EP7.0和USP34两版本药典中扑米酮相关杂质检测方法探讨

徐飞

(南通精华制药股份有限公司，江苏南通226006)

扑米酮是本公司生产三十几年的一个原料药，也是现今国内唯一一家生产商，扑米酮主要用于癫痫大发作和精神运动性发作。服用量从小剂量逐渐递增，一周后增至常用量，口服一次0.25g。本公司在2005年将该品种在欧洲注册且取得了 CEP证书，CEP证书号为 R0－CEP2005－109－Rev01，公司本品种现生产Ch.P2010，EP7.0和USP34三个版本规格。欧洲药典扑米酮从EP5.0开始采用HPLC方法检测相关杂质，美国药典从USP34采用HPLC方法检测相关杂质，两个药典侧重点有些差异，现对其方法进行研讨［1，2］。

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津LC－20AT高效液相色谱仪。LC－20AT泵，SIL－20A自动进样器，SPD－20A检测器，LC solution工作站。

1.2 药品和试剂 EP7.0版本标准品:扑米酮标准品(来源批号1)，扑米酮峰鉴别标准品(包含杂质A，B，C，D，E，F) (来源批号:n。1)(均从EDQM购买)，(杂质B)苯巴比妥二级标准品(本公司制备);USP34版本标准品:扑米酮标准品(批号LOTHOD399)，苯巴比妥标准品(批号KOH134)，扑米酮有关物质C标准品(批号LOTFOI107)，均从美国USP购买。甲醇为色谱纯(Merk公司)，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 流动相:溶液A:1.36 g·L－1磷酸二氢钾，溶液B:甲醇，流速:3.2 mL·min－1，检测波长:215 nm，进样量:10 μL，使用自身对照溶液进行外标法进行各杂质含量计算。色谱柱(USP34):Merck Chromolith Performance RP－18e (4.6 mm×100 mm);色谱柱(EP7.0):Merck Chromolith Performance RP－18e(4.6 mm×150 mm)流动相比例如表1。

2.2 样品制备

表1 流动相比例

图1 EP7.0D的系统适应性图谱

图2 USP34的系统适应性图谱

2.2.1 USP34标准对照溶液的制备 称取扑米酮标准品10 mg，用甲醇定容至10 mL(即1 000 μg·mL－1的标准储备液)，精密吸取此溶液1.0 mL，用甲醇定容至100 mL，再吸取1.0 mL此溶液用甲醇定容至10 mL，此对照液用于各杂质的含量计算。系统适应性溶液:精密称取苯巴比妥标准品1 mg与扑米酮相关化合物C标准品1mg至100 mL容量瓶，用1 000 μg·mL－1的扑米酮标准储备液稀释至刻度，此溶液用于计算分离度和拖尾因子及鉴定峰。

EP7.0标准对照溶液a:用甲醇将1.0 mL测试液稀释至100 mL，再用甲醇将1.0 mL此溶液稀释至10.0 mL，此对照液用于各杂质的含量计算。系统适应性溶液:将5mg用于峰鉴别的标准品(含有杂质A、B、C、D、E、F)溶于5 mL甲醇，此溶液用于各杂质峰鉴定和计算分离度。

2.2.2 两版本药典相关杂质的规格要求比较 见表2。

表2 两版本药典方法相关杂质规格要求

2.2.3 系统应用性比较 见表3。

表3 两版本药典方法系统应用性比较

2.2.4 检出限和定量限的对比 见表4。

表4 两版本药典方法检出限和定量限对比

2.2.5 样品测试对比 见表5。

表5 两版本药典方法样品测试对比

3 讨论

对于扑米酮的EP7.0和USP34相关杂质测试方法，除色谱柱长度不一样外，其流动相、波长、流速、进样量等均一样。从以上两个版本的方法、质量标准规格、系统适用性、检测限、定量限和三批样品分析等几方面可以看出，EP7.0的测试方法因其相当校正因子比USP34的大，所以其对杂质的控制要求更加严格，从系统适用性可以看出EP7.0的测试方法分离效果更好一些，检出限和定量限EP7.0的测试方法也稍稍更好一点，从样品测试也可知EP7.0的测试方法稍更灵敏有效。且我公司生产的所有批次扑米酮均能符合EP7.0和USP34的质量要求。

［1］ 韩雪梅，李娟，张伟.氨磺必利有关物质检测方法的研究［J］.齐鲁药事，2011，30(8):461－463.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录.