J].黑龙江畜牧兽医，2011（4）：96－97.

[3]杨宜生，姜天童，孟庆友，等.间接血凝试验检测衣原体抗体的研究[J].畜牧兽医学报，1984，15（3）：181－187.

[4]赵德明，张中秋，沈建中，等.猪病学[M].9版.北京：中国农业大学出版社，2008：332－333.

[5]杨宜生，姜天童，孟庆友，等.猪衣原体病的病原分离和鉴定[J].中国兽医杂志，1984（9）：4－6.