人表皮生长因子受体-2在胃癌组织中的表达及意义

刘 莉，姜 勇，李 丽，刘都礼

(1.成都大学附属医院病理科，四川 成都 610081;2.四川大学华西医院病理科，四川 成都 610041)

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一，手术与化疗仍是治疗胃癌的主要手段。随着肿瘤分子生物学的发展，分子靶向药物治疗成为目前肿瘤治疗的一个热点。靶向治疗联合化疗应用已开始进行临床试验［1-3］，人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)是胃癌靶向治疗的靶点基因。本研究采用免疫组化方法检测胃癌组织中HER-2的表达，旨在探讨HER-2与胃癌临床病理特征的关系，为临床分子靶向药物的选择提供参考，也为胃癌的预后判断提供客观的参考指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2009年6月至2010年6月在成都大学附属医院和四川大学华西医院行根治性手术的胃癌手术标本70例进行研究。全部病例术前均未行放、化疗。男43例，女27例，年龄22～87岁，平均年龄53.23岁。肿瘤直径0.8～15.0 cm，平均4.56 cm。肿瘤部位:胃上部(贲门/胃底)20例，中部(胃体)17例，下部(胃窦/幽门)33例。分化程度:高、中分化30例，低分化及印戒细胞癌40例。侵袭深度:未侵及浆膜45例，侵及浆膜25例。淋巴结转移情况:有淋巴结转移49例，无淋巴结转移21例。根据国际抗癌联盟(UICC)关于胃癌TNM分期方法进行临床分期，Ⅰ期/Ⅱ期32例，Ⅲ期/Ⅳ期38例。

1.2 方法 主要试剂:HER-2，鼠抗人单克隆抗体，编号ZM-0065，克隆号:B68。试剂盒选用即用型免疫组化二步法Elnvision广谱染色试剂盒及DAB显色试剂盒，均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。方法:肿瘤组织标本均经甲醛固定、石蜡包埋，并经HE染色组织学确诊。免疫组化采用Envision二步法，严格按产品说明书操作。镜下图像以Olympus数码显微成像系统BX40进行采集、分析。

1.3 结果判定 参照修订后的HercepTestP评分标准［1］，0为没有染色或＜10%的瘤细胞有膜染色;1+为＞10%的瘤细胞有微弱的膜染色，或瘤细胞只有部分膜染色;2+为＞10%的瘤细胞有弱到中等的完全或基底外侧膜染色;3+为＞10%的瘤细胞有中等到强的完全或基底外侧膜染色。用PBS代替一抗作阴性对照。每张切片由二位高年资病理医师阅片判读。

1.4 统计学方法 应用SPSS 15.0统计软件包进行统计学分析。计数资料采用两个(或多个)样本率比较的χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HER-2基因在胃癌组织中的表达情况 HER-2阳性定位于细胞膜，呈棕褐色颗粒状，部分细胞浆着色(图1)。阳性表达率为27.1%(19/70)，过表达率为15.7%(11/70)。

图1 胃癌组织HER-2的免疫组化染色(×400)

2.2 HER-2基因表达与临床病理参数的关系HER-2在胃癌组织中的表达与肿瘤分化程度、侵袭深度、有无淋巴结转移及 TNM分期有关(P＜0.05)，而与患者的性别、年龄、肿瘤部位和大小无关(P＞0.05)。分化好的胃癌病例阳性表达明显高于低分化癌，见表1。

3 讨论

HER-2也称为 c-erB-2或 HER-2/neu，属于HER/ErbB家族的四个成员之一。HER-2单体无活性，必须形成二聚体才能产生活化信号。HER-2异质二聚体大大减弱了EGFR与cab1的偶联，减少了EGFR在细胞内吞过程中的降解，促进EGFR循环回到细胞膜，使EGFR在细胞膜过度表达，加速了细胞的增殖，导致肿瘤的形成和增长加快。国内张杰等［4］通过对123例胃癌组织的研究认为HER-2/ neu基因扩增或过表达与胃癌患者的预后有明显关系，特别是有该基因扩增的患者，其术后死亡率高、生存期短、预后差。本研究结果显示:HER-2在胃癌组织中的阳性率为27.1%，在胃癌中过表达率(IHC3+)为15.7%。而ToGAⅢ期临床试验［1］研究的IHC3+为5.9%～32.8%，在不同国家和地区差异较大。

表1 胃癌组织中HER-2的表达与其临床病理参数的关系

本研究还显示HER-2表达随肿瘤分化越高表达越强，HER-2阳性表达与胃癌的侵袭、淋巴结转移有关，和文献基本一致。说明HER-2参与了胃癌的增殖、侵袭、转移等行为，HER-2过表达提示胃癌患者预后越差，并且HER-2已经成为胃癌靶向治疗的靶标［5.6］。

曲妥珠单抗作为乳腺癌治疗的第一个分子靶向药物，已在HER-2过表达的乳腺癌临床治疗中取得了明显疗效。筛选患者时，HER2蛋白表达IHC3+可以直接进行靶向治疗，IHC2+则需进行荧光原位杂交(FISH)基因检测。IHC3+患者可避免做FISH检测的高昂费用。曲妥珠单抗在胃癌中的应用和HER2检测标准化尚在研究中。Tanner等［7］曾专门进行了曲妥珠单抗对胃癌和乳腺癌药物敏感性比较的研究，发现两种肿瘤对曲妥珠单抗的敏感性相同，因此曲妥珠单抗临床治疗HER-2高表达的胃癌理应有效。在2009美国临床肿瘤学会(ASCO)年会上，曲妥珠单抗治疗HER-2阳性胃癌的ToGA研究结果［1］格外引人瞩目。在3807例晚期胃癌患者中，HER-2阳性表达率为22.1%，曲妥珠单抗与化疗联合的疗效明显优于单纯化疗。曲妥珠单抗成为HER-2阳性胃癌患者的重要治疗药物。本研究结果提示，检测胃癌组织中HER-2的表达有助于筛选对曲妥珠单抗治疗敏感的胃癌患者，同时对胃癌患者的预后评价提供参考。

［1］Bang YJ，Van Cutsem E，Feyereislova A，et al.Trastuzumab in com

bination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER-2positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer(ToGA):a phase3，open-label，randomised controlled trial［J］.Lancet，2010，376(9742):687-697.

［2］Ellis LM，Hicklin DJ.Pathways mediating resistance to vascular endothelial growth factor-targeted therapy［J］.Clin Cancer Res，2008，14:6371-6375.

［3］Lenz HJ，Mayer RJ，Gold PJ，et al.Activity of Cetuximab in patients with colorectal cancer refractory to both Irinotecan and Oxaliplatin［J］.J Clin Oncol，2004，24:3510.

［4］张杰，舒维清，朱卫，等.胃癌中Her-2/neu过表达与基因扩增及其意义［J］.中华病理学杂志，2003，32(1):52-53.

［5］Jorgensen JT.Targeted HER-2 treatment in advanced gastric cancer［J］.Oncology，2010，78(1):26-33.

［6］Okines AF，Cunningham D.Trastuzumab in gastric cancer［J］.Eur J Cancer，2010，46(11):1949-1959.

［7］Tanner M，Hollmen M，Junttila TT，et al.Amplification of HER-2 in gastric carcinoma:association with TopoisomeraseⅡagene amplification，intestinal type，poor prognosis and sensitivity to trastu-zumab［J］.Ann Oncol，2005，16(2):273-278.